目的:建立人對硼替佐米（BOR）耐藥的多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞株（U266/BOR）,并檢測其生物學(xué)特性。方法:應(yīng)用小劑量誘導(dǎo)和劑量遞增聯(lián)合誘導(dǎo)法建立耐藥細(xì)胞株U266/BOR;在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài);應(yīng)用MTT法測定兩種細(xì)胞的BOR半數(shù)抑制濃度（IC50）和耐藥系數(shù);繪制兩種細(xì)胞的生長曲線并計算二者的倍增時間;流式細(xì)胞術(shù)檢測兩種細(xì)胞的細(xì)胞周期,RT-PCR法檢測兩種細(xì)胞的相關(guān)耐藥基因mRNA水平。結(jié)果:成功建立了耐藥系數(shù)為19.8的耐藥細(xì)胞系U266/BOR;二者細(xì)胞形態(tài)上未見明顯差別;U266/BOR較U266細(xì)胞生長緩慢,其G₀/G₁期比例增加,S期比例減少;U266/BOR細(xì)胞中耐藥基因PTPROt、Beclin 1及PTEN的mRNA表達減少,而c-Maf的mRNA含量增加,但MDR1的mRNA表達量無明顯差別。結(jié)論:成功構(gòu)建人對BOR耐藥的MM細(xì)胞株U266/BOR,為BOR耐藥機制的深入研究提供了理想細(xì)胞模型。 

【文章來源】：中國實驗血液學(xué)雜志. 2017,25(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    試劑與儀器
    耐藥細(xì)胞株U266/BOR的建立
    藥物敏感性和耐藥系數(shù)的測定
    細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
    細(xì)胞周期檢測
    細(xì)胞生長曲線的繪制及倍增時間測定
    PTPROt、c-Maf、MDR1、Beclin 1及PTEN等耐藥基因mRNA表達的測定
    統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    藥物敏感性和耐藥系數(shù)
    細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
    細(xì)胞周期檢測
    細(xì)胞生長曲線和倍增時間
    相關(guān)耐藥基因的mRNA表達的測定
討論



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