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順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細胞株HGC-27和MGC-803的抑制作用及其機制研究

發(fā)布時間:2021-01-28 06:32
  目的:本研究旨在探討順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細胞株的抑制作用及其分子機制,為臨床治療胃癌研究高效低毒化療藥物提供新的思路和方法。方法:選取人胃癌細胞株HGC-27和MGC-803作為實驗研究對象。設(shè)置空白對照組、順鉑組(DDP,10μM)、紅景天苷組(8000μM)及聯(lián)合給藥組(DDP 10μM+紅景天苷8000μM)進行實驗研究。1.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細胞的抑制作用研究:采用MTT法檢測順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥對HGC-27和MGC-803細胞活力的影響;利用光學顯微鏡及熒光顯微鏡觀察給藥后胃癌細胞在形態(tài)學上的改變;通過細胞克隆形成實驗觀察聯(lián)合給藥對胃癌細胞增殖能力的影響;2.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細胞信號通路影響研究:采用JC-1染色實驗觀察給藥后胃癌細胞線粒體膜電位變化;采用q-PCR實驗檢測藥物對胃癌細胞線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax基因表達的影響;3.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥抑制胃癌細胞的轉(zhuǎn)錄組學研究:順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥作用HGC-27細胞24 h后,選取空白對照組細胞及藥物處理組細胞,采用高通量測序技術(shù)分析轉(zhuǎn)錄組情況,并進行GO(Gene ... 

【文章來源】:河北大學河北省

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細胞株HGC-27和MGC-803的抑制作用及其機制研究


順鉑、紅景天苷及順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細胞MGC-803和HGC-27增殖的影響

形態(tài)圖,紅景天,細胞,顯微鏡


第二章順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細胞抑制作用研究9MGC-803HGC-27MGC-803HGC-27圖2-2光學顯微鏡觀察順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥后MGC-803和HGC-27細胞形態(tài)變化AO/EB是常用熒光染色劑,其原理為當細胞胞膜完整時,只有AO能夠穿過胞膜將細胞綠染;當細胞胞膜受損時,則EB可以穿過胞膜將細胞染色為橘紅色。AO/EB雙染后利用熒光顯微鏡觀察,當細胞結(jié)構(gòu)正常時,顏色呈綠色的是活細胞,顏色呈橘紅色的是死亡細胞;當細胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)圓珠或固縮狀改變時,顏色呈綠色的是早期凋亡細胞,呈橘紅色的則是晚期凋亡細胞。如圖2-3所示,對照組細胞均呈現(xiàn)綠色熒光,順鉑與紅景天苷單獨給藥后橘紅色熒光不同程度增多,并出現(xiàn)部分細胞固縮,順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥組綠色熒光更弱,橘紅色熒光更明顯,且大部分細胞呈固縮狀,說明聯(lián)合給藥可以誘導胃癌細胞的凋亡。圖2-3AO/EB雙染后熒光顯微鏡觀察MGC-803和HGC-27細胞凋亡形態(tài)學改變

熒光,顯微鏡,形態(tài)學,細胞凋亡


第二章順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細胞抑制作用研究9MGC-803HGC-27MGC-803HGC-27圖2-2光學顯微鏡觀察順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥后MGC-803和HGC-27細胞形態(tài)變化AO/EB是常用熒光染色劑,其原理為當細胞胞膜完整時,只有AO能夠穿過胞膜將細胞綠染;當細胞胞膜受損時,則EB可以穿過胞膜將細胞染色為橘紅色。AO/EB雙染后利用熒光顯微鏡觀察,當細胞結(jié)構(gòu)正常時,顏色呈綠色的是活細胞,顏色呈橘紅色的是死亡細胞;當細胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)圓珠或固縮狀改變時,顏色呈綠色的是早期凋亡細胞,呈橘紅色的則是晚期凋亡細胞。如圖2-3所示,對照組細胞均呈現(xiàn)綠色熒光,順鉑與紅景天苷單獨給藥后橘紅色熒光不同程度增多,并出現(xiàn)部分細胞固縮,順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥組綠色熒光更弱,橘紅色熒光更明顯,且大部分細胞呈固縮狀,說明聯(lián)合給藥可以誘導胃癌細胞的凋亡。圖2-3AO/EB雙染后熒光顯微鏡觀察MGC-803和HGC-27細胞凋亡形態(tài)學改變

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3004519

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