研究背景奧沙利鉑（oxaliplatin,OXA）作為第三代鉑類化療藥物,對結直腸癌、胰腺癌、肺癌等多種實體腫瘤均有療效。但應用奧沙利鉑的患者85%～95%會出現(xiàn)相關的周圍神經病變,臨床表現(xiàn)主要為末梢感覺麻木、痛覺過敏或超敏、“套襪樣”感覺異常。冷刺激可加重其神經癥狀,并且具有明顯的劑量依賴性和時間依賴性,往往因嚴重的神經性病變造成奧沙利鉑治療的中斷,影響患者的治療效果,甚至縮短生存時間。因此,探究奧沙利鉑誘導的周圍神經病變的分子機制,對減輕或避免奧沙利鉑治療所產生的神經毒性作用具有重要的指導意義。有研究表明,奧沙利鉑對周圍神經的損傷比對中樞的損傷更為明顯,因此探索背根神經節(jié)離子通道改變及受損的分子機制,是揭示周圍神經損傷后興奮性改變的基礎。電壓門控鉀離子通道是參與神經元興奮性改變的重要離子通道之一,通過維持靜息膜電位和控制動作電位放電參與神經元興奮性的調節(jié)。在奧沙利鉑誘導的周圍神經損傷動物模型中,電壓門控鉀離子通道1.2（Kv1.2）的蛋白表達減少,引起神經元興奮性增加,然而對靶向kv1.2分子調控機制仍知之甚少。表觀遺傳學指基于非基因序列改變所致的基因表達水平的變化,可調控基因的表... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞簡表
前言
第一部分 建立奧沙利鉑化療痛模型并檢測Kv1.2的表達變化
    引言
    1.1 實驗動物與材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 動物麻醉
        1.1.3 實驗分組
        1.1.4 實驗儀器設備與試劑耗材
    1.2 實驗方法
        1.2.1 奧沙利鉑誘導化療痛模型的建立
        1.2.2 行為學檢測化療痛模型的建立
        1.2.3 Western-blot檢測kv1.2的蛋白表達
        1.2.4 RT-qPCR檢測鉀離子通道的mRNA表達
        1.2.5 免疫熒光檢測kv1.2在DRG神經元形態(tài)分布
    1.3 數(shù)據(jù)分析
    1.4 結果
        1.4.1 奧沙利鉑可以誘導大鼠產生痛行為學
        1.4.2 奧沙利鉑化療痛模型中不同亞型鉀離子通道m(xù)RNA表達水平變化
        1.4.3 Kv1.2與DRG不同類型神經元共標
        1.4.4 建模后不同時間點DRG神經元Kv1.2的陽性細胞
        1.4.5 大鼠奧沙利鉑誘導的化療痛模型中Kv1.2的蛋白和mRNA表達降低
    1.5 討論
    1.6 小結
第二部分 TET1的下調可能參與奧沙利鉑誘導的化療痛
    引言
    2.1 實驗動物與材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 動物麻醉
        2.1.3 實驗分組
        2.1.4 實驗儀器與設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 奧沙利鉑誘導化療痛模型的建立
        2.2.2 行為學檢測化療痛模型的建立
        2.2.3 DRG顯微注射敲除TET1-loxp轉基因小鼠DRG中TET1的基因
        2.2.4 Western-blot檢測TET1的蛋白表達
        2.2.5 qRT-PCR檢測TET1的mRNA表達
        2.2.6 免疫熒光檢測TET1在DRG神經元形態(tài)分布
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結果
        2.4.1 TET1與DRG不同類型神經元共標
        2.4.2 建模后不同時間點DRG神經元TET1的陽性細胞
        2.4.3 大鼠奧沙利鉑誘導的化療痛模型中TET1蛋白和mRNA的表達變化
        2.4.4 TET1-loxp轉基因鼠的疼痛行為學和基因表達變化
    2.5 討論
    2.6 小結
第三部分 TET1通過下調kv1.2緩解奧沙利鉑誘導的神經病理性疼痛
    引言
    3.1 實驗動物與材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 動物麻醉
        3.1.3 實驗分組
        3.1.4 實驗儀器與設備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 奧沙利鉑誘導的化療痛模型的建立
        3.2.2 行為學檢測化療痛模型的建立以及過表達TET1后對動物痛敏的影響
        3.2.3 DRG顯微注射TET1-Lv,過表達DRG神經元TET1基因
        3.2.4 Western-blot檢測kv1.2和TET1的蛋白表達
        3.2.5 qRT-PCR檢測kv1.2和TET1的mRNA表達
        3.2.6 免疫熒光檢測kv1.2和TET1在DRG神經元的共定位
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結果
        3.4.1 Kv1.2與TET1免疫熒光雙標
        3.4.2 大鼠先給予TET1-Lv,再建立奧沙利鉑化療痛模型,對大鼠行為學以及分子水平的影響
        3.4.3 大鼠先建立化療痛模型,再給予TET1-Lv,可以緩解奧沙利鉑誘導的行為學變化
        3.4.4 小鼠給予TET1-Lv,對行為以及基因表達的影響
    3.5 討論
    3.6 小結
全文總結
參考文獻
綜述 慢性神經病理性疼痛的表觀遺傳學機制
    參考文獻
個人簡歷
致謝



本文編號：3052199