目的:本研究旨在探討順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細(xì)胞株的抑制作用及其分子機(jī)制,為臨床治療胃癌研究高效低毒化療藥物提供新的思路和方法。方法:選取人胃癌細(xì)胞株HGC-27和MGC-803作為實(shí)驗(yàn)研究對象。設(shè)置空白對照組、順鉑組（DDP,10μM）、紅景天苷組（8000μM）及聯(lián)合給藥組（DDP 10μM+紅景天苷8000μM）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。1.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細(xì)胞的抑制作用研究:采用MTT法檢測順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥對HGC-27和MGC-803細(xì)胞活力的影響;利用光學(xué)顯微鏡及熒光顯微鏡觀察給藥后胃癌細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上的改變;通過細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察聯(lián)合給藥對胃癌細(xì)胞增殖能力的影響;2.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細(xì)胞信號通路影響研究:采用JC-1染色實(shí)驗(yàn)觀察給藥后胃癌細(xì)胞線粒體膜電位變化;采用q-PCR實(shí)驗(yàn)檢測藥物對胃癌細(xì)胞線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax基因表達(dá)的影響;3.順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥抑制胃癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究:順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥作用HGC-27細(xì)胞24 h后,選取空白對照組細(xì)胞及藥物處理組細(xì)胞,采用高通量測序技術(shù)分析轉(zhuǎn)錄組情況,并進(jìn)行GO（Gene ... 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

順鉑、紅景天苷及順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對人胃癌細(xì)胞MGC-803和HGC-27增殖的影響

第二章順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細(xì)胞抑制作用研究9MGC-803HGC-27MGC-803HGC-27圖2-2光學(xué)顯微鏡觀察順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥后MGC-803和HGC-27細(xì)胞形態(tài)變化AO/EB是常用熒光染色劑，其原理為當(dāng)細(xì)胞胞膜完整時(shí)，只有AO能夠穿過胞膜將細(xì)胞綠染；當(dāng)細(xì)胞胞膜受損時(shí)，則EB可以穿過胞膜將細(xì)胞染色為橘紅色。AO/EB雙染后利用熒光顯微鏡觀察，當(dāng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常時(shí)，顏色呈綠色的是活細(xì)胞，顏色呈橘紅色的是死亡細(xì)胞；當(dāng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)圓珠或固縮狀改變時(shí)，顏色呈綠色的是早期凋亡細(xì)胞，呈橘紅色的則是晚期凋亡細(xì)胞。如圖2-3所示，對照組細(xì)胞均呈現(xiàn)綠色熒光，順鉑與紅景天苷單獨(dú)給藥后橘紅色熒光不同程度增多，并出現(xiàn)部分細(xì)胞固縮，順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥組綠色熒光更弱，橘紅色熒光更明顯，且大部分細(xì)胞呈固縮狀，說明聯(lián)合給藥可以誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞的凋亡。圖2-3AO/EB雙染后熒光顯微鏡觀察MGC-803和HGC-27細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變

第二章順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥對胃癌細(xì)胞抑制作用研究9MGC-803HGC-27MGC-803HGC-27圖2-2光學(xué)顯微鏡觀察順鉑、紅景天苷及聯(lián)合給藥后MGC-803和HGC-27細(xì)胞形態(tài)變化AO/EB是常用熒光染色劑，其原理為當(dāng)細(xì)胞胞膜完整時(shí)，只有AO能夠穿過胞膜將細(xì)胞綠染；當(dāng)細(xì)胞胞膜受損時(shí)，則EB可以穿過胞膜將細(xì)胞染色為橘紅色。AO/EB雙染后利用熒光顯微鏡觀察，當(dāng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常時(shí)，顏色呈綠色的是活細(xì)胞，顏色呈橘紅色的是死亡細(xì)胞；當(dāng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)圓珠或固縮狀改變時(shí)，顏色呈綠色的是早期凋亡細(xì)胞，呈橘紅色的則是晚期凋亡細(xì)胞。如圖2-3所示，對照組細(xì)胞均呈現(xiàn)綠色熒光，順鉑與紅景天苷單獨(dú)給藥后橘紅色熒光不同程度增多，并出現(xiàn)部分細(xì)胞固縮，順鉑與紅景天苷聯(lián)合給藥組綠色熒光更弱，橘紅色熒光更明顯，且大部分細(xì)胞呈固縮狀，說明聯(lián)合給藥可以誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞的凋亡。圖2-3AO/EB雙染后熒光顯微鏡觀察MGC-803和HGC-27細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變

【參考文獻(xiàn)】：
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