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產(chǎn)丁酸菌通過重塑腸道菌群抑制Wnt通路防治高脂飲食誘導(dǎo)的腸腺瘤惡變

發(fā)布時間:2020-12-03 04:50
  目的結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)的發(fā)生受機(jī)體遺傳因素和環(huán)境因素的雙重影響,大部分腸癌患者存在抑癌基因Apc基因的突變,進(jìn)而導(dǎo)致Wnt通路異;罨Dc道菌群可通過多種途徑影響腸癌的進(jìn)展,臨床研究表明腸癌患者產(chǎn)丁酸菌豐度以及短鏈脂肪酸(Short chain fatty acid,SCFA)水平均比健康人群明顯降低。其中,糞便丁酸水平的降低不僅可作為腸癌風(fēng)險的預(yù)測指標(biāo),而且可以反映腸癌進(jìn)展程度以及嚴(yán)重度。丁酸具有組蛋白去乙酰化酶抑制作用,可穩(wěn)定腫瘤相關(guān)miRNA簇,維持靶基因轉(zhuǎn)錄后表達(dá)水平。飲食因素對維持腸道菌群穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要,研究表明攝入高脂飲食人群結(jié)腸乳桿菌目豐度降低,梭菌亞群XIVa豐度增加。本研究旨在探索產(chǎn)丁酸菌是如何調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào),進(jìn)而抑制高脂飲食誘導(dǎo)的腸癌發(fā)生的現(xiàn)象及機(jī)制。方法動物實(shí)驗(yàn)方法:30只可自發(fā)形成腸道腺瘤的4周齡Apcmin/+小鼠分別給予產(chǎn)丁酸菌活菌+高脂飲食、PBS+高脂飲食及PBS+普通飲食不同處理。實(shí)驗(yàn)第12周時分別收集每只小鼠的新鮮糞便,收集糞便后處死小鼠,分離肝脾、小腸及結(jié)腸。將遠(yuǎn)段小腸和結(jié)腸部分行石蠟包埋,... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

產(chǎn)丁酸菌通過重塑腸道菌群抑制Wnt通路防治高脂飲食誘導(dǎo)的腸腺瘤惡變


動物實(shí)驗(yàn)流程圖經(jīng)鑒定的4周齡雌性Apcmin/+小鼠隨機(jī)分為3組:組1給予高脂飲食+0.2×109CFU/0.2ml,每周3次;組2高脂飲食+0.2mlPBS每周3次;組3普通飲食+0.2

原理圖,測序,原理圖,文庫


醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 對象和補(bǔ) ddH2O 至總體系 20 μlPCR 產(chǎn)物鑒定:采用 2%瓊脂糖凝膠電泳檢測 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物,操作同)-(11)。)PCR 產(chǎn)物回收:采用 AxyPrepDNA 凝膠回收試劑盒(AXYGEN 公司回收 PCR 產(chǎn)物,采用 Thermo NanoDrop 2000 紫外微量分光光度計和凝膠電泳對回收的 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行文庫質(zhì)檢。 PCR 產(chǎn)物定量、均一化及測序)采用 Qubit 進(jìn)行文庫熒光定量,根據(jù)各樣品的測序要求進(jìn)行相應(yīng)比例之均一化。)采用 Illumina HiSeq PE250 平臺測序,得到 2×250bp Paired-End 數(shù)據(jù)andaseq 軟件根據(jù)重疊關(guān)系對 Paired End Reads 進(jìn)行拼接,得到高變ds。對長 Reads 進(jìn)行 16S 分析,測序原理見圖 1.2。

小鼠,基因型,列和,基因突變


士學(xué)位論文 結(jié)果抑制 Apcmin/+小鼠腸腺瘤生長及惡變的鑒定結(jié)果(乙基亞硝基脲)處理后的雄性 C57BL/6J 小鼠與雌出可自發(fā)形成腸道腺瘤的子代小鼠。該種子代小鼠第 850 號密碼子發(fā)生突變,編碼亮氨酸的密碼子 T因此被稱為 Apcmin/+小鼠。本項(xiàng)研究采用的小鼠經(jīng) bp 兩種條帶,基因型為 Apcmin/+,為 Apcmin/+小鼠(種條帶,則說明小鼠無 Apc 基因突變,基因型為 A


本文編號:2896021

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