目的研究CtBP2在調(diào)控食管鱗狀細胞癌（Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC）血管生成中的作用,初步探討CtBP2影響食管鱗癌血管生成可能的分子機制。方法（1）在組織水平,分別采用Western Blot法和免疫組織化學(xué)染色技術(shù),對比食管鱗癌癌組織和癌旁正常組織中CtBP2的表達;采用免疫熒光技術(shù),對比癌組織和癌旁正常組織中微血管數(shù)量。（2）在細胞水平,應(yīng)用細胞轉(zhuǎn)染技術(shù),構(gòu)建五種細胞系:轉(zhuǎn)染Flag-CtBP2質(zhì)粒的細胞系、轉(zhuǎn)染CtBP2 siRNA質(zhì)粒的細胞系、轉(zhuǎn)染Flag-Empty質(zhì)粒的細胞系、轉(zhuǎn)染Empty siRNA質(zhì)粒的細胞系、未轉(zhuǎn)染的ECA109細胞系,分別與血管內(nèi)皮細胞共培養(yǎng),建立五組共培養(yǎng)細胞體系。（3）對五組共培養(yǎng)細胞體系,用Western Blot法分別檢測CtBP2表達量和CD31表達量;分別行血管成管實驗,檢測CtBP2表達水平對腫瘤血管新生的影響。（4）對五組共培養(yǎng)細胞,分別應(yīng)用EdU核酸標記技術(shù)、流式細胞儀、細胞劃痕實驗,檢測CtBP2表達水平對血管內(nèi)皮細胞增殖、凋亡和遷移能力的影響。（5）對五組共培養(yǎng)細胞,分別用... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：博士

【圖文】：

對比癌組織和癌旁正常組織的CtBP2表達水平和微血管數(shù)量

圖 2：檢測食管鱗癌細胞系中 CtBP2 與血管新生的關(guān)系，食管鱗癌細胞ECA109 的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染方法見材料與方法部分。A：用 Western Blot 檢測 CtBP2和 CD31 含量。與對照組相比，食管鱗癌細胞 ECA109 轉(zhuǎn)染了含 Flag-CtBP2 的質(zhì)粒后，CtBP2 過表達；食管鱗癌細胞 ECA109 轉(zhuǎn)染了含 CtBP2 siRNA 的質(zhì)粒

圖 3：檢測食管鱗癌細胞系中 CtBP2 表達量對血管內(nèi)皮細胞的增殖、凋亡和遷移的影響。食管鱗癌細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染方法見材料與方法部分，分組同上。A 和B：用 EdU 核酸標記技術(shù)，觀察血管內(nèi)皮細胞的增殖能力（×400）。與對照組相比，過表達 CtBP2 組血管內(nèi)皮細胞的增殖數(shù)量明顯增多，抑制表達 CtBP2 組血

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國腫瘤登記地區(qū)2007年腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,張思維,鄭榮壽,雷正龍,李光琳,鄒小農(nóng),趙平.  中國腫瘤. 2011(03)



本文編號：2954620