發(fā)布時間：2021-01-24 01:55

　　間充質(zhì)干細胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs）是一類能夠自我更新復(fù)制和向不同方向分化的成體干細胞,能分化為間質(zhì)組織,并經(jīng)誘導(dǎo)分化成為多種組織細胞。人臍帶間充質(zhì)干細胞（Human UmbilicalCord Mesenchymal Stem Cells, HUMSCs）來源于新生兒臍帶華通氏膠,因不受倫理限制、免疫原性低、體外增殖能力強等優(yōu)勢,而成為細胞治療中的種子細胞,是再生醫(yī)學(xué),細胞移植及疾病治療的研究熱點。然而對于HUMSCs治療腫瘤的機理還需進一步地研究探討,所以本研究選用HUMSCs口卵巢癌細胞（HO8910）共培養(yǎng),進而探討腫瘤細胞的微環(huán)境對HUMSCs生物活性的影響。通過“爬片”的方法從人臍帶中分離獲得HUMSC s,采用流式細胞術(shù)檢測干細胞的表面標記物,使用Trans well共培養(yǎng)HUMSCs和HO8910,利用MTT法檢測共培養(yǎng)對HUMSCs增殖及遷移的影響,用Western Blot測定共培養(yǎng)對HUMSCs凋亡的影響。流式細胞儀檢測顯示HUMSCs高表達CD105、CD90、CD73、 CD29,低表達CD45、CD34和HLA-DR。HO... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
一 引言
二 實驗材料
    2.1 主要試劑及實驗材料
    2.2 主要儀器設(shè)備
    2.3 常用溶液的配制
        2.3.1 完全培養(yǎng)基DMEM的配制
        2.3.2 配制PBS
        2.3.3 胰蛋白酶的配制
        2.3.4 電泳緩沖液（Running buffer）的配制
        2.3.5 轉(zhuǎn)膜緩沖液（Transfer buffer）的配制
        2.3.6 TBST Buffer液的配制
        2.3.7 顯影液和定影液的配制
        2.3.8 配制明膠
        2.3.9 配制饑餓培養(yǎng)基
三 實驗方法
    3.1 HUMSC的分離和培養(yǎng)
        3.1.1 HUMSCs的分離
        3.1.2 HUMSCs的傳代
        3.1.3 HUMSC的凍存
        3.1.4 HUMSCs的復(fù)蘇
    3.2 HUMSC生物學(xué)特性鑒定
        3.2.1 HUMSCs形態(tài)學(xué)的觀察
        3.2.2 HUMSCs標準曲線的制作
        3.2.3 HUMSCs生長曲線的制作
        3.2.4 HUMSCs的細胞表面標記物的檢測
        3.2.5 上清液的收集
        3.2.6 蛋白的提取
        3.2.7 Wensten Blot
        3.2.8 HO8910上清液對HUMSC增殖的影響
        3.2.9 共培養(yǎng)對HUMSC增殖的影響
        3.2.10 MTT法檢測共培養(yǎng)對HUMSC細胞遷移的影響
四 實驗結(jié)果與分析
    4.1 HUMSCs的分離與培養(yǎng)
    4.2 HUMSC標準曲線的繪制
    4.3 HUMSC生長曲線的繪制
    4.4 HUMSC表面標記物的檢測
    4.5 共培養(yǎng)對HUMSC生物功能的影響
        4.5.1 HO8910上清液對HUMSC細胞增殖的影響
        4.5.2 培養(yǎng)HO8910上清液對HUMSC細胞遷移的影響
        4.5.3 培養(yǎng)HO8910上清液對HUMSC細胞凋亡的影響
        4.5.4 Transwell共培養(yǎng)對HUMSC細胞增殖的影響
        4.5.5 Transwell共培養(yǎng)對HUMSC細胞遷移的影響
五 討論
六 結(jié)論
文獻綜述
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Differentiation of rat marrow mesenchymal stem cells into pancreatic islet beta-cells[J]. Li-Bo Chen Xiao-Bing Jiang Lian Yang Department of Surgery,Union Hospital of Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,Hubei Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(20)



本文編號：2996339