發(fā)布時間：2021-02-21 03:44

　　第一部分:共同抑制EGFR PI3K/Akt/mTOR STAT3和ERK信號,協(xié)同抗胰腺癌活性的研究目的目前關于葫蘆素B抗腫瘤作用的研究顯示,信號轉導和轉錄因子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）是其主要治療靶點,但葫蘆素B也能夠選擇性抑制其他信號通路。例如,在乳腺癌和肺癌細胞中,葫蘆素B能夠抑制人表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptor,EGFR and HER2）的表達和活性。研究發(fā)現(xiàn),表皮生長因子受體（Epidermal growth factor receptor,EGFR）在胰腺癌發(fā)展過程中起著關鍵作用,并且在30%–89%的胰腺癌患者中呈現(xiàn)高表達。因此,EGFR可能是胰腺癌的潛在治療靶點。但臨床應用中發(fā)現(xiàn),EGFR抑制劑不足以有效治療胰腺癌患者,這可能是由于EGFR下游信號通路的持續(xù)激活,或者負反饋的發(fā)生。因此,以阻斷EGFR及其下游信號傳導為目標可能是胰腺癌治療的策略。本部分主要研究葫蘆素B對EGFR活性以及下信號通路的影響,同時考察聯(lián)... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖3.24株PC細胞中CuB的IC50值

圖 3.4 葫蘆素 B 對細胞死亡的影響。ABxPC-3 細胞和 HPAC 細胞用不同濃度的 CuB 處理 24h 后，用臺盼藍染色計數(shù)法檢測細胞死亡的百分比。BBxPC-3 細胞和 HPAC 細胞用不同濃度的 CuB 處理 24 h 后,用 LDH 檢測試劑盒檢測 LDH 的釋放。C BxPC-3 細胞和 HPAC細胞用不同濃度的 CuB 處理 24 h 后，用 80％的冰乙醇固定、PI 染色后后流式細胞儀檢測sub-G1 細胞。D CuB 處理 BxPC-3 細胞和 HPAC 細胞 24 h 后，用 Western blot 檢測 PARP 和β-actin 的表達水平。以上進行 3 次獨立的實驗，并顯示了具代表性的 Western blots。3.5 葫蘆素 B 通過下調(diào) EGFR 表達抑制胰腺癌細胞增殖3.5.1 B EGFR根據(jù) 3.1 和 3.2 的結果，我們推測 CuB 抑制胰腺癌細胞的增殖可能與 EGFR表達降低相關。用不同濃度的 CuB 處理 BxPC-3 和 HPAC 24 h 細胞后，提取細胞 RNA 進行實時定量 PCR 的檢測。結果發(fā)現(xiàn)，在該 2 株 PC 細胞株中，CuB 以濃度依賴的方式抑制 EGFR 的表達 (圖 3.5.1)。

3.5.1 葫蘆素 B 抑制 EGFR 基因的表達。用不同濃度的 CuB 處理 BxPC-3 細胞 h 后，提取細胞的 RNA 并用實時定量 PCR 檢測 EGFR 的表達水平。圖中立實驗的平均值，組間比較使用單因素方差分析，***P < 0.001。GFR 基因參與了葫蘆素 B 抑制胰腺癌細胞增殖了提供更直接的證據(jù)證明 EGFR 基因的表達參與了 CuB 抑制 PC我們在 BxPC-3 和 HPAC 細胞中用慢病毒 shRNA 分別沉默了 EG其對 CuB 引起的細胞增殖的影響。實驗結果顯示，與對照組相比夠抑制細胞的增殖 (圖 3.5.2A)。與對照組細胞相比，不同濃度 C抑制 EGFR 敲除后 HPAC 細胞增殖，但只有低濃度的 CuB 才能顯 敲除后 BxPC-3 細胞增殖 (圖 3.5.2 B＆C)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]葫蘆素I（JSI-124）通過p53信號通路誘導HepG2細胞凋亡[J]. 吳思思,朱國念,倪銀蕓,張庭愷,蔣維.  細胞與分子免疫學雜志. 2017(01)
[2]Mechanisms of resistance to EGFR tyrosine kinase inhibitors[J]. Lihua Huang,Liwu Fu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)
[3]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(04)
[4]葫蘆素的生態(tài)功能及其應用前景[J]. 凌冰,張茂新,王玉贊.  生態(tài)學報. 2010(03)



本文編號：3043794