p65/miR-23a-27a-24調(diào)控急性髓性白血病分化的研究
發(fā)布時(shí)間：2021-04-14 03:50
研究目的:本課題旨在探索p65/mi R-23a-27a-24對(duì)急性髓性白血病的調(diào)控及其在急性髓性白血病發(fā)生發(fā)展中的作用,為急性髓性白血病的治療提供新的理論基礎(chǔ)和潛在的治療靶點(diǎn)。研究方法:分別用Western blot和Realtime PCR技術(shù)檢測(cè)急性髓性白血病細(xì)胞、白血病病人外周血單核細(xì)胞p65及mi R-23a-27a-24的表達(dá)水平。以抗白血病藥物誘導(dǎo)急性髓性白血病細(xì)胞分化后,檢測(cè)p65及mi R-23a-27a-24的水平變化。抑制p65或mi R-23a-27a-24水平后觀察急性髓性白血病細(xì)胞的分化水平。構(gòu)建白血病小鼠動(dòng)物模型,研究p65及mi R-23a-27a-24對(duì)白血病小鼠生存期或者腫瘤擴(kuò)散的影響。應(yīng)用生物信息學(xué)軟件結(jié)合分子手段探索p65對(duì)mi R-23a-27a-24的調(diào)節(jié)作用,并在細(xì)胞和動(dòng)物水平驗(yàn)證p65/mi R-23a-27a-24調(diào)控軸作用。研究結(jié)果:本課題發(fā)現(xiàn)p65在急性髓性白血病細(xì)胞分化后表達(dá)水平降低,抑制p65水平可以促進(jìn)白血病細(xì)胞分化成熟,并且檢測(cè)到臨床急性髓性白血病細(xì)胞（AML）和急性早幼粒細(xì)胞（APL）患者外周血單核細(xì)胞p65水平較高。通過(guò)...
【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
全反式維甲酸誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化，p65及p-p65表達(dá)水平檢測(cè)Figure3NB-4cellsweretreatedwithATRAandthenp65andp-p65weredetected
圖 4 p65 抑制劑處理 NB4細(xì)胞 3d 后，流式檢測(cè) CD11b+細(xì)胞表達(dá)水平ure 4 NB-4 cells were treated with p65 inhibitor for 3d and then the CD11b+ ccounted by flow cytometry測(cè)p65抑制劑對(duì) NB4 細(xì)胞分化效率的影響，左圖：對(duì)照組 CD11b 陽(yáng)性率為化細(xì)胞的陽(yáng)性率；右圖： p65 抑制劑處理組 CD11b陽(yáng)性率為 14.9%±1.0陽(yáng)性率，發(fā)現(xiàn) p65 抑制劑處理后可以提高NB4 細(xì)胞的分化率。p65 在急性髓性白血病細(xì)胞中（APL）分化后表達(dá)水平下降了進(jìn)一步驗(yàn)證 p65 對(duì)白血病細(xì)胞分化的廣泛作用，我們選取另一病細(xì)胞系 Kasumi-1 作為研究對(duì)象，利用達(dá)莎替尼（dasatinib）（1Kasumi-1 細(xì)胞分化，5d 后，流式結(jié)果顯示 CD11b 的表達(dá)水平從升到給藥后的 24%（圖 5A），細(xì)胞分化效率得到較大的提高。同果顯示 p65 及 p-p65 表達(dá)水平均降低（圖 5B）。以上結(jié)果證實(shí) d髓性白血病細(xì)胞 Kasumi-1 分化后，p65 及 p-p65 的表達(dá)水平下降
圖 5 Dasatinib 誘導(dǎo) Kasumi-1 細(xì)胞分化，p65 及 p-p65 表達(dá)水平檢測(cè)Figure 5 Kasumi-1 cells were treated with dasatinib and then p65 and p-p65 were detected（A）流式檢測(cè) Dasatinib 對(duì) Kasumi-1 細(xì)胞分化效率的影響，左圖為對(duì)照組分化細(xì)胞陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)，右圖為 Dasatinib 處理組分化細(xì)胞陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)；（B）Western blot 檢測(cè)Dasatinib 誘導(dǎo)Kasumi-1 細(xì)胞分化前后p65 和 p-p65 的表達(dá)水平，Vinculin 是蛋白內(nèi)參。3.1.4 抑制 p65 活性促進(jìn) Kasumi-1 細(xì)胞分化以上結(jié)果顯示急性髓性白血病細(xì)胞分化也伴隨著 p65 以及 p-p65 水平的下調(diào)，為進(jìn)一步確定 p65 與急性髓性白血病細(xì)胞分化的關(guān)系，我們?cè)诩毙运栊园籽〖?xì)胞系 Kasumi-1 培養(yǎng)基中加入 p65 的抑制劑 PN（5μmol/ml），培養(yǎng) 3 天后，流式結(jié)果顯示CD11b的表達(dá)水平從PN處理前的10.8%上升到處理后的24.5%（圖6），以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 p65 活性的下降亦能夠促進(jìn)急性髓性白血病細(xì)胞分化。
