胃癌是世界范圍內(nèi)第二大常見的癌癥,每年新增病例約90萬。盡管過去的幾十年中,胃癌的發(fā)病率和死亡率在全球大部分地區(qū)已顯著下降,但是晚期胃癌病情的控制仍十分困難。赫賽汀（Herceptin）是靶向人類表皮生長因子受體2（HER2）的治療性單克隆抗體,現(xiàn)為HER2陽性乳腺癌標準化治療的一線用藥。對于HER2陽性的晚期胃癌患者,赫賽汀與化療聯(lián)用亦有效。根據(jù)國際III期赫賽汀臨床試驗結(jié)果,胃癌患者的反應率、中位無進展生存期、中位總生存期均顯示臨床和統(tǒng)計學獲益。目前,赫賽汀已被批準用于HER2陽性晚期胃癌患者的臨床治療。然而,赫賽汀耐藥是乳腺癌和胃癌治療中普遍存在的問題。HER2陽性胃癌患者約占25%,而患者對赫賽汀的反應率僅為12.8%,遠低于在乳腺癌中的報道。已知的赫賽汀耐藥機制主要來自乳腺癌研究的發(fā)現(xiàn),包括PI3K信號通路過度活化、PTEN（磷酸酶和張力酶同源物）缺失、PI3K的催化亞基PIK3CA突變。然而,有關胃癌的赫賽汀原發(fā)性和獲得性耐藥機制鮮有報道。本研究中,我們通過對胃癌細胞進行梯度加壓誘導,建立了赫賽汀耐藥的胃癌細胞株NCI-N87-R和MKN-45-R。細胞增殖活性分析結(jié)果表明... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：博士

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中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 細胞系
        1.2 實驗動物
        1.3 實驗試劑
        1.4 主要實驗器材
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 耐藥細胞株的誘導
        2.3 細胞增殖活性分析
        2.4 Western blot
        2.5 免疫熒光染色
        2.6 半定量RT-PCR和實時定量RT-PCR
        2.7 劃痕修復實驗
        2.8 3D細胞培養(yǎng)
        2.9 細胞轉(zhuǎn)染
        2.10啟動子活性分析
        2.11失巢凋亡分析
        2.12流式細胞分析
        2.13細胞微球形成
        2.14軟瓊脂克隆形成
        2.15裸鼠移植瘤模型
        2.16免疫組織化學染色
        2.17 ELISA
        2.18重組腺病毒感染
        2.19細胞凋亡分析
        2.20統(tǒng)計學分析
實驗結(jié)果
    1. 獲得性赫賽汀耐藥細胞株的建立
    2. 赫賽汀長期處理誘導胃癌細胞發(fā)生EMT
    3. 赫賽汀耐藥的胃癌細胞具有高遷移、侵襲、致瘤和轉(zhuǎn)移潛能
    4. 赫賽汀耐藥的胃癌細胞獲得腫瘤干細胞樣表型
    5. 獲得性赫賽汀耐藥的胃癌細胞中生存信號發(fā)生偏轉(zhuǎn)
    6. 獲得性赫賽汀耐藥的胃癌細胞自分泌IL-6
    7. 獲得性赫賽汀耐藥的胃癌細胞中存在IL-6/Notch信號環(huán)路
討論
結(jié)論
全文創(chuàng)新點
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
個人簡歷
致 謝



本文編號：3193774