隨著人們對(duì)納米科學(xué)和納米技術(shù)研究的日益深入,各種納米增強(qiáng)光學(xué)效應(yīng)不斷被揭示。利用這些納米光學(xué)效應(yīng)所提供的信息以及表面生物修飾技術(shù),可以設(shè)計(jì)和發(fā)展一系列具有高靈敏性和高選擇性的化學(xué)/生物傳感器。與現(xiàn)有的生物醫(yī)學(xué)診斷方法相比,納米光學(xué)效應(yīng)傳感器不僅具有優(yōu)異的信號(hào)放大能力,而且具有成本低、快速便捷等優(yōu)勢(shì)。在本論文中,我們利用納米粒子及其表面的點(diǎn)擊化學(xué)修飾策略,分別制備了葉酸受體靶向的熒光二氧化硅納米探針和表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）納米探針,并將其成功地應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞的選擇性識(shí)別與成像研究。此外,通過(guò)設(shè)計(jì)磷酸化誘導(dǎo)的銀納米粒子聚集體結(jié)構(gòu),利用SERS熱點(diǎn)及其光譜技術(shù),實(shí)現(xiàn)了對(duì)蛋白激酶A活性的高靈敏檢測(cè)。主要的研究?jī)?nèi)容總結(jié)如下:（1）采用點(diǎn)擊化學(xué)偶聯(lián)法對(duì)包裹釕聯(lián)吡啶的二氧化硅納米粒子表面進(jìn)行葉酸功能化修飾,構(gòu)建了一種葉酸受體靶向的熒光納米探針,并將其成功地用于腫瘤細(xì)胞的成像研究。細(xì)胞成像結(jié)果表明,該探針能夠有效地標(biāo)記葉酸受體呈陽(yáng)性的人宮頸癌細(xì)胞,而葉酸受體呈陰性的人肺癌細(xì)胞未觀察到明顯的熒光。同時(shí),葉酸競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)證了這種葉酸受體介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞成像機(jī)制。更為重要的是,該探針能夠?qū)崿F(xiàn)混合細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?（Ａ）美國(guó)和（Ｂ）中國(guó)癌癥發(fā)病率和死亡率趨勢(shì)??Ｆｉｇ．?１．１?Ｃａｎｃｅｒ?ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ?ａｎｄ?ｍｏｒｔａｌｉｔｙ?ｔｒｅｎｄｓ?ｉｎ?（Ａ）?ｔｈｅ?Ｕｎｉｔｅｄ?Ｓｔａｔｅｓ?ａｎｄ?（Ｂ）?Ｃｈｉｎａ，??

單鏈膜蛋白ＦＲ－ａ是研宄最多的亞型，它主要表達(dá)在乳腺、胎盤、子??宮等正常組織的上皮細(xì)胞中，可以將細(xì)胞外的葉酸及其衍生物通過(guò)內(nèi)吞途徑介導(dǎo)??到細(xì)胞內(nèi)（如圖１．２所示而ＦＲ－Ｐ大部分表達(dá)于造血細(xì)胞及胎盤組織中，ＦＲ－Ｙ??表達(dá)于淋巴細(xì)胞中。常用的檢測(cè)人體正常組織和腫瘤組織中ＦＲ的方法包括免疫??組織化學(xué)法、放射性同位素標(biāo)記法、ＲＴ－ＰＣＲ法、原位雜交法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)??法等［１２￣］。上述這些檢測(cè)方法大部分均具有較高的靈敏度和選擇性，依據(jù)測(cè)定的??具體對(duì)象及其性質(zhì)，可以選擇某一種方法來(lái)進(jìn)行分析。??Ｆｏｌａｔｅ?＝？??Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ?ａ?９??Ｆ〇Ｉａｔｅ?‘??Ｒｅｃｅｐｔｏｒ?＾?９??Ｈ＊?．?ａ?ｆｔ，，?；?．?Ｒｅｄｕｃｅｄ??，ｖ?Ｍ?齡Ｔ?Ｆｏｌａｔｅ?Ｃａｒｒｉｅｒ??／?＼?＿?Ｍｅｍｂｒａｎｅ?＋，々??，．：哉ｉ?？？丨ｎ—ｎ?？??；?ｆ?＼?＼?＼?Ｅｎｄｏｓｏｍｅ?０??Ｔ?＿?＿?＼?／?Ｒ－ＳＨ?Ｈ＊?？?Ｒ－ＳＨ??Ｔｕｍｏｒ?Ｃｅｌｌ?＼—一Ｚ?＇：＾＾ｌｙＳ〇ｓ〇ｍｅ??圖１．２?ＦＲ介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞靶向顯像劑及藥物｜ｎｌ。??Ｆｉｇ．?１．２?ＦＲ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｔｕｍｏｒ?ｃｅｌｌ－ｔａｒｇｅｔｅｄ?ｉｍａｇｉｎｇ?ａｇｅｎｔｓ?ａｎｄ?ｄｒｕｇｓ１＂１．??在腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)，ＦＲ－ａ廣泛表達(dá)于大多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞的表面（特別是上??皮來(lái)源的腫瘤）