本文編號(hào)：3136600
【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
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【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
全反式維甲酸誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化，p65及p-p65表達(dá)水平檢測(cè)Figure3NB-4cellsweretreatedwithATRAandthenp65andp-p65weredetected
圖 4 p65 抑制劑處理 NB4細(xì)胞 3d 后，流式檢測(cè) CD11b+細(xì)胞表達(dá)水平ure 4 NB-4 cells were treated with p65 inhibitor for 3d and then the CD11b+ ccounted by flow cytometry測(cè)p65抑制劑對(duì) NB4 細(xì)胞分化效率的影響，左圖：對(duì)照組 CD11b 陽(yáng)性率為化細(xì)胞的陽(yáng)性率；右圖： p65 抑制劑處理組 CD11b陽(yáng)性率為 14.9%±1.0陽(yáng)性率，發(fā)現(xiàn) p65 抑制劑處理后可以提高NB4 細(xì)胞的分化率。p65 在急性髓性白血病細(xì)胞中（APL）分化后表達(dá)水平下降了進(jìn)一步驗(yàn)證 p65 對(duì)白血病細(xì)胞分化的廣泛作用，我們選取另一病細(xì)胞系 Kasumi-1 作為研究對(duì)象，利用達(dá)莎替尼（dasatinib）（1Kasumi-1 細(xì)胞分化，5d 后，流式結(jié)果顯示 CD11b 的表達(dá)水平從升到給藥后的 24%（圖 5A），細(xì)胞分化效率得到較大的提高。同果顯示 p65 及 p-p65 表達(dá)水平均降低（圖 5B）。以上結(jié)果證實(shí) d髓性白血病細(xì)胞 Kasumi-1 分化后，p65 及 p-p65 的表達(dá)水平下降
圖 5 Dasatinib 誘導(dǎo) Kasumi-1 細(xì)胞分化，p65 及 p-p65 表達(dá)水平檢測(cè)Figure 5 Kasumi-1 cells were treated with dasatinib and then p65 and p-p65 were detected（A）流式檢測(cè) Dasatinib 對(duì) Kasumi-1 細(xì)胞分化效率的影響，左圖為對(duì)照組分化細(xì)胞陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)，右圖為 Dasatinib 處理組分化細(xì)胞陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)；（B）Western blot 檢測(cè)Dasatinib 誘導(dǎo)Kasumi-1 細(xì)胞分化前后p65 和 p-p65 的表達(dá)水平，Vinculin 是蛋白內(nèi)參。3.1.4 抑制 p65 活性促進(jìn) Kasumi-1 細(xì)胞分化以上結(jié)果顯示急性髓性白血病細(xì)胞分化也伴隨著 p65 以及 p-p65 水平的下調(diào)，為進(jìn)一步確定 p65 與急性髓性白血病細(xì)胞分化的關(guān)系，我們?cè)诩毙运栊园籽〖?xì)胞系 Kasumi-1 培養(yǎng)基中加入 p65 的抑制劑 PN（5μmol/ml），培養(yǎng) 3 天后，流式結(jié)果顯示CD11b的表達(dá)水平從PN處理前的10.8%上升到處理后的24.5%（圖6），以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明 p65 活性的下降亦能夠促進(jìn)急性髓性白血病細(xì)胞分化。
本文編號(hào)：3136600
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