研究背景與目的化療是目前臨床上治療腫瘤最常用的方法之一[1],然而大部分的腫瘤患者在經過化療后仍會出現(xiàn)復發(fā)和轉移[2],這也是臨床上腫瘤患者死亡的主要原因[3][4]。近年來關于化療藥物與腫瘤細胞生物學特性的相關性研究發(fā)現(xiàn),化療藥物順鉑作用于結腸癌等腫瘤細胞后,能夠誘導腫瘤細胞發(fā)生上皮-間質轉化（epithelial-mesenchymaltransition,EMT）,促進腫瘤的遷移和侵襲[5]。前期研究結果表明化療藥物表柔比星可通過激活PI3K/AKT信號通路,誘發(fā)EMT,促進胃癌細胞的遷移與侵襲。但是,化療藥物順鉑能否通過PI3K/AKT信號通路促進胃癌細胞的遷移與侵襲尚不清楚,因此,本研究使用化療藥物順鉑處理胃癌細胞,探究順鉑對胃癌遷移與侵襲的影響及其可能的發(fā)生機制。材料與方法1.MTT法檢測順鉑對胃癌細胞毒性作用取對數(shù)生長期的胃癌細胞BGC 823,以1 × 105個/ml細胞鋪入96孔板中,待細胞單層鋪壁率達到50%左右的時候,用0μg/ml、0.5 μg/ml、1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml的順鉑處理胃癌細胞36h,檢測化療藥物順鉑對胃癌細胞的毒性作用。2.... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１不同濃度的順拍作用胃癌細胞３６?ｈ．細胞死亡率的變化??

?實驗結果???癌細胞ＢＧＣ?８２３可能發(fā)生發(fā)生了上皮－間質化轉變。??對照組?順鉑組??＿?＿??ａｎｔｎ?ｍｍ??３６ｈ；ｉ??圖２對照組、順柏組加藥３６?ｈ后胃癌細胞ＢＧＣ?８２３的形態(tài)學變化??３．２．２順鉑對胃癌細胞上皮間質化轉變相關蛋白水平表達的影響??Ｗｅｒｓｔｅｎｂｌｏｔ結果顯示：順鉑處理胃癌細胞ＢＧＣ８２３?０?ｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、３６?ｈ??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相對表達含量是?１±０．０４、０．９±０．０３２、０．７６±０．０１、０．５５±０．０１３，??Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相對表達含量是?０．２６土０．０１、０．３７±０．０１２、０．４１±０．０１３、０．４２??土０．０１９，與Ｏｈ相比，ｌｐｇ／ｍｌ順銷作用與胃癌細胞ＢＧＣ８２３?１２?ｈ、２４ｈ、３６ｈ??時，上皮細胞表型標記物Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表達水平降低（Ｐ＜ＣＫ０５），而間質細??胞表型標記物Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表達水平升高（結果重復三次，且Ｐ＜０．０５），??其差異具有統(tǒng)計學意義見圖（３、４）。這一結果進一步確認了，順鉑誘導胃癌??細胞發(fā)生上皮－間質化轉變。??１８??

?實驗結果???Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??Ｅ－ｃａｃｔｈｅｒｉｎ??一?????Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??圖３?ｌｊｘｇ／ｍｌ順鉑作用后胃癌細胞不同日桐點上皮間質化轉變??標志蛋白Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｌｎ蛋白表達水平的變化??？？??嫌?１名１?？＊?＿?ＯＳ，?Ｍ??鈞?Ｉ?Ｉ?ａｗ?《?—＂，＾—ｍ?）?Ｊ＿?ａ?〇ｈ??ｔ?｜?ａｍ?＊〇４－?ｉ?＿?凾?ａ，２ｈ??ｔｕ－?，４?１?＿２相?？?Ｈ?■?■?＿２４ｈ??ｈ?ｈ?Ｍ?■■??ｖ?ｏ．ｏ－Ｌ－Ｍ——ＵＪ————Ｗ—?ｖ?ｏｏ－Ｌ－ＬＪ——ＵＪ——＾—＾―??Ｗ?Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ?２?Ｏｔｉ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??圖４?ｌｐｇ／ｍｌ順鉑作用后胃癌細胞不同時間點上皮間質化轉變標志蛋白??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表達水平的變化??以上細胞形態(tài)學觀察和Ｗｅｒｓｔｅｎ?ｂｌｏｔ的結果表明，順鉑可誘導胃癌細胞發(fā)生??上皮－間質化轉變。??３．３順鉑能促進胃癌細胞遷移和侵襲??３．３．１順鉑對胃癌細胞遷移能力的影響??劃痕結果顯示：對照組胃癌細胞ＢＧＣ?８２３在劃痕后３６?ｈ的劃痕愈合度是??０．３３１±０．００３?（結果重復三次，且／＞＜０．０５），１略／ｍｌ順鉑組在劃痕３６ｈ后的劃痕??愈合度是〇．６１２±０．０２８８７?（結果重復三次，且Ｐ＜０．０５），與對照組相比，順鉑組??１９??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Microfluidic three-dimensional biomimetic tumor model for studying breast cancer cell migration and invasion in the presence of interstitial flow[J]. Chao Song,Dan Gao,Tianying Yuan,Yongli Chen,Liping Liu,Xiaowu Chen,Yuyang Jiang.  Chinese Chemical Letters. 2019(05)
[2]循環(huán)腫瘤細胞上皮間質轉化的研究進展[J]. 真德智,周世杰,劉志東,李云松.  醫(yī)學綜述. 2016(04)
[3]Targeting the PI3K/Akt signaling pathway in gastric carcinoma: A reality for personalized medicine?[J]. Shikha Satendra Singh,Wei Ney Yap,Frank Arfuso,Shreya Kar,Chao Wang,Wanpei Cai,Arunasalam M Dharmarajan,Gautam Sethi,Alan Prem Kumar.  World Journal of Gastroenterology. 2015(43)
[4]VEGF與消化系腫瘤關系的研究新進展[J]. 張蕓,趙晶,杜雅菊.  世界華人消化雜志. 2011(26)
[5]胰腺癌患者外周血VEGF和endostatin表達及意義[J]. 閆長青,劉三光,戚誠,張建生,王文斌.  中國腫瘤臨床與康復. 2011(04)
[6]Recent advances in chemotherapy for advanced gastric cancer[J]. Jong Gwang Kim,Ho Young Chung,Wansik Yu.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2010(07)
[7]細胞外基質降解相關因子與宮頸癌[J]. 王永欣,周家德.  安徽醫(yī)藥. 2010(06)
[8]選擇性阻斷異常Wnt信號通路對肝癌細胞生長及侵襲的影響[J]. 江穎,周信達,劉銀坤,黃曉武,孫瑞霞,張春暉,陸維祺,朱雋,羅文杰,張華.  復旦學報(醫(yī)學版). 2010(02)
[9]VEGF與MMP-2在胃腺癌組織中的表達及其與腫瘤侵襲轉移的相關性研究[J]. 劉琳,熊永炎,田素芳.  腫瘤防治研究. 2004(01)
[10]Imbalance between expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in invasiveness and metastasis of human gastric carcinoma[J]. Sheng Zhang Hua Lin Department of Pathology,The First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou 350005,Fujian Province,China Li Li Jian-Yin Lin Department of Molecular Medicine,Fujian Medical University,Fuzhou,350004,Fujian Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2003(05)



本文編號：3127867