背景:EGFR基因敏感突變或ALK基因融合的非小細胞肺癌（NSCLC）患者在接受特異性酪氨酸激酶抑制劑（TKIs）治療后可獲得顯著療效。但患者接受靶向治療一段時間后,部分腫瘤細胞會對該類藥物產生繼發(fā)性突變從而形成耐藥。對此,我們從兩位肺癌患者惡性胸腔積液中分離出的新鮮腫瘤細胞對小鼠進行人源移植瘤模型（PDX）的建立以研究靶向藥物的耐藥機制。方法:對患者腫瘤組織標本和建成的PDX同時進行形態(tài)學比較和遺傳背景方面的檢測（全外顯子組基因測序,WES）�；诓煌幕蚍中团R床方面分別使用克唑替尼或奧斯替尼進行靶向治療,并對所建PDX施以不斷的誘導用藥致其產生耐藥。以PDX瘤體體積大小作為治療后的觀測指標,病理染色選用HE染色法。實驗結果:PDX與患者母體腫瘤在組織學特征和治療療效上具有相似性。全外顯子組基因測序表明PDX與患者母體腫瘤在遺傳背景上也具有相似性（EML4-ALK gene fusion in Patient/PDX CTC15035;EGFR L858R and T790M gene mutations in Patient/PDX CTC15063）。在誘導產生耐藥后,ALK ... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：92 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

實驗基本流程圖

受試者在化療失敗后腫瘤繼續(xù)增大并伴有惡性胸腔積液（見圖2B）。此時獲取惡性胸腔積液標本用于 PDX 建模并成功[62,63]。經檢測活檢腫瘤母體及 PDX 均表現 ALK 基因融合陽性，因此對受試者使用克唑替尼靶向治療，疾病控制時間長達 18 個月（見圖 2C）。通過對比在克唑替尼治療前受試者母體腫瘤（見圖 2D）與 CTC15035 PDX（見圖 2E）的組織學特征具有高度相似性。

例二一位 52 歲男性受試者（實驗編號 CTC15063）為 IV 期肺癌伴多發(fā)遠處轉移。該患者經手術完整切除腫瘤隨訪4年半后出現腫瘤復發(fā)伴右胸膜轉移（見圖3A）。手術標本檢測提示 EGFR 21 L858R 突變。因此該患者使用厄洛替尼靶向治療 26個月后出現病情進展伴惡性胸腔積液（見圖 3B）。此時獲取惡性胸腔積液標本用于 PDX 建模。經檢測胸水包埋標本及 PDX 均為 EGFR 21 L858R 突變陽性和 20T790M 突變陽性。隨后患者使用奧斯替尼靶向治療控制病情長達 13 個月（見圖3C）。在奧斯替尼治療前受試者母體腫瘤（見圖 3D，3E）與 CTC15035PDX 的組織學特征對比具有高度相似性。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]肺癌PDTX模型的研究進展[J]. 秦保東,焦曉棟,原凌燕,柳珂,臧遠勝.  中國肺癌雜志. 2017(10)
[2]肺癌的驅動基因與靶向治療研究進展[J]. 王莉潔,梁志欣,喻航,陳良安.  國際呼吸雜志. 2017 (04)
[3]非小細胞肺癌患者表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑耐藥機制及其治療方案的研究進展[J]. 馮煒紅,杜學明.  實用心腦肺血管病雜志. 2016(12)
[4]非小細胞肺癌EGFR基因T790M耐藥的機制和逆轉耐藥治療策略[J]. 王瑩,錢軍,譚潔.  臨床醫(yī)藥文獻電子雜志. 2016(46)
[5]肺腺癌表皮生長因子受體T790M突變裸鼠模型的建立與評價[J]. 李亞清,應希旺,嚴建平,曹立名,鄔盛昌,劉元順.  醫(yī)學研究雜志. 2016(10)
[6]非小細胞肺癌靶向治療及耐藥機制[J]. 華靜娜,史麗霞.  繼續(xù)醫(yī)學教育. 2016(07)
[7]人體腫瘤PDX移植模型的優(yōu)與劣[J]. 胡斌權,陳城明,張同弟,李天,師長宏.  實驗動物科學. 2015(05)
[8]Mechanisms of resistance to EGFR tyrosine kinase inhibitors[J]. Lihua Huang,Liwu Fu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)



本文編號：3034295