自然殺傷細(xì)胞（Natural Killer Cell,NK）,因其殺傷腫瘤細(xì)胞或者病毒感染的細(xì)胞無(wú)需預(yù)先致敏而得名,是人體免疫監(jiān)視的第一道防線。細(xì)胞氧化還原水平在人類疾病中起著關(guān)鍵作用,在不同程度上參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。目前尚不清楚腫瘤細(xì)胞的一些特征分子,尤其是氧化還原水平對(duì)NK細(xì)胞抗腫瘤免疫應(yīng)答的影響。因此,本研究旨在揭示腫瘤細(xì)胞的氧化還原水平對(duì)NK細(xì)胞抗腫瘤應(yīng)答的影響和機(jī)制。硫氧還蛋白互作用蛋白（Thioredoxin-Interacting Protein,TXNIP）,是細(xì)胞內(nèi)的一種重要的氧化還原調(diào)節(jié)分子,通過(guò)與硫氧還蛋白（Thioredoxin Protein,Trx）的結(jié)合而抑制Trx的抗氧化作用,使細(xì)胞處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。TXNIP在多種癌癥組織和細(xì)胞系存在不同程度上表達(dá)下降,在提高TXNIP的表達(dá)后,癌細(xì)胞的增殖會(huì)受到影響,甚至誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。因此,TXNIP被認(rèn)為開(kāi)發(fā)用于許多人類疾病藥物的有吸引力的靶標(biāo)。TXNIP在腫瘤細(xì)胞中與氧化還原失衡緊密相關(guān),在NK細(xì)胞中與抗腫瘤活性下降相關(guān),但是它介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞高氧化水平對(duì)NK細(xì)胞抗腫瘤應(yīng)答的影響研究甚少。因此,通過(guò)氧化還原調(diào)節(jié)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 NK細(xì)胞
        1.1.1 NK細(xì)胞的簡(jiǎn)介
        1.1.2 NK細(xì)胞抗腫瘤應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制
    1.2 細(xì)胞氧化還原的生物學(xué)作用研究進(jìn)展
        1.2.1 細(xì)胞氧化還原信號(hào)通路
        1.2.2 氧化還原對(duì)腫瘤的作用
        1.2.3 氧化還原對(duì)NK細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用
    1.3 TXNIP
        1.3.1 TXNIP的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 TXNIP對(duì)細(xì)胞氧化還原水平的調(diào)節(jié)作用
        1.3.3 TXNIP對(duì) NK細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用
    1.4 本論文主要研究?jī)?nèi)容和意義
第2章 過(guò)表達(dá)TXNIP基因的腫瘤細(xì)胞系構(gòu)建
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.2.4 pcDNA-TXNIP-IRES-ZsGreen1 質(zhì)粒構(gòu)建與鑒定
        2.2.5 慢病毒包裝
        2.2.6 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系RMAS的篩選及建立
        2.2.7 Western blot檢測(cè)TXNIP蛋白表達(dá)情況
        2.2.8 流式檢測(cè)細(xì)胞表面TXNIP表達(dá)情況
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 Western blot檢測(cè)TXNIP的表達(dá)
        2.3.2 流式細(xì)胞檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞表面TXNIP的表達(dá)
    2.4 小結(jié)
第3章 過(guò)表達(dá)TXNIP對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡水平的影響
    3.1 前言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 Pacific Blue AnnexinⅤ/7-AAD雙染檢測(cè)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 細(xì)胞增殖評(píng)價(jià)
        3.3.2 細(xì)胞凋亡評(píng)價(jià)
    3.4 小結(jié)
第4章 腫瘤細(xì)胞過(guò)表達(dá)TXNIP對(duì) NK細(xì)胞殺傷敏感性的影響及其機(jī)制的研究
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.2.4 體外殺傷實(shí)驗(yàn)
        4.2.5 細(xì)胞內(nèi)ROS檢測(cè)
        4.2.6 線粒體ROS檢測(cè)
    4.3 統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 體外殺傷評(píng)價(jià)
        4.4.2 細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生評(píng)價(jià)
        4.4.3 細(xì)胞線粒體ROS產(chǎn)生評(píng)價(jià)
    4.5 小結(jié)
第5章 腫瘤細(xì)胞過(guò)表達(dá)TXNIP對(duì) NK細(xì)胞抗腫瘤功能影響研究
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        5.2.2 NK細(xì)胞體內(nèi)清除實(shí)驗(yàn)
        5.2.3 腫瘤模型建立
        5.2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    5.3 結(jié)果與討論
    5.4 小結(jié)
第6章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Diverse Functions of VDUP1 in Cell Proliferation,Differentiation,and Diseases[J]. Sang Yong Kim,Hyun-Woo Suh,Jin Woong Chung,Suk-Ran Yoon,Inpyo Choi.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(05)



本文編號(hào)：3199736