沉默SCAMP1-TV2通過結(jié)合PUM2促進INSM1 mRNA降解抑制乳腺癌細胞的惡性生物學行為的機制研究
發(fā)布時間:2021-04-14 11:35
目的:乳腺癌是目前女性最常見的癌癥之一,也是影響女性生命的疾病之一。目前乳腺癌的發(fā)病機制尚不明確。在治療方面,分子靶向治療在乳腺癌的綜合治療中發(fā)揮重要作用,然而仍有部分乳腺癌患者,特別是三陰性乳腺癌患者的5年生存期未見明顯改善。探索乳腺癌發(fā)生發(fā)展的機制,對于乳腺癌治療策略的選擇十分重要。越來越多的研究表明,長鏈非編碼RNAs(long noncoding RNA,lncRNA)在包括乳腺癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤的進展中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。LncRNAs是一類長度超過200個核苷酸的非編碼RNA。研究表明,lnRNAs能夠調(diào)控多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展,發(fā)揮促癌基因或抑癌基因的作用。LncRNA SCAMP1-TV2(Homo sapiens secretory carrier membrance protein l transcript variant 2,genebank,NR110855)是SCAMP1基因的一個轉(zhuǎn)錄本,此轉(zhuǎn)錄本無法翻譯成蛋白質(zhì)。目前尚未見關于lncRNA SCAMP1-TV2在乳腺癌等癌癥中的相關報道。RNA結(jié)合蛋白(RNA binding ptotein...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
SCAMP1-TV2在乳腺癌組織和細胞中的表達,以及沉默SCAMP1-TV2對乳腺癌細胞生物學行為的影響
中國醫(yī)科大學博士學位論文16圖2.PUM2在乳腺癌組織和細胞中的表達,以及過表達PUM2對乳腺癌細胞生物學行為的影響(A)PUM2在癌旁、luminalA乳腺癌和三陰性乳腺癌中的表達。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),**P<0.01,與癌旁組織組相比。(B)PUM2在乳腺癌(luminalA)組織及癌旁組織中的表達水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),**P<0.01,與癌旁組織組相比。(C)乳腺癌(三陰性)組織及癌旁組織中PUM2的表達水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),
啾齲琒CAMP1-TV2與PUM2在MCF-7、MDA-MB-231細胞中產(chǎn)生富集。沉默SCAMP1-TV2后,PUM2與SCAMP1-TV2的富集度顯著降低。隨后本研究進行了RNApull-down實驗進一步明確SCAMP1-TV2與PUM2的結(jié)合作用。如圖3C-D所示,在MCF-7、MDA-MB-231細胞系中,應用PUM2抗體進行檢測,只在野生型SCAMP1-TV2正義鏈RNA探針Pull-Down樣本中檢測到PUM2的存在,而在突變型SCAMP1-TV2正義鏈RNA探針、SCAMP1-TV2反義鏈RNA探針Pull-Down樣本中均未檢測到PUM2的存在。上述結(jié)果表明SCAMP1-TV2能夠靶向結(jié)合PUM2,沉默SCAMP1-TV2降低了二者的結(jié)合作用。圖3.SCAMP1-TV2與PUM2存在特異性結(jié)合序列(A)PUM2與SCAMP1-TV2的結(jié)合序列。(B)用抗PUM2抗體對MCF-7和MDA-MB-231細胞裂解液進行RNA免疫沉淀,qRT-PCR檢測SCAMP1-TV2表達水平。數(shù)據(jù)顯示為平均值
【參考文獻】:
期刊論文
[1]乳腺腫瘤微環(huán)境靶向治療的研究進展[J]. 楊云松,江一舟,胡欣,邵志敏. 中國癌癥雜志. 2019(12)
[2]長鏈非編碼RNA與腫瘤關系研究進展[J]. 高熒苒,王大勇,李濤,姬新穎. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2016(03)
本文編號:3137245
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
SCAMP1-TV2在乳腺癌組織和細胞中的表達,以及沉默SCAMP1-TV2對乳腺癌細胞生物學行為的影響
中國醫(yī)科大學博士學位論文16圖2.PUM2在乳腺癌組織和細胞中的表達,以及過表達PUM2對乳腺癌細胞生物學行為的影響(A)PUM2在癌旁、luminalA乳腺癌和三陰性乳腺癌中的表達。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),**P<0.01,與癌旁組織組相比。(B)PUM2在乳腺癌(luminalA)組織及癌旁組織中的表達水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),**P<0.01,與癌旁組織組相比。(C)乳腺癌(三陰性)組織及癌旁組織中PUM2的表達水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差(n=20),
啾齲琒CAMP1-TV2與PUM2在MCF-7、MDA-MB-231細胞中產(chǎn)生富集。沉默SCAMP1-TV2后,PUM2與SCAMP1-TV2的富集度顯著降低。隨后本研究進行了RNApull-down實驗進一步明確SCAMP1-TV2與PUM2的結(jié)合作用。如圖3C-D所示,在MCF-7、MDA-MB-231細胞系中,應用PUM2抗體進行檢測,只在野生型SCAMP1-TV2正義鏈RNA探針Pull-Down樣本中檢測到PUM2的存在,而在突變型SCAMP1-TV2正義鏈RNA探針、SCAMP1-TV2反義鏈RNA探針Pull-Down樣本中均未檢測到PUM2的存在。上述結(jié)果表明SCAMP1-TV2能夠靶向結(jié)合PUM2,沉默SCAMP1-TV2降低了二者的結(jié)合作用。圖3.SCAMP1-TV2與PUM2存在特異性結(jié)合序列(A)PUM2與SCAMP1-TV2的結(jié)合序列。(B)用抗PUM2抗體對MCF-7和MDA-MB-231細胞裂解液進行RNA免疫沉淀,qRT-PCR檢測SCAMP1-TV2表達水平。數(shù)據(jù)顯示為平均值
【參考文獻】:
期刊論文
[1]乳腺腫瘤微環(huán)境靶向治療的研究進展[J]. 楊云松,江一舟,胡欣,邵志敏. 中國癌癥雜志. 2019(12)
[2]長鏈非編碼RNA與腫瘤關系研究進展[J]. 高熒苒,王大勇,李濤,姬新穎. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2016(03)
本文編號:3137245
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