目的肝細胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是常見的惡性腫瘤。本課題主要研究細胞質(zhì)FMR1相關(guān)蛋白1（CYFIP1）在肝細胞性肝癌（HCC）組織中的表達及與HCC發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。方法利用組織微陣列分析檢測80例原發(fā)性肝細胞性肝癌的腫瘤組織與癌旁正常肝組織中CYFIP1的表達水平,并分析其與HCC患者臨床特征以及生存期的相關(guān)性;運用Annexin V-FITC/PI雙染標記法檢測Hep G2細胞沉默CYFIP1后的凋亡水平;運用Western blot法檢測CYFIP1的蛋白表達變化。結(jié)果組織芯片染色結(jié)果提示肝癌組織中CYFIP1表達量降低（P=0.031）,且與HCC患者的腫瘤分化程度,腫瘤直徑及生存期存在相關(guān)性。采用sh RNA沉默CYFIP1后,Hep G2細胞的細胞增殖水平上升（P=0.019）,且細胞凋亡水平下降（P=0.022）。結(jié)論CYFIP1是HCC的抑癌基因,可能成為患者臨床預(yù)后的監(jiān)測指標。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CYFIP1組織芯片免疫組化表達情況100

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文243.2CYFIP1在肝癌組織中的表達與腫瘤組織分化、腫瘤直徑及患者生存期具有相關(guān)性上述的多因素分析臨床特征分析的結(jié)果提示，CYFIP1的表達與患者的腫瘤分級、腫瘤直徑（cm）兩項臨床指標呈負相關(guān)且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.012；P=0.014）；但是與性別、年齡、血清AFP、HBV-DNA、Child分級等指標的關(guān)聯(lián)不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05)，并提示CYFIP1可能是抑癌基因并且與腫瘤患者的生存存在負相關(guān)。因此，我們進行進一步的HCC患者術(shù)后生存分析。我們通過對納入的明確診斷為HCC的患者進行術(shù)后隨訪，并統(tǒng)計計算其術(shù)后生存狀態(tài)。術(shù)后生存分析的結(jié)果提示，CYFIP1低表達的HCC患者的術(shù)后生存期較短，與CYFIP1高表達患者相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.213，P=0.018）。見圖2。圖2CYFIP1在HCC患者的表達水平與患者總體生存率之間的關(guān)系

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文253.3沉默CYFIP1可促進HepG2細胞的增殖在人肝癌細胞系HepG2中采用shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方法，沉默HCC細胞系HepG2內(nèi)基因CYFIP1。shRNA轉(zhuǎn)染后，我們通過Westernblot驗證CYFIP1在HCCHepG2細胞系中的表達水平，結(jié)果提示shRNA沉默明顯的下調(diào)了細胞系中CYFIP1的表達。隨后在shRNA-CYFIP1轉(zhuǎn)染有效的基礎(chǔ)上，采用MTT方法，檢測shRNA-CYFIP1轉(zhuǎn)染對細胞增值水平的影響。進一步的MTT檢測結(jié)果提示，下調(diào)CYFIP1表達后，HepG2細胞增殖速度明顯提高，與對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.019）。見圖3。圖3沉默CYFIP1可促進HepG2細胞的增殖沉默CYFIP1可抑制HepG2細胞蛋白CYFIP1的表達，并且質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后的HepG2細胞，其增殖能力顯著提高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P=0.019；NC：Negativecontrol.


本文編號：3070557