背景:食管癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,食管癌在我國發(fā)病率有明顯的地區(qū)差異,其發(fā)病率及死亡率均居高不下。食管癌在我國以鱗狀細(xì)胞癌常見,其具體發(fā)病原因及機(jī)制仍然不得而知。腫瘤微環(huán)境在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著不可或缺的作用,而腫瘤壞死因子α（TNF-α）是腫瘤微環(huán)境中一個重要的炎癥因子,其可促進(jìn)乳腺癌,結(jié)腸癌,膀胱癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展。TNF-α在食管鱗癌微環(huán)境中對食管鱗癌的具體作用的研究還未見報道,因此,我們對TNF-α下游基因腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2基因（TNFAIP2）在食管鱗癌中的表達(dá)情況進(jìn)行檢測、研究。可望為食管癌基因治療方面提供可選的靶點(diǎn),為食管癌的臨床治療提供理論基礎(chǔ)與新的治療方式。方法:1.采用qRT-PCR及免疫組化技術(shù)分別檢測癌及癌旁組織中TNFAIP2在基因和蛋白層面的表達(dá)水平。2.采用qRT-PCR篩選高表達(dá)靶基因的食管鱗癌細(xì)胞株,選擇兩株高表達(dá)靶基因的細(xì)胞株,通過上海吉凱基因科技有限公司在選定的兩株細(xì)胞株中構(gòu)建低表達(dá)靶基因的sh RNA慢病毒載體。實(shí)驗(yàn)分組慢病毒介導(dǎo)RNA干擾組（LV-RNAi）,空載體組（LV-CON）。3.采用qRT-PCR和Western blot... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
1 TNFAIP2在食管鱗癌及癌旁組織中的表達(dá)
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2 TNFAIP2基因及蛋白在食管鱗癌細(xì)胞株中的表達(dá)水平檢測及高表達(dá)靶基因及蛋白細(xì)胞株的篩選
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 Western blot 檢測 TNFAIP2 蛋白在 5 株細(xì)胞株中表達(dá)水平
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 細(xì)胞株轉(zhuǎn)染及慢病毒介導(dǎo)的TNFAIP2低表達(dá)的食管鱗癌細(xì)胞株穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 檢測慢病毒介導(dǎo)的TNFAIP2 RNA干擾后Wnt/ β-catenin信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5 TNFAIP2對Eca109，Kyse150遷移、侵襲、增殖與周期的影響
    5.1 慢病毒介導(dǎo)TNFAIP2 RNA干擾對周期的影響
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.2 慢病毒介導(dǎo)TNFAIP2 RNA干擾對增殖的影響
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.3 慢病毒介導(dǎo)TNFAIP2 RNA干擾對遷移，侵襲的影響
        5.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
全文討論與總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述：晚期食管癌姑息治療現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文



本文編號：2934676