目的:胰腺癌作為惡性程度較高的腫瘤類型,預(yù)后很差,生存質(zhì)量堪憂。肥胖與胰腺癌關(guān)系密切,除引起全身慢性炎癥反應(yīng)等促癌作用外,腫瘤微環(huán)境中脂肪細(xì)胞與胰腺癌細(xì)胞對(duì)話發(fā)揮生物學(xué)功能引起動(dòng)態(tài)變化,對(duì)胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移過程亦有重要的影響,但具體機(jī)制不明。方法:通過收集臨床胰腺癌患者和健康人血清外泌體樣本,利用qPCR分析外泌體linc-ROR的差異表達(dá)水平。首先使用透射電子顯微鏡觀察超速離心法PBS洗滌后所提取的外泌體鏡下微觀形態(tài),粒徑濃度分析技術(shù)測算超速離心法提取的外泌體的直徑和濃度范圍,免疫印跡法檢測外泌體表面蛋白標(biāo)記物;RNase A和Triton X-100檢測外泌體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。構(gòu)建linc-ROR慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞作為后續(xù)共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系,將人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞（正常胰腺細(xì)胞）所分泌的外泌體linc-ROR作為對(duì)照,在高表達(dá)外泌體linc-ROR的胰腺癌細(xì)胞PANC-1中下調(diào)linc-ROR表達(dá)水平,在低表達(dá)外泌體linc-ROR的胰腺癌細(xì)胞系BxPC-3中上調(diào)linc-ROR表達(dá)水平。采用Transwell培養(yǎng)小室分別將各組胰腺癌細(xì)胞與脂肪細(xì)胞3T3-L1共培養(yǎng),通過熒光... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【圖文】：

超速離心法提取外泌體的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性

共培養(yǎng)體系下的脂肪細(xì)胞變化

共培養(yǎng)促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞增殖能力


本文編號(hào)：3081417