發(fā)布時(shí)間：2021-02-25 04:42

　　[研究目的]套細(xì)胞淋巴瘤（Mantle cell lymphoma,MCL）為非霍奇金B(yǎng)細(xì)胞淋巴瘤,經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在大量病人中特異性存在t（11;14）（q13;q32）,并因此導(dǎo)致cyclinDl過(guò)度表達(dá)。套細(xì)胞淋巴瘤病發(fā)率偏低,僅為5%-10%,但其預(yù)后極差,容易復(fù)發(fā),是中位生存期最短的淋巴瘤亞型,大約為3-5年。G9a（Euchromatic histone-lysine N-methyltransferase 2,也稱(chēng)作EHMT2）是研究比較廣泛的組蛋白賴(lài)氨酸甲基化轉(zhuǎn)移酶,其在多種腫瘤中出現(xiàn)異常表達(dá)增高,并與腫瘤增殖、凋亡、侵襲等生物學(xué)功能有關(guān),但其在MCL中尚未有研究。本實(shí)驗(yàn)旨在研究G9a在MCL中表達(dá)情況及其在套細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。第一部分G9a在套細(xì)胞淋巴瘤中表達(dá)情況及甲基化芯片分析[方法]1.收集山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2006年至2017年之間套細(xì)胞淋巴瘤病例及淋巴結(jié)反應(yīng)性增生病例,分別收集到39例及20例病例,利用免疫組化方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中G9a蛋白的表達(dá)。2.在實(shí)驗(yàn)組中選取4例G9a高表達(dá)病例,4例淋巴結(jié)反應(yīng)性增生病例,使用Illumina甲基化芯片分析全... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
中英文縮寫(xiě)詞對(duì)照
前言
第一部分 G9a在套細(xì)胞淋巴瘤中表達(dá)及相關(guān)甲基化芯片分析
    材料與方法
        1 臨床標(biāo)本收集
        2 免疫組化
            2.1 免疫組化相關(guān)儀器
            2.2 免疫組化主要試劑
            2.3 免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟
        3 Infinium Hunan Methylation 850 BeadChip全基因組甲基化芯片
        4 相關(guān)芯片驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
            4.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            4.2 實(shí)驗(yàn)用品
            4.3 試劑配制
            4.4 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
                4.4.1 提取石蠟包埋組織標(biāo)本的DNA
                4.4.2 DNA濃度測(cè)定
                4.4.3 DNA亞硫酸氫鹽修飾
                4.4.4 BSP
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第二章 G9a特異性抑制劑BIX01294對(duì)MCL細(xì)胞系組蛋白甲基化情況及對(duì)腫瘤細(xì)胞相關(guān)功能影響
    材料與方法
        1 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.1 細(xì)胞株
            1.2 主要儀器
            1.3 主要試劑
            1.4 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
        2 Western Blot
            2.1 主要儀器
            2.2 主要試劑
            2.3 常用液體配制
            2.4 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        3 CCK8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
            3.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            3.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            3.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        4 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            4.1 主要儀器
            4.2 主要試劑
            4.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        5 細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)
            5.1 主要儀器
            5.2 主要試劑
            5.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        6 統(tǒng)計(jì)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第三章 尋找G9a相互作用蛋白及相關(guān)下游靶基因研究
    材料與方法
        1 免疫共沉淀
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        2 Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)染shRNA
            2.1 質(zhì)粒提取
                2.1.1 主要儀器
                2.1.2 主要試劑
                2.1.3 試劑配制
                2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
            2.2 Hela細(xì)胞培養(yǎng)
                2.2.1 主要儀器
                2.2.2 主要試劑
                2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
            2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
                2.3.1 轉(zhuǎn)染序列
                2.3.2 主要試劑
                2.3.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
            2.4 Wester blot
                2.4.1 主要儀器
                2.4.2 主要試劑
                2.4.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        3 慢病毒轉(zhuǎn)染Jeko-1細(xì)胞
            3.1 主要儀器
            3.2 主要試劑
            3.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        4 表達(dá)譜芯片
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論與展望
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表



本文編號(hào)：3050460