發(fā)布時間：2021-02-21 16:06

　　目的:研究非小細胞肺癌（Non-small-cellcarcinoma NSCLC）的進展中Fibulin-5的作用以及其可能的調(diào)控機制及相關(guān)信號通路。方法:1.利用Heatmap分析肺癌基因圖庫（The Cancer Genome Atlas TCGA）,并將肺癌RNA序列及DNA甲基化數(shù)據(jù)與正常肺組織比對,并分析肺癌中Fibulin-5及MMP-7（金屬蛋白酶-7）以及c-myc的表達趨勢。2.構(gòu)建Fibulin-5表達工具質(zhì)粒,利用轉(zhuǎn)染技術(shù)轉(zhuǎn)染入A549,H1299及H460細胞系中,利用集落形成試驗分析Fibulin-5的作用。3.構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Fibulin-5的A549及H1299細胞系,利用MTT生長曲線分析方法分析Fibulin-5的作用。4.利用WB方法分析A549及H1299非小細胞肺癌細胞系細胞核中Fibulin-5與β-catenin表達水平。5.SW480和H1752細胞系中,分別過表達或敲除Fibulin-5后采用間接免疫熒光的方法分析細胞系中Fibulin-5與β-catenin的表達。6.利用免疫組化分析對99例非小細胞肺癌（NSCLC）標本進行Fibul... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：121 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的
    研究內(nèi)容
一、人非小細胞肺癌組織中Fibulin-5的表達及作用
    1.1 對象與方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 NSCLC中Fibulin-5低水平表達主要由于基因啟動子過甲基化
        1.2.2 Fibulin-5抑制肺癌細胞的增殖
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、Fibulin-5通過調(diào)控MMP-7及c-myc表達來抑制肺癌轉(zhuǎn)移
    2.1 對象與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 肺癌組織中Fibulin-5的表達水平與MMP-7以及c-myc表達水平成反比
        2.2.2 Fibulin-5對NSCLC中MMP-7水平的調(diào)控作用
        2.2.3 Fibulin-5 對下游蛋白水平作用相關(guān)位點的研究
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、Fibulin-5通過WNT信號傳導(dǎo)通路影響β-catenin/TCF-4信號途徑來抑制肺癌侵襲
    3.1 對象與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Fibulin-5影響β-catenin的核內(nèi)表達量
        3.2.2 Fibulin-5通過調(diào)節(jié)β-catenin來影響TCF/LEF位點的活性
        3.2.3 Fibulin-5 通過β-catenin 對下游相關(guān)癌蛋白進行調(diào)節(jié)
        3.2.4 缺乏β-catenin 的非小細胞肺癌細胞的癌蛋白表達水平及侵襲能力明顯下降
        3.2.5 Fibulin-5對WNT/β-catenin通路有調(diào)節(jié)作用
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
四、Fibulin-5通過RGD序列與整合素相結(jié)合調(diào)控WNT/β-catenin信號傳導(dǎo)通路
    4.1 對象與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 Fibulin-5通過自身的RGD系列將調(diào)控信號傳遞至細胞內(nèi)
        4.2.2 Fibulin-5 通過RGD序列與細胞表面整合素相合對細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)進行調(diào)控
        4.2.3 Fibulin-5 通過激活細胞表面整合素下游ERK號傳導(dǎo)通路來影響WNT信號傳導(dǎo)通路相關(guān)表達
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
五、Fibulin-5在體內(nèi)抑制肺癌轉(zhuǎn)移能力
    5.1 對象與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 H460-Fibulin-5穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的轉(zhuǎn)移能力明顯低于野生株H460細胞系
        5.2.2 H1299-Fibulin-5穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的成瘤能力明低于野生株H1299細胞系
        5.2.3 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染β-catenin和GSK-3βsh RNA基因H460細胞株轉(zhuǎn)移能力與野生型H460細胞株存在顯著差異
        5.2.4 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GSK-3βsh RNA基因的H1752細胞轉(zhuǎn)移能力與野生型H1752細胞株存在顯著差異
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 Fibulin-5在腫瘤形成中的作用
    綜述參考文獻
致謝



本文編號：3044588