目的:肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是全球第五大癌癥且嚴重威脅我國人民的生命健康,肝癌的異質(zhì)性及一小撮“干細胞”的存在導致其容易術后復發(fā)轉(zhuǎn)移率。新近研究表明腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment,TME）可能參與腫瘤干細胞（cancer stem cell）的誘導與維持。腫瘤微環(huán)境重要組分腫瘤相關成纖維細胞（cancer-associated fibroblasts,CAFs）能誘導腫瘤細胞的“干性”,而Notch信號通路常介導腫瘤微環(huán)境與腫瘤細胞間的相互作用,我們的前期研究表明Notch信號通路能夠維持CD90+肝癌干細胞的“干性”并且CAFs能夠激活肝癌細胞的Notch信號通路。在肝癌中CAFs是否參與其“干性”的誘導和維持?Notch信號通路在CAFs誘導肝癌細胞“干性”中的作用如何?其確切的分子機制如何?本研究旨在深入闡明CAFs激活Notch信號通路誘導肝癌細胞“干性”的關鍵分子位點,可從腫瘤微環(huán)境與腫瘤干細胞這一角度為肝癌的轉(zhuǎn)移復發(fā)提供新的靶向治療策略并完善肝癌的復發(fā)轉(zhuǎn)移機制。方法:我們首先從新鮮肝癌標本中提取并鑒定C... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

CAFs相關蛋白的檢測：（A）CAFs與NFs下顯微鏡下的形態(tài)；(B)westernblot顯示：與NF相比，CAFs高表達α-SMA、FAP及Vimentin等相關蛋白；(C)免疫熒光顯示：與NF相比，CAFs高表達α-SMA及Vimentin等相關蛋白

華 中 科 技 大 學 博 士 學 位 論 文我更新及克隆形成能力是腫瘤干細胞的生物學特性之一，為了檢測 C自我更新及克隆形成能力的影響，我們建立了肝癌細胞與 CAFs 的共培別將 HLE 或 MHCC-97H 細胞與 CAFs 共培養(yǎng)，將共培養(yǎng)后的97H 細胞種入六孔細胞培養(yǎng)板中，以沒有經(jīng)過共培養(yǎng)的 HLE 或 MHC照組。制作 CAFs 條件培養(yǎng)基（CAFs-CM），將 CAFs-CM 加入到特中檢測 HLE 和 MHCC-97H 細胞共培養(yǎng)前后成球能力的變化。結果顯C-97H 細胞經(jīng)過共培養(yǎng)后能形成更多更大的細胞球（圖 2A），CAFs MHCC-97H 細胞在六孔細胞培養(yǎng)板中的克隆形成能力（圖 2 B）。增強腫瘤肝癌細胞的自我更新及克隆形成能力

華 中 科 技 大 學 博 士 學 位 論 文.3 CAFs 可增強肝癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力與普通腫瘤細胞相比，腫瘤干細胞具有更強的侵襲轉(zhuǎn)移能力，為了檢測 CAF癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響，我們建立了肝癌細胞與 CAFs 的共培養(yǎng)體系。我們將 HLE 或 MHCC-97H 細胞與 CAFs 共培養(yǎng)，將共培養(yǎng)后的 HLE 或 MHCC-97H種入 8μm 孔徑的 Transwell 小室的上層，檢測同一時間點中共培養(yǎng)后的 HLEHCC-97H 細胞與沒有經(jīng)過共培養(yǎng)的 HLE 和 MHCC-97H 細胞遷移或侵襲到小室下細胞數(shù)目。結果顯示：CAFs 能明顯增強 HLE 和 MHCC-97H 細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移（圖 3）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Genetic association of interleukin-6 polymorphism （-174 G/C） with chronic liver diseases and hepatocellular carcinoma[J]. Lydia Giannitrapani,Maurizio Soresi,Daniele Balasus,Anna Licata,Giuseppe Montalto.  World Journal of Gastroenterology. 2013(16)



本文編號：2925662