根據(jù)世界衛(wèi)生組織的《世界癌癥報(bào)告》,肺癌約占癌癥死亡總?cè)藬?shù)的20%。肺癌中80%為非小細(xì)胞肺癌,其中30%的原癌基因KRAS發(fā)生了突變。KRAS突變的非小細(xì)胞肺癌患者數(shù)量很多,但有效的臨床治療方法并不多,因此對(duì)KRAS突變的非小細(xì)胞肺癌的研究顯得尤為重要。真核生物中抗增殖蛋白含有兩個(gè)同源亞型抗增殖蛋白1（Prohibitin1,PHB1）和抗增殖蛋白2（Prohibitin2,PHB2）。近年來研究表明PHB2與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),所以PHB2在癌癥治療中的價(jià)值值得進(jìn)一步深入研究。七鰓鰻是研究脊椎動(dòng)物進(jìn)化和適應(yīng)性免疫的重要模式生物。與哺乳動(dòng)物PHB2的廣泛研究相反,七鰓鰻的PHB2的研究很少。本研究課題首先通過q PCR、Western blot和細(xì)胞免疫熒光三種方法探究PHBs在非小細(xì)胞肺癌NCI-H1650細(xì)胞、A549細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞和NCI-H226細(xì)胞的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)PHBs在肺腺癌NCI-H1650細(xì)胞,A549細(xì)胞和Calu-1細(xì)胞中高表達(dá)。在本課題組前期工作基礎(chǔ)之上,將純化的r Lm-PHB2（Recombinant lamprey PHB2 protein... 

【文章來源】：遼寧師范大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 Prohibitins研究進(jìn)展
        1.1.1 PHBs的結(jié)構(gòu)
        1.1.2 PHBs的表達(dá)及功能
        1.1.3 PHBs在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用
    1.2 非小細(xì)胞研究進(jìn)展
        1.2.1 非小細(xì)胞肺癌研究進(jìn)展
        1.2.2 KRAS突變的非小細(xì)胞肺癌
        1.2.3 KRAS非小細(xì)胞肺癌的研究意義
    1.3 七鰓鰻PHB2的研究?jī)r(jià)值
        1.3.1 七鰓鰻的概況
        1.3.2 七鰓鰻的研究進(jìn)展
        1.3.3 七鰓鰻的研究?jī)r(jià)值
    1.4 本論文的研究目的和意義
第二章 PHBs在人肺細(xì)胞與人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中的表達(dá)與定位
    2.1 phbs基因在人肺細(xì)胞與人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中m RNA的表達(dá)
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.2 PHBs在人肺細(xì)胞與人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中蛋白的表達(dá)
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑及設(shè)備
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.3 PHB2在人肺細(xì)胞與人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑及設(shè)備
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第三章 rLm-PHB2 蛋白對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖的影響
    3.1 rLm-PHB2 蛋白的原核表達(dá)和純化
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.2 rLm-PHB2 對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖的影響
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.3 rLm-PHB2 對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞周期的影響
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
第四章 真核過表達(dá)Lm-PHB2蛋白對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖的影響
    4.1 真核pEGFP-N1-Lm-PHB2 過表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.2 Lm-PHB2蛋白對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖的影響
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.3 Lm-PHB2蛋白對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞周期的影響
        4.3.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        4.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 討論
第五章 Lm-PHB2 下調(diào)Calu-1 細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)和磷酸化水平
    5.1 Lm-PHB2 蛋白下調(diào)Calu-1 細(xì)胞相關(guān)周期蛋白的m RNA表達(dá)
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.2 Lm-PHB2 下調(diào)Calu-1 細(xì)胞相關(guān)周期蛋白的表達(dá)和磷酸化水平
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.3 討論
第六章 Lm-PHB2對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移的影響
    6.1 Lm-PHB2對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移的影響
        6.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        6.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    6.2 Lm-PHB2對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        6.2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與設(shè)備
        6.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    6.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
附錄
    附錄 A pEGFP-N1 質(zhì)粒圖譜
    附錄 B七鰓鰻PHB2真核過表達(dá)載體質(zhì)粒圖譜、測(cè)序結(jié)果及序列比對(duì)
致謝



本文編號(hào)：3150575