目的：探索人胰腺癌細(xì)胞來(lái)源的exosome及exosome裂解超濾液對(duì)DC/CTL混合細(xì)胞抗腫瘤活性的影響及機(jī)制。方法：采用超速離心法提取SW1990細(xì)胞（人胰腺癌細(xì)胞系）釋放的exosome,低滲法裂解exosome,超濾法去除exosome來(lái)源的微小RNA并提純exosome裂解超濾液。將exosome及其裂解超濾液分別負(fù)載到人外周血來(lái)源的未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞（imDC）上并與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）共培養(yǎng),7天后Elisa法檢測(cè)各組培養(yǎng)液上清液中TNF-a和穿孔素蛋白的濃度,CCK-8法檢測(cè)DC/CTL昆合細(xì)胞對(duì)SW1990細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果：E-DC/CTL組（exosome致敏組）、DC/CTL組（未致敏組）、EL-DC/CTL組（exosome裂解超濾液致敏組）平均TNF-a濃度分別為129.54、189.72、207.13pg/ml;穿孔素蛋白平均濃度分別為2.68、3.71、3.92ng/ml, E-DC/CTL組低于DC/CTL組（P<0.05）,EL-DC/CTL組與DC/CTL組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。三組對(duì)SW1990的體外實(shí)驗(yàn)殺傷率分別為3... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

exosome電鏡照片

呈球形，少量懸浮。5d后細(xì)胞表面的毛刺進(jìn)一步增多，7d后細(xì)胞表面粗鏈，有不規(guī)則毛刺狀突起，可見(jiàn)毛刺樣樹(shù)突，為典型的DC形態(tài)（圖3.3 )。DC用exosome以及exosome裂解超濾液刺激后在形態(tài)上無(wú)顯著差異（圖3.4、圖3.5、圖3.6 )。.?‘… 著無(wú)IM▲義、- :? ;■、』▲圖3.3:未成熟DC 圖3.4: exosome刺激的DC9

有不規(guī)則毛刺狀突起，可見(jiàn)毛刺樣樹(shù)突，為典型的DC形態(tài)（圖3.3 )。DC用exosome以及exosome裂解超濾液刺激后在形態(tài)上無(wú)顯著差異（圖3.4、圖3.5、圖3.6 )。.?‘… 著無(wú)IM▲義、- :? ;■、』▲圖3.3:未成熟DC 圖3.4: exosome刺激的DC9

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Antitumor activities of human autologous cytokineinduced killer(CIK)cells against hepatocellular carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Fu-Sheng Wang Ming-Xu Liu Bing Zhang Ming Shi Zhou-Yun Lei Wen-Bing Sun Qing-You Du Ju-Mei Chen,Division of Biological Engineering,Beijing Institute of Infectious Diseases,Beijing 100039,China Wen-Bing Sun,Department of Surgery,Beijing Hospital of Infectious Diseases,Beijing 100039,China.  World Journal of Gastroenterology. 2002(03)



本文編號(hào)：2903199