背景肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是人類最常見的惡性腫瘤之一。隨著血清甲胎蛋白（AFP）檢測(cè)的普及,影像學(xué)檢查技術(shù)的進(jìn)步以及人們健康意識(shí)的提高,近年來(lái)對(duì)于早期肝癌的診出率較以前有了明顯的提高,雖然外科手術(shù)技術(shù)以及微創(chuàng)治療技術(shù)的日漸成熟和大范圍推廣,但肝癌的總體預(yù)后仍不理想,這與肝癌侵襲性和轉(zhuǎn)移能力強(qiáng)密不可分。MicroRNA（miRNA）是長(zhǎng)約20～25個(gè)核苷酸,具有調(diào)控功能的內(nèi)源性非編碼RNA。越來(lái)越多的研究表明miRNAs與肝癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、侵襲及預(yù)后密切相關(guān)。miR-346在多種腫瘤中發(fā)揮癌基因的功能,但miR-346在肝癌發(fā)生發(fā)展中的報(bào)道還很少見。我們首先檢測(cè)了 miR-346在肝癌組織和肝癌細(xì)胞中的表達(dá)水平,并分析與肝癌患者臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系,以及對(duì)肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。然后通過(guò)生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)并在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中證實(shí)miR-346通過(guò)抑制BRMS1的表達(dá)促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,并減少肝癌細(xì)胞凋亡,為肝細(xì)胞肝癌的治療提供了新的靶點(diǎn)。第一部分miR-346在肝癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究目的研究miR-346在肝癌組織中的表達(dá)... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．７熒光顯微鏡下觀察感染效率（１００?Ｘ）??Ｆｉｇ?１．７?Ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｗａｓ?ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｕｎｄｅｒ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?（１００?Ｘ?）??

告基因?qū)嶒?yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，外源性高表達(dá)的ｍｉＲ－３４６可以明顯降??低攜帶野生型ＢＲＭＳ１?３’－ＵＴＲ報(bào)告基因的活性（Ｐ＜０．０５），而對(duì)于攜帶突變型??ＢＲＭＳ１３’－ＵＴＲ報(bào)告基因的活性沒(méi)有影響（圖２．２）。為了進(jìn)一步驗(yàn)證，我們?cè)??過(guò)表達(dá)ｍｉＲ－３４６的ＳＭＭＣ－７７２１細(xì)胞和Ｂｅｌ－７４０２細(xì)胞中，應(yīng)用Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ和??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ在ｍＲＮＡ和蛋白水平驗(yàn)證ｍｉＲ－３４６對(duì)ＢＲＭＳ１的影響，同時(shí)在低表??達(dá)ｍｉＲ－３４６的ＨｅｐＧ２細(xì)胞和ＭＨＣＣ－９７Ｈ細(xì)胞中進(jìn)行反向驗(yàn)證。結(jié)果如圖２．３所??示，過(guò)表達(dá)ｍｉＲ－３４６在ｍＲＮＡ和蛋白水平均可以下調(diào)ＢＲＭＳ１的表達(dá)，且差異??有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５）。下調(diào)ｍｉＲ－３４６的表達(dá)后，ＢＲＭＳ１在ｍＲＮＡ和蛋白水??平的表達(dá)均較對(duì)照組顯著上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５）。綜合以上結(jié)果，??我們可以認(rèn)定ＢＲＭＳ１是ｍｉＲ－３４６的一個(gè)靶基因。??４８??

Ａｄｊａｃｅｎｔ?ＨＣＣ??圖２．５?ＢＲＭＳｌ蛋白在肝癌和癌旁組織中的表達(dá)水平??Ｆｉｇ２．５?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＢＲＭＳ?ｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｌｉｖｅｒ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ??４．１?ＢＲＭＳｌ組織芯片染色結(jié)果??ＢＲＭＳ１陽(yáng)性表達(dá)位于胞漿和胞核內(nèi)，我們根據(jù)ＢＲＭＳ１染色強(qiáng)度和范圍的??４、同，對(duì)ＢＲＭＳ１的表達(dá)水平進(jìn)行評(píng)分，從低表達(dá)到尚表達(dá)分為：ｓｃｏｒｅ?０＋、ｓｃｏｒｅ??１＋、ｓｃｏｒｅ?２＋、ｓｃｏｒｅ?３＋、ｓｃｏｒｅ?４＋?（見圖?２．６）?〇??Ｓｃｏｒｅ?Ｏｆ?Ｓｃｏｒｅ?１＋?Ｓｃｏｒｅ?２＋?Ｓｃｏｒｅ?３＋?Ｓｃｏｒｅ?４＋??圖２．６?ＢＲＭＳｌ在肝癌組織芯片中的表達(dá)??Ｆｉｇ２．６?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＢＲＭＳｌ?ｉｎ?ＨＣＣ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｏｎ?ＴＭＡ?ｓｌｉｄｅ


本文編號(hào)：2959543