間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs）是一類能夠自我更新復(fù)制和向不同方向分化的成體干細(xì)胞,能分化為間質(zhì)組織,并經(jīng)誘導(dǎo)分化成為多種組織細(xì)胞。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human UmbilicalCord Mesenchymal Stem Cells, HUMSCs）來源于新生兒臍帶華通氏膠,因不受倫理限制、免疫原性低、體外增殖能力強(qiáng)等優(yōu)勢,而成為細(xì)胞治療中的種子細(xì)胞,是再生醫(yī)學(xué),細(xì)胞移植及疾病治療的研究熱點(diǎn)。然而對于HUMSCs治療腫瘤的機(jī)理還需進(jìn)一步地研究探討,所以本研究選用HUMSCs口卵巢癌細(xì)胞（HO8910）共培養(yǎng),進(jìn)而探討腫瘤細(xì)胞的微環(huán)境對HUMSCs生物活性的影響。通過“爬片”的方法從人臍帶中分離獲得HUMSC s,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測干細(xì)胞的表面標(biāo)記物,使用Trans well共培養(yǎng)HUMSCs和HO8910,利用MTT法檢測共培養(yǎng)對HUMSCs增殖及遷移的影響,用Western Blot測定共培養(yǎng)對HUMSCs凋亡的影響。流式細(xì)胞儀檢測顯示HUMSCs高表達(dá)CD105、CD90、CD73、 CD29,低表達(dá)CD45、CD34和HLA-DR。HO... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
一 引言
二 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 主要試劑及實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 主要儀器設(shè)備
    2.3 常用溶液的配制
        2.3.1 完全培養(yǎng)基DMEM的配制
        2.3.2 配制PBS
        2.3.3 胰蛋白酶的配制
        2.3.4 電泳緩沖液（Running buffer）的配制
        2.3.5 轉(zhuǎn)膜緩沖液（Transfer buffer）的配制
        2.3.6 TBST Buffer液的配制
        2.3.7 顯影液和定影液的配制
        2.3.8 配制明膠
        2.3.9 配制饑餓培養(yǎng)基
三 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 HUMSC的分離和培養(yǎng)
        3.1.1 HUMSCs的分離
        3.1.2 HUMSCs的傳代
        3.1.3 HUMSC的凍存
        3.1.4 HUMSCs的復(fù)蘇
    3.2 HUMSC生物學(xué)特性鑒定
        3.2.1 HUMSCs形態(tài)學(xué)的觀察
        3.2.2 HUMSCs標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        3.2.3 HUMSCs生長曲線的制作
        3.2.4 HUMSCs的細(xì)胞表面標(biāo)記物的檢測
        3.2.5 上清液的收集
        3.2.6 蛋白的提取
        3.2.7 Wensten Blot
        3.2.8 HO8910上清液對HUMSC增殖的影響
        3.2.9 共培養(yǎng)對HUMSC增殖的影響
        3.2.10 MTT法檢測共培養(yǎng)對HUMSC細(xì)胞遷移的影響
四 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    4.1 HUMSCs的分離與培養(yǎng)
    4.2 HUMSC標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
    4.3 HUMSC生長曲線的繪制
    4.4 HUMSC表面標(biāo)記物的檢測
    4.5 共培養(yǎng)對HUMSC生物功能的影響
        4.5.1 HO8910上清液對HUMSC細(xì)胞增殖的影響
        4.5.2 培養(yǎng)HO8910上清液對HUMSC細(xì)胞遷移的影響
        4.5.3 培養(yǎng)HO8910上清液對HUMSC細(xì)胞凋亡的影響
        4.5.4 Transwell共培養(yǎng)對HUMSC細(xì)胞增殖的影響
        4.5.5 Transwell共培養(yǎng)對HUMSC細(xì)胞遷移的影響
五 討論
六 結(jié)論
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Differentiation of rat marrow mesenchymal stem cells into pancreatic islet beta-cells[J]. Li-Bo Chen Xiao-Bing Jiang Lian Yang Department of Surgery,Union Hospital of Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,Hubei Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(20)



本文編號：2996339