目的白細(xì)胞介素-9(IL-9)是機(jī)體重要的免疫因子,參與不同腫瘤的發(fā)生發(fā)展,而其在胰腺癌的生物學(xué)效應(yīng)尚未清楚,本研究旨在初步探索IL-9對(duì)人胰腺癌裸鼠移植瘤的作用及其機(jī)制。方法應(yīng)用人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1建立裸鼠皮下移植瘤模型。接種一周左右,移植瘤長(zhǎng)至約50-100mm~3,應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法將64只裸鼠均分成4組(16只/組),對(duì)照組予瘤內(nèi)注射生理鹽水0.1 mL,低劑量組、中劑量組和高劑量組分別予瘤內(nèi)注射90 ng、180 ng、360 ng IL-9,各組均隔天干預(yù)1次,共注射8次。末次用藥3日后,各組隨機(jī)處死8只裸鼠,取各組移植瘤組織并測(cè)量重量。采用RT-PCR法檢測(cè)IL-9R、JAK1、JAK3和STAT3mRNA表達(dá)。采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)瘤組織中STAT3、pSTAT3、Cyclin D1和Bcl-2蛋白的表達(dá)。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)瘤組織中STAT3、pSTAT3的表達(dá)。其余小鼠用于觀察生存時(shí)間。結(jié)果低劑量組、中劑量組和高劑量組移植瘤的平均重量分別為(216.01±37.15)mg、(261.63±39.85)mg和(323.12±46.71)mg,明顯高于對(duì)照組移植瘤的重量(196.75±25.32)mg,中、高劑量組與對(duì)照組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對(duì)照組相比,IL-9干預(yù)后裸鼠的生存期縮短,高劑量組的平均生存時(shí)間顯著降低(P0.05)。RT-PCR法顯示各組移植瘤IL-9R、JAK1、JAK3和STAT3 mRNA表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各組蛋白質(zhì)印跡法和免疫組化染色法檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,IL-9干預(yù)后瘤組織內(nèi)STAT3表達(dá)水平未見明顯改變,而中、高劑量組pSTAT3表達(dá)水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果還表明,在不同劑量IL-9干預(yù)后的瘤組織中,與對(duì)照組相比Bcl-2表達(dá)無(wú)明顯變化(P0.05),Cyclin D1表達(dá)升高,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論IL-9能明顯促進(jìn)人胰腺癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng),同時(shí)降低裸鼠的生存時(shí)間,該作用可能是通過(guò)激活STAT3磷酸化實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R735.9
【部分圖文】：

圖 1 IL-9 促進(jìn)人胰腺癌移植瘤的生長(zhǎng)注: control.對(duì)照組；IL-9(90ng).低劑量組；IL-9(180ng).中劑量組；IL-9(360ng).高劑量組；A. 各組人胰腺癌移植瘤生長(zhǎng)曲線：與對(duì)照組相比，低、中、高劑量 IL-9 干預(yù)后促進(jìn)移植瘤生長(zhǎng)（P<0.05）；B. 各組人胰腺癌移植瘤的重量：中、高劑量組移植瘤平均重量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。*P < 0.05 ，與對(duì)照組比較。Fig.1 IL-9 promotes the growth of human pancreatic cancer xenografts.Note：control；IL-9(90ng)；IL-9(180ng)；IL-9(360ng).A. Xenografts in group of IL-9 interventionaccelerate growth growth compared with control . B.The weight of tumor in the moderate-dose andhigh-dose group was the most obvious higher as compared to the control group (P<0.05).2. IL-9 干預(yù)對(duì)移植瘤 IL-9R、JAK1、JAK3、STAT3 mRNA 表達(dá)的影響為了研究 IL-9/IL-9R/STAT3 通路是否是 IL-9 對(duì)人胰腺癌移植瘤作用的潛在機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)采用 RT-PCR 法分別對(duì)各組移植瘤中 IL-9R、JAK1、JAK3、

圖 2 各組移植瘤 IL-9R、JAK1、JAK3 和 STAT3 mRNA 表達(dá)注: control.對(duì)照組；IL-9(90ng).低劑量組；IL-9(180ng).中劑量組；IL-9(360ng).高劑量組； A. IL-9RmRNA 水平 B. JAK1 mRNA 水平 C. JAK1 mRNA 水平 D. JAK3 mRNA 水平 ；不同劑量 IL-9 干預(yù)后各組移植瘤中 IL-9R、JAK1、JAK3、STAT3 mRNA 水平無(wú)明顯改變（P > 0.05）。Fig.2 The relative expression of IL-9R,JAK1,JAK3 and STAT3 mRNANote：There was no significant difference in expression of IL-9R,JAK1,JAK3 and STAT3 mRNA ingroups(P>0.05).3. IL-9 干預(yù)對(duì)移植瘤 STAT3、pSTAT3 蛋白表達(dá)的影響Western blot結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，應(yīng)用不同劑量IL-9干預(yù)后STAT3蛋白表達(dá)無(wú)明顯改變（P>0.05），而 pSTAT3 蛋白表達(dá)升高（P<0.05），以中、高劑量組較為顯著，且組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。圖 3

圖 3 Western blot 法檢測(cè) STAT3 和 pSTAT3 在各組人胰腺癌移植瘤中的表達(dá)注：A:對(duì)照組；B:低劑量組；C:中劑量組；D:高劑量組；不同劑量 IL-9 干預(yù)后各組移植瘤中 STAT3蛋白水平無(wú)明顯改變 （P > 0.05），中、高劑量組移植瘤 pSTAT3 蛋白水平顯著升高（P < 0.05）Fig.3 STAT3 and pSTAT3 protein levels in xenograft tumors treated with saline and different dose of IL-9.Note：A:control；B:IL-9(90ng)；C:IL-9(180ng)；D:IL-9(360ng). The expression of STAT3 in all IL-9-treatedgroups have no significant difference compared with the control group(P>0.05). The expression of pSTAT3in the moderate-dose and high-dose group was significantly higher than the control group (P<0.05).4. 人胰腺癌移植瘤病理學(xué)形態(tài)及免疫組化染色分析HE 染色結(jié)果，如圖 4 所示，瘤細(xì)胞豐富、大小、形態(tài)多不一致，核大深染、核胞質(zhì)比大，呈結(jié)節(jié)狀或束狀或編織狀排列，未見明顯出血和壞死
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Reinhild Holmer;Freya A Goumas;Georg H Waetzig;Stefan Rