目的:分離純化人原代胃癌細胞,探究皖南蝮蛇毒抑瘤組分-I（Agkis-trodon halys venom anti-tumor component-I,AHVAC-Ⅰ）對人原代胃癌細胞增殖的作用并深入研究其相關作用機制。方法:胰酶消化法和差速貼壁法分離和純化出的原代胃癌細胞為體外研究對象,以不同濃度的AHVAC-Ⅰ處理人原代胃癌細胞24h后,采用細胞增殖和毒性檢測法（Cell Counting Kit-8,CCK-8法）檢測人胃癌原代細胞的增殖抑制率,得出AHVAC-Ⅰ的對人胃癌原代細胞的半數(shù)抑制濃度(IC₅₀)。根據(jù)IC₅₀結果設置4組AHVAC-Ⅰ（0、4、8、16μg/ml）實驗濃度組,用不同濃度的AHVAC-Ⅰ分別處理人胃癌原代細胞24h后,采用蘇木素-伊紅染色法（Hematoxylin-Eosin staining,HE）、流式細胞術及免疫組化法（Immunohistochemistry,IHC）檢測AHVAC-Ⅰ誘導人胃癌原代細胞發(fā)生凋亡的效應;運用ELISA法評估AHVAC-Ⅰ作用細胞后氧化應激水平,蛋白印跡法檢測Bax、Cy... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人胃癌原代細胞的分離培養(yǎng)（×200）

皖南醫(yī)學院碩士學位論文14圖2.人胃癌原代細胞的免疫細胞化學鑒定CEA和AE1/AE3蛋白表達（×200）A.AE1/AE3蛋白在細胞陽性表達B.CEA蛋白在細胞陽性表達BA

皖南醫(yī)學院碩士學位論文29與2μg/mlAHVAC-Ⅰ相比較**P＜0.01圖3.AHVAC-Ⅰ對人原代胃癌細胞的增殖抑制率（%）2HE染色法觀察AHVAC-Ⅰ對人原代胃癌細胞的形態(tài)學變化如下圖所示，不同濃度的AHVAC-Ⅰ（4、8、16μg/ml）處理人原代胃癌細胞24h。HE染色鏡下觀察，正常對照組細胞貼壁緊密，細胞間隙窄，核分裂像較多，細胞呈不規(guī)則多邊形和梭形。與正常對照組相比較，隨AHVAC-Ⅰ濃度的增加，細胞間隙逐漸增寬，細胞貼壁不牢，易脫落，核固縮明顯，細胞逐漸回縮變圓，可見凋亡細胞。A.正常對照組B.4μg/mlC.8μg/mlD.16μg/mlE.陽性對照組圖4.HE染色法觀察AHVAC-Ⅰ對人原代胃癌細胞形態(tài)變化（×200）********ABCDE

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]MTT法檢測腦膠質瘤原代細胞對不同濃度多柔比星的體外藥物敏感性研究[D]. 覃超.桂林醫(yī)學院 2017
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本文編號：3115669