目的:胰腺癌作為惡性程度較高的腫瘤類型,預后很差,生存質量堪憂。肥胖與胰腺癌關系密切,除引起全身慢性炎癥反應等促癌作用外,腫瘤微環(huán)境中脂肪細胞與胰腺癌細胞對話發(fā)揮生物學功能引起動態(tài)變化,對胰腺癌侵襲和轉移過程亦有重要的影響,但具體機制不明。方法:通過收集臨床胰腺癌患者和健康人血清外泌體樣本,利用qPCR分析外泌體linc-ROR的差異表達水平。首先使用透射電子顯微鏡觀察超速離心法PBS洗滌后所提取的外泌體鏡下微觀形態(tài),粒徑濃度分析技術測算超速離心法提取的外泌體的直徑和濃度范圍,免疫印跡法檢測外泌體表面蛋白標記物;RNase A和Triton X-100檢測外泌體結構的穩(wěn)定性。構建linc-ROR慢病毒質粒轉染胰腺癌細胞作為后續(xù)共培養(yǎng)實驗的穩(wěn)轉細胞系,將人胚胎胰腺組織來源細胞（正常胰腺細胞）所分泌的外泌體linc-ROR作為對照,在高表達外泌體linc-ROR的胰腺癌細胞PANC-1中下調linc-ROR表達水平,在低表達外泌體linc-ROR的胰腺癌細胞系BxPC-3中上調linc-ROR表達水平。采用Transwell培養(yǎng)小室分別將各組胰腺癌細胞與脂肪細胞3T3-L1共培養(yǎng),通過熒光... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【圖文】：

超速離心法提取外泌體的結構和穩(wěn)定性

共培養(yǎng)體系下的脂肪細胞變化

共培養(yǎng)促進胰腺癌細胞增殖能力


本文編號：3081417