發(fā)布時間：2021-01-17 04:06

　　[背景]腫瘤的發(fā)展過程可分為無血管的緩慢生長階段和有血管的快速生長階段,在無血管階段腫瘤細胞主要依靠鄰近的血管系統(tǒng)獲得氧和營養(yǎng)物質(zhì),并運走代謝產(chǎn)物,此時腫瘤的體積很少超過1—2mm3。隨著腫瘤的生長鄰近血管系統(tǒng)的供給已不能滿足腫瘤細胞的生長需求,腫瘤細胞通過合成分泌促血管生長因子參與腫瘤血管的生成,以形成新的微血管網(wǎng)絡(luò)滿足腫瘤細胞的生長需要。因此,抗腫瘤血管生成為抑制腫瘤生長的重要策略。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelia growth factor,VEGF）作為最主要的血管生成因子,能促進血管的形成,提高血管的通透性,刺激腫瘤基質(zhì)形成和腫瘤細胞進入新生血管,從而促進腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移。目前,VEGF單克隆抗體在臨床抗腫瘤血管生成治療中已獲得應(yīng)用。成纖維細胞生長因子-2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）同樣具有顯著的促腫瘤血管生成活性,是臨床靶向VEGF治療耐藥性產(chǎn)生的重要原因。近年發(fā)現(xiàn),腫瘤血管異常,在腫瘤免疫抑制微環(huán)境形成與發(fā)展中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。[目的]構(gòu)建VEGF和FGF-2基因重組疫苗,探討疫苗主動免疫策略誘導(dǎo)持續(xù)存在的特異... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１重組表達質(zhì)粒構(gòu)建示意圖??

３．１酶切鑒定重組質(zhì)粒??重組質(zhì)粒ｐＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ和ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ進行酶切鑒定。利用Ｍｅｌ和￡ｃｏＲＩ??雙酶切質(zhì)粒；？ＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ，產(chǎn)生的片段為３１５ｂｐ，如圖２ａ所示；利用Ｍｉｅｌ和Ｘｐｎｌ??雙酶切質(zhì)粒ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ，產(chǎn)生Ｑ?３?－ＶＥＧＦ片段為４７７ｂｐ，如圖２ｂ所示。同樣，利??用ＴＶｄｅｌ和尺ｐｎｌ雙酶切質(zhì)粒ｐＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２，產(chǎn)生ＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２片段為９０９ｂｐ，??如圖３ａ所示；利用ＴＶｄｅｌ和Ａ：ｐｎｌ雙酶切質(zhì)粒；？Ｑ?３?－ＦＧＦ－２，產(chǎn)生Ｑ?Ｐ?－ＦＧＦ－２片段??為８２２ｂｐ，如圖３ｂ所示。酶切后瓊脂糖凝膠結(jié)果顯示，目的條帶與酶切片段預(yù)期??大小一致。將所檢測質(zhì)粒送樣進行測序鑒定，結(jié)果顯示插入片段是正確的。??ｂｐ?ｂｐ??ｄ一?ｌｏｏｏｏ???５００——剛〇???一?３〇〇—ｏ（）０??■?■二??ｉｏｏ——■?：?■?丨?��；??５〇－ＢＨＩ?■■??ａ?ｂ??圖２重組質(zhì)

雙酶切質(zhì)粒ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ，產(chǎn)生Ｑ?３?－ＶＥＧＦ片段為４７７ｂｐ，如圖２ｂ所示。同樣，利??用ＴＶｄｅｌ和尺ｐｎｌ雙酶切質(zhì)粒ｐＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２，產(chǎn)生ＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２片段為９０９ｂｐ，??如圖３ａ所示；利用ＴＶｄｅｌ和Ａ：ｐｎｌ雙酶切質(zhì)粒；？Ｑ?３?－ＦＧＦ－２，產(chǎn)生Ｑ?Ｐ?－ＦＧＦ－２片段??為８２２ｂｐ，如圖３ｂ所示。酶切后瓊脂糖凝膠結(jié)果顯示，目的條帶與酶切片段預(yù)期??大小一致。將所檢測質(zhì)粒送樣進行測序鑒定，結(jié)果顯示插入片段是正確的。??ｂｐ?ｂｐ??ｄ一?ｌｏｏｏｏ???５００——剛〇???一?３〇〇—ｏ（）０??■?■二??ｉｏｏ——■?：?■?丨?��；??５〇－ＢＨＩ?■■??ａ?ｂ??圖２重組質(zhì)粒ｐＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ和ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ的酶切鑒定??ａ）


本文編號：2982172