目的探究胃動蛋白2（Gastrokine 2,GKN2）對人胃癌細(xì)胞SGC7901遷移和侵襲的影響,并探討GKN2對人胃癌SGC7901細(xì)胞JAK2/STAT3通路的調(diào)控作用,為闡明抗胃癌機(jī)理提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。方法1、將構(gòu)建好的GKN2真核載體質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染人胃癌SGC7901細(xì)胞,在熒光倒置顯微鏡下觀察其轉(zhuǎn)染效率,Western Blot驗證GKN2轉(zhuǎn)染是否成功。2、運用MTT實驗、細(xì)胞劃痕試驗、Transwell遷移和Transwell侵襲實驗分析GKN2轉(zhuǎn)染對人胃癌細(xì)胞SGC7901遷移和侵襲的影響。3、采用Western blot方法觀察GKN2轉(zhuǎn)染后JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表達(dá)變化。4、采用ELISA檢測血清GKN2濃度,分析胃癌患者與正常血清GKN2濃度差異。結(jié)果1、轉(zhuǎn)染實驗結(jié)果顯示,未轉(zhuǎn)染組無熒光表達(dá),空載體組及GKN2轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染效率分別約為91%及90%。Western Blot實驗結(jié)果顯示,與未轉(zhuǎn)染組（0.2290±0.0007）和空載體組（0.2210±0.0008）相比,GKN2轉(zhuǎn)染組（1.6678±0.0008）GKN2蛋白的相對表達(dá)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

腺病毒轉(zhuǎn)染人胃癌SGC7901細(xì)胞系48h后的鏡下圖

圖 2 Western Blot 檢測三組人胃癌 SGC7901 細(xì)胞中 GKN2 蛋白表達(dá)A:未轉(zhuǎn)染組；B：空載體組；C：GKN2 轉(zhuǎn)染組*：vs 未轉(zhuǎn)染組與空載體組,P＜0.05；3.3 MTT 實驗驗證 GKN2 對人胃癌 SGC7901 增殖的影響MTT 結(jié)果如下(如表 1，圖 3、圖 4 所示)：由 OD 值的大小可知未轉(zhuǎn)染組及空載體組的 SGC7901 細(xì)胞在 24h、 48h 及 72h 均有擴(kuò)增，且擴(kuò)增速度較明顯，GKN2 轉(zhuǎn)染組的人胃癌 SGC7901 細(xì)胞在 24h、48h 及 72h 的 OD 值均較同時期未轉(zhuǎn)染組和空載體組偏小，其增殖均受到抑制 (P＜0.05)。說明 GKN2 可以抑制人胃癌 SGC7901 細(xì)胞的增殖。表 1 各處理因素處理 SGC7901 后的 OD490值(x±s，n =3)時間(h)未轉(zhuǎn)染組 空載體組GKN2 轉(zhuǎn)染組OD490值 抑制率（%）

圖 3 MTT 法繪制經(jīng)處理后各組細(xì)胞生長曲線A:未轉(zhuǎn)染組；B：空載體組；C：GKN2 轉(zhuǎn)染組*:vs 未轉(zhuǎn)染組及空載體組，P<0.05圖 4 GKN2 對 SGC7901 的生長抑制率（%）A:未轉(zhuǎn)染組；B：空載體組；C：GKN2 轉(zhuǎn)染組***

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胃癌干細(xì)胞的分離、鑒定及其特性[J]. 李陽,趙永福.  中國組織工程研究. 2015(32)
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[4]Epithelial-mesenchymal transition-activating transcription factors-multifunctional regulators in cancer[J]. Minal Garg.  World Journal of Stem Cells. 2013(04)
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碩士論文
[1]GKN2高表達(dá)對胃癌干細(xì)胞增殖、遷移侵襲和凋亡影響的研究[D]. 胡皓彬.南華大學(xué) 2017
[2]GKN2在胃癌中的表達(dá)及對MKN28細(xì)胞的抑制作用[D]. 劉姣.南華大學(xué) 2015
[3]DADS抑制CD44+人胃癌細(xì)胞AGS“干樣”特性的作用研究[D]. 段海瑞.南華大學(xué) 2012



本文編號：3108277