發(fā)布時間：2021-04-08 07:59

　　健康問題是人類長期關(guān)注的重點(diǎn),在正常生理活動以及多種疾病中蛋白酶的調(diào)控必不可少。例如,許多蛋白酶在癌癥發(fā)展中與腫瘤細(xì)胞生長,血管生成,侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。鑒定蛋白酶的動態(tài)變化可以使我們進(jìn)行癌癥早期檢測,術(shù)中導(dǎo)航以及評估抗癌療法的功效,因此蛋白酶的分析在癌癥臨床診斷和治療中具有重要作用。目前各種靶向蛋白酶的化學(xué)熒光探針蓬勃發(fā)展,但仍存在一些蛋白酶探針的熒光波長短,特異性不強(qiáng),以及有機(jī)小分子熒光團(tuán)容易被代謝失去信號等缺點(diǎn)。在此我們選擇了三種癌癥相關(guān)的蛋白酶作為研究對象,針對以上三個問題進(jìn)行了相應(yīng)探針設(shè)計及合成,并在其成像應(yīng)用方面進(jìn)行了研究。本論文工作主要內(nèi)容包括以下三個方面:（1）設(shè)計合成了一種靶向成纖維細(xì)胞激活蛋白（Fibroblast activation protein,FAP）的小分子近紅外熒光探針。將該探針成功用于熒光檢測FAP表達(dá)的癌細(xì)胞,檢測限達(dá)到1500個細(xì)胞/mL。細(xì)胞孵育該探針5μM,30 min具有良好的共聚焦成像效果。成功的應(yīng)用于小鼠乳腺癌腫瘤模型熒光成像,并可區(qū)分腫瘤和正常組織,具有腫瘤特異性成像功能。（2）舍棄酶切型二肽基肽酶Ⅳ（Dipeptidyl pepti... 

【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院寧波材料技術(shù)與工程研究所)浙江省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

探針設(shè)計原則[14]

連接集團(tuán)還可用于改變分子的總電荷或?qū)ⅰＬ结樤O(shè)計探針設(shè)計通常是利用某些蛋白質(zhì)，如癌細(xì)胞中上多天然存在對癌癥靶標(biāo)具有高度的內(nèi)在親和力分情況下，親和基團(tuán)可能只需要簡單附著合適，就可完成探針的設(shè)計。上調(diào)的細(xì)胞表面受體—葉酸受體 α（FR-α）在肺癌、腎癌和結(jié)腸癌）中已成為定向診斷、成像體設(shè)計的契合性熒光探針有很多，圖 1-2 所示是接 IR783 染料靶向細(xì)胞表面的葉酸受體的親和

圖 1-3 環(huán)氧合酶抑制劑及利用其標(biāo)記型探針[14]。tructure of Indomethacin and the corresponding labeled probe Fluoro物的探針設(shè)計的探針（Substrate-basedprobes,SBPs）是監(jiān)測蛋白酶活性BP 通常有兩個部分組成：（1）能夠被目標(biāo)蛋白酶切割的肽割時產(chǎn)生可見信號的熒光團(tuán)[22]。與天然底物相比，合成底他生物化學(xué)分析，因為它們對靶蛋白酶的選擇性更強(qiáng)[23]。點(diǎn)對探針的內(nèi)在選擇性至關(guān)重要。例如，對組織蛋白酶 B被用于檢測活體癌細(xì)胞中的組織蛋白酶 B 活性[24]。目前能量轉(zhuǎn)移（FRET），淬滅劑和熒光團(tuán)位于識別位點(diǎn)的相對低的背景熒光。這些熒光團(tuán)與淬滅劑通過能被蛋白酶選擇靶蛋白酶切割肽鏈后釋放游離的熒光團(tuán)，發(fā)出熒光信號，


本文編號：3125178