目的:環(huán)狀RNA（circRNA）是一類由5’和3’末端共價(jià)連接形成的環(huán)狀RNA分子,研究表明其在人類癌癥中起著重要的調(diào)控作用,但circRNA在胃癌中的相關(guān)研究仍鮮少報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)FND3B環(huán)狀RNA（circFNDC3B）表達(dá)水平在胃癌組織中下降,提示circFNDC3B在胃癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮著重要的作用。因此,本文以兩種具有不同的circFNDC3B表達(dá)水平的胃癌細(xì)胞為主要的研究對(duì)象來(lái)探索circFNDC3B在胃癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用與分子機(jī)制。方法:首先,利用qRT-PCR驗(yàn)證circFNDC3B在胃癌臨床樣本和胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平;其次,采用無(wú)縫克隆技術(shù)構(gòu)建circFNDC3B過(guò)表達(dá)載體和siRNA技術(shù)分別對(duì)MGC-803細(xì)胞和BGC-823細(xì)胞進(jìn)行circFNDC3B表達(dá)水平的介入干擾,再通過(guò)一系列western blot、劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell實(shí)驗(yàn)和qRT-PCR等實(shí)驗(yàn)對(duì)circFNDC3B在胃癌細(xì)胞中的表型和功能作用進(jìn)行探究;最后,采用RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀分析（RIP）和RNApull-down實(shí)驗(yàn)分析證實(shí)circFNDC3B與IGF2BP3、CD44... 

【文章來(lái)源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ｃｉｒｃＲＮＡｓ生物合成模型

雙鏈ＲＮＡ通過(guò)解鎖莖環(huán)結(jié)構(gòu)以拮抗ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生物發(fā)生［１８］。隨著探索ｃｉｒｃＲＮＡｓ??生物合成的持續(xù)進(jìn)展，張等人提出了類似于可變剪接的可變環(huán)化模型以系統(tǒng)性地??解釋ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生成機(jī)制［７］（如圖２所示）。在ＲＮＡ配對(duì)過(guò)程中，重復(fù)或非重??復(fù)的側(cè)翼內(nèi)含子互補(bǔ)序列的競(jìng)爭(zhēng)會(huì)影響剪接選擇和外顯子環(huán)化，且橫跨于側(cè)翼內(nèi)??含子的互補(bǔ)序列可明顯促進(jìn)外顯子的環(huán)化。反向互補(bǔ)序列可以導(dǎo)致多個(gè)ｃｉｒｃＲＮＡｓ??來(lái)源于同一個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄本。由于互補(bǔ)序列在不同物種間的分布不同，可變環(huán)化??可導(dǎo)致物種之間的特異性環(huán)化�；パa(bǔ)序列的存在可促進(jìn)轉(zhuǎn)錄本通過(guò)可變環(huán)化形成??ｃｉｒｃＲＮＡｓ，但互補(bǔ)序列對(duì)于外顯子環(huán)化來(lái)說(shuō)是必要但不充分條件［７］，這個(gè)模型暗??示可變環(huán)化的復(fù)雜性和ｃｉｒｃＲＮＡｓ的多樣性，且一定程度上可能受其他因素的影??響，如ＲＢＰｓ正向或負(fù)向調(diào)控ｃｉｒｃＲＮＡｓ的形成［５］。??２??

利用ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)５種胃癌細(xì)胞系（ＧＥＳ－ｌ，ＡＧＳ，ＳＧＣ－７９０１，??ＭＧＣ－８０３，?ＢＧＣ－８２３）中?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?表達(dá)水平的差異，發(fā)現(xiàn)?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?的表??達(dá)水平在不同細(xì)胞系中呈現(xiàn)出不同的表達(dá)水平，結(jié)果如圖３．２所示。ＳＧＣ－７９０１??細(xì)胞和ＭＧＣ－８０３細(xì)胞中ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ的表達(dá)水平明顯低于ＧＥＳ－１細(xì)胞（正常胃??粘膜細(xì)胞系），分別為ｐ＜〇．〇〇〇ｌ和Ｐ＝〇．〇〇３２，但ＢＧＣ－８２３細(xì)胞的表達(dá)水平卻明??顯高于ＧＥＳ－１細(xì)胞（ｐ＝０．０００７）。此外，本文還分析了每個(gè)細(xì)胞系中的ＦＮＤＣ３Ｂ??ｍＲＮＡ的表達(dá)水平，結(jié)果顯示在ＭＧＣ－８０３細(xì)胞中ＦＮＤＣ３Ｂ?ｍＲＮＡ明顯增加??３２??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Circular RNA hsacirc0000745 may serve as a diagnostic marker for gastric cancer[J]. Mei Huang,Yi-Ren He,Li-Chuan Liang,Qiang Huang,Zhi-Qiang Zhu.  World Journal of Gastroenterology. 2017(34)
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