目的:探討臍血間充質(zhì)干細(xì)胞對急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞株HL-60、急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞增殖和凋亡的影響及CXCL12/CXCR4信號軸在其中發(fā)揮的作用;探討AMD3100、G-CSF對CXCL12/CXCR4信號軸的影響及其機(jī)制。方法:將HL-60細(xì)胞株、Jurkat細(xì)胞株分別與人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞（HUCMSC）共培養(yǎng)建立共培養(yǎng)模型,并加用G-CSF、AMD3100單藥或聯(lián)合處理共培養(yǎng)模型。采用CCK-8法檢測細(xì)胞活力,用Annexin-V/PI試劑盒檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期,流式細(xì)胞術(shù)和蛋白印跡法分別檢測白血病膜表面CXCR4蛋白及總CXCR4蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1.與HUCMSC共培養(yǎng)后HL-60細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞增殖活力降低,凋亡減少,二者G0/G1期細(xì)胞增多;2.加入G-CSF和AMD3100可進(jìn)一步降低與HUCMSC共培養(yǎng)體系中HL-60、Jurkat的細(xì)胞活力,干擾HUCMSC對HL-60、Jurkat的凋亡抑制作用,使兩種細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞比例減少,且兩藥聯(lián)合作用時(shí)更明顯;3.G-CSF可同時(shí)降低HL-60、Jurkat細(xì)胞膜表面CXCR4及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)總... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)a：HUCMSC細(xì)胞（×100）；b：Jurkat細(xì)胞與HUCMSC共培

圖 3.2 不同組細(xì)胞經(jīng) AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）或聯(lián)合加藥作用 48h 后測得細(xì)胞活力分析 c：HL-60 細(xì)胞；d：Jurkat 細(xì)胞.3.3 細(xì)胞凋亡分析單獨(dú)培養(yǎng)組與 HUCMSC 共培養(yǎng)組細(xì)胞經(jīng) AMD3100（5μg/ml）、G-CS

圖 3.4 不同組細(xì)胞經(jīng) AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）或聯(lián)合加藥作用 48h 后測得的細(xì)胞凋亡率分析 e：HL-60 細(xì)胞；f：Jurkat 細(xì)胞.3.4 細(xì)胞周期分析單獨(dú)培養(yǎng)組與 HUCMSC 共培養(yǎng)組細(xì)胞經(jīng) AMD3100（5μg/ml）、G-CSF（50ng/ml）單藥或聯(lián)合處理 48h 后檢測其細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)，共培養(yǎng)組 HUCMSC 可明顯阻滯細(xì)胞周期，使 HL-60、Jurkat 細(xì)胞 G0/G1 期細(xì)胞增多，其中 HL-60 由（53.73±4.30）% 提高至（55.82±2.20）%，Jurkat 由（62.25±1.07）% 提高至（74.51±4.69）%（P＜0.05）。單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)，兩種藥物對 HL-60、Jurkat 細(xì)胞的細(xì)胞周期均無影響（P＞0.05)。共培養(yǎng)模型中，經(jīng) AMD3100（5ug/ml）、G-CSF（50ng/ml）單藥或聯(lián)合處理后，HL-60及 Jurkat 細(xì)胞 G0/G1 期細(xì)胞比例均較共培養(yǎng)對照組降低，其中 HL-60 各組分別是（49.70±3.55）%，（48.75±4.34）%，和（48.51±1.78）% ; Jurkat 各組分別是（57.04±1.70）%，（55.28±3.73）% 和（53.65±2.15）%（P＜0.05），其中共培養(yǎng)的 Jurkat 細(xì)胞系 G0/G1 期細(xì)胞比例降低較 HL-60 更明顯(表 3.3，圖 3.5，圖 3.6）。表明與 HUCMSC 共培養(yǎng)模型中，HUCMSC 可增加 HL-60、Jurkat 細(xì)胞 G0/G1 期細(xì)


本文編號：2946635