背景:EGFR基因敏感突變或ALK基因融合的非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者在接受特異性酪氨酸激酶抑制劑（TKIs）治療后可獲得顯著療效。但患者接受靶向治療一段時間后,部分腫瘤細(xì)胞會對該類藥物產(chǎn)生繼發(fā)性突變從而形成耐藥。對此,我們從兩位肺癌患者惡性胸腔積液中分離出的新鮮腫瘤細(xì)胞對小鼠進(jìn)行人源移植瘤模型（PDX）的建立以研究靶向藥物的耐藥機(jī)制。方法:對患者腫瘤組織標(biāo)本和建成的PDX同時進(jìn)行形態(tài)學(xué)比較和遺傳背景方面的檢測（全外顯子組基因測序,WES）�；诓煌幕蚍中团R床方面分別使用克唑替尼或奧斯替尼進(jìn)行靶向治療,并對所建PDX施以不斷的誘導(dǎo)用藥致其產(chǎn)生耐藥。以PDX瘤體體積大小作為治療后的觀測指標(biāo),病理染色選用HE染色法。實驗結(jié)果:PDX與患者母體腫瘤在組織學(xué)特征和治療療效上具有相似性。全外顯子組基因測序表明PDX與患者母體腫瘤在遺傳背景上也具有相似性（EML4-ALK gene fusion in Patient/PDX CTC15035;EGFR L858R and T790M gene mutations in Patient/PDX CTC15063）。在誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥后,ALK ... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

實驗基本流程圖

受試者在化療失敗后腫瘤繼續(xù)增大并伴有惡性胸腔積液（見圖2B）。此時獲取惡性胸腔積液標(biāo)本用于 PDX 建模并成功[62,63]。經(jīng)檢測活檢腫瘤母體及 PDX 均表現(xiàn) ALK 基因融合陽性，因此對受試者使用克唑替尼靶向治療，疾病控制時間長達(dá) 18 個月（見圖 2C）。通過對比在克唑替尼治療前受試者母體腫瘤（見圖 2D）與 CTC15035 PDX（見圖 2E）的組織學(xué)特征具有高度相似性。

例二一位 52 歲男性受試者（實驗編號 CTC15063）為 IV 期肺癌伴多發(fā)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。該患者經(jīng)手術(shù)完整切除腫瘤隨訪4年半后出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)伴右胸膜轉(zhuǎn)移（見圖3A）。手術(shù)標(biāo)本檢測提示 EGFR 21 L858R 突變。因此該患者使用厄洛替尼靶向治療 26個月后出現(xiàn)病情進(jìn)展伴惡性胸腔積液（見圖 3B）。此時獲取惡性胸腔積液標(biāo)本用于 PDX 建模。經(jīng)檢測胸水包埋標(biāo)本及 PDX 均為 EGFR 21 L858R 突變陽性和 20T790M 突變陽性。隨后患者使用奧斯替尼靶向治療控制病情長達(dá) 13 個月（見圖3C）。在奧斯替尼治療前受試者母體腫瘤（見圖 3D，3E）與 CTC15035PDX 的組織學(xué)特征對比具有高度相似性。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3034295