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自噬協(xié)同泛素化降解機(jī)制下調(diào)E2A/Pbx1融合蛋白抑制B急淋白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)

發(fā)布時(shí)間:2021-05-21 06:01
  目的:探討細(xì)胞自噬對(duì)于B急性淋巴細(xì)胞白血。˙ acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,并探討其作用機(jī)制。方法:(1)收集B-ALL病人骨髓樣本及正常骨髓樣本,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,FCM)分析檢測(cè)B-ALL病人骨髓細(xì)胞中CD34+38-、CD117+、CD45+、CD19+以及CD10+細(xì)胞比例與正常骨髓細(xì)胞的異同,流式細(xì)胞分選CD34+38-以及CD19+細(xì)胞,熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,Q-RT-PCR)檢測(cè)自噬相關(guān)基因的表達(dá)水平。(2)通過(guò)尾靜脈注射B-ALL 697細(xì)胞,建立NOD-SCID小鼠急淋白血病模型,分為對(duì)照組,模型組,預(yù)防組和治療組。預(yù)先或注射697細(xì)胞后腹腔注射雷帕霉素(Rapamycin,Rap)激活小鼠體內(nèi)自噬水平,觀察不同處理組小鼠的生存曲線,檢測(cè)不同處理組小鼠的發(fā)病程度,包括血常規(guī),肝脾病理變化,骨髓表達(dá)外源性白血病抗原標(biāo)志,包括CD45、CD19和CD10。(3)流式細(xì)胞分析檢測(cè)不同處理組NOD-SCID小鼠骨髓細(xì)胞周期以及LSK造血干祖細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    一、材料
    二、方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    一、B急淋白血病病人骨髓細(xì)胞自噬水平下降
    二、雷帕霉素激活自噬能夠在一定程度上抑制B-ALL小鼠的發(fā)病程度,延長(zhǎng)其存活時(shí)間
    三、雷帕霉素激活自噬能夠引起B(yǎng)-ALL細(xì)胞周期的停滯,預(yù)先激活自噬能夠部分恢復(fù)造血干祖細(xì)胞的數(shù)目
    四、激活自噬導(dǎo)致融合蛋白E2A/PBX1 含量下降
    五、抑制自噬過(guò)程或者抑制泛素化蛋白降解途徑會(huì)引起融合蛋白E2A/PBX1 的積累
    六、雷帕霉素/饑餓處理B-ALL細(xì)胞系697后E2A/PBX1 與LC3 或泛素化蛋白出現(xiàn)共定位現(xiàn)象
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述:細(xì)胞自噬、泛素化在白血病發(fā)生發(fā)展中的作用
    參考文獻(xiàn)
碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄
中英文縮略詞匯表
致謝



本文編號(hào):3199181

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