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攜Jagged 2基因siRNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)染對胰腺癌細(xì)胞影響

發(fā)布時間:2021-02-12 01:36
  目的:構(gòu)建攜帶Jagged 2(JAG2)基因siRNA的慢病毒表達(dá)載體,并觀察其轉(zhuǎn)染人胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。方法:采用基因重組技術(shù)構(gòu)建若干攜JAG2基因siRNA片段的慢病毒表達(dá)載體,將其轉(zhuǎn)染經(jīng)酶解法從胰腺癌組織標(biāo)本中原代分離的胰腺癌細(xì)胞;選擇對JAG2基因抑制效率最高的siRNA片段,通過MTT法、流式細(xì)胞術(shù)、Transwell小室實(shí)驗(yàn)觀察其轉(zhuǎn)染對原代胰腺癌細(xì)胞生長、凋亡、細(xì)胞周期及侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。結(jié)果:所構(gòu)建的攜JAG2基因siRNA片段的慢病毒表達(dá)載體均能不同程度降低原代胰腺癌細(xì)胞JAG2 mRNA與蛋白的表達(dá)。JAG2 siRNA轉(zhuǎn)染后,胰腺癌細(xì)胞的增殖明顯降低、凋亡與S期阻滯明顯增強(qiáng)、侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯減弱(均P<0.05)。結(jié)論:成功構(gòu)建攜JAG2基因siRNA慢病毒表達(dá)載體,其轉(zhuǎn)染能有效削弱人胰腺癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)特征。 

【文章來源】:中國普通外科雜志. 2017,26(09)北大核心

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 試劑與儀器
    1.2 胰腺癌原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)與傳代
    1.3 JAG2基因si RNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建與篩選
    1.4 JAG2基因si RNA慢病毒表達(dá)載體對人胰腺癌原代細(xì)胞生物學(xué)特性影響分析
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 JAG2基因si RNA慢病毒表達(dá)載體的篩選
    2.2 細(xì)胞增殖檢測
    2.3 細(xì)胞凋亡檢測
    2.4 細(xì)胞周期分析
    2.5 細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Affymetrix基因表達(dá)譜芯片技術(shù)篩選胰腺癌異常表達(dá)基因的研究[J]. 易超,依馬木買買提江·阿布拉,丁偉,蘇雅婷,晏冬,李海軍.  中國普通外科雜志. 2017(03)
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[3]胰腺癌的分子靶向治療研究進(jìn)展[J]. 鐘志惟,殷香保.  中國普通外科雜志. 2016(09)
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本文編號:3030041

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