了重大進(jìn)展［３５］，成功地解決了ＦＲ極難表達(dá)、純化和結(jié)晶這一技術(shù)瓶頸，并清楚??地解析了葉酸／ＦＲ－ｃｔ復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)，全面闡述了葉酸與ＦＲ－ａ的具體結(jié)合口袋??及精確的相互作用位點(diǎn)（如圖１．３所示）。這項(xiàng)突破性的成果將為在分子水平上設(shè)??計(jì)新型的具有ＦＲ－ｃｔ特異選擇性的葉酸拮抗劑提供理論指導(dǎo)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。??１??圖１．３?（Ａ）?ＦＲ－ａ的結(jié)構(gòu)及其（Ｂ）結(jié)合葉酸的口袋［３５］。??Ｆｉｇ．?１．３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＦＲ－ａ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｏｃｋｅｔ?ｆｏｒ?ｆｏｌｉｃ?ａｃｉｄ１３５１．??３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]激酶檢測(cè)方法的最新研究進(jìn)展[J]. 劉楊,鄒笑然,李琛琛,張春陽(yáng).  分析化學(xué). 2018(01)
[2]Cancer incidence and mortality in China in 2013:an analysis based on urbanization level[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Tingting Zuo,Changfa Xia,Zhixun Yang,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2017(01)
[3]蛋白質(zhì)磷酸化作用的電化學(xué)檢測(cè)方法[J]. 高飛飛,王粵博.  化學(xué)進(jìn)展. 2014(05)
[4]包裹RuBpy二氧化硅熒光納米探針的制備及其用于肝癌細(xì)胞的識(shí)別[J]. 陳敏艷,陳澤忠,王維,朱鏈,唐宏武,龐代文.  分析化學(xué). 2014(03)
[5]基于納米結(jié)構(gòu)材料的磷酸化蛋白/多肽富集和分析[J]. 程功,王志剛,劉彥琳,張吉林,孫德慧,倪嘉纘.  化學(xué)進(jìn)展. 2013(04)
[6]葉酸受體α與卵巢腫瘤[J]. 周希彬,邱鄭,劉欣欣,張娟,何瑤玉,王筱蒙,王旻.  藥物生物技術(shù). 2012(05)
[7]點(diǎn)擊化學(xué)最新進(jìn)展[J]. 邱素艷,高森,林振宇,陳國(guó)南.  化學(xué)進(jìn)展. 2011(04)
[8]磷酸化蛋白質(zhì)分析[J]. 趙鵬,徐霞紅,周立分,劉欣,聶舟,姚守拙.  化學(xué)傳感器. 2011(01)
[9]環(huán)糊精衍生物的點(diǎn)擊化學(xué)合成法的研究進(jìn)展[J]. 安偉,張華承,孫濤,李祥軍,郝愛(ài)友.  有機(jī)化學(xué). 2011(03)
[10]表面增強(qiáng)拉曼光譜應(yīng)用于標(biāo)記免疫多組分檢測(cè)[J]. 葛明,鮑芳,姚建林,孫如,顧仁敖.  化學(xué)學(xué)報(bào). 2009(20)



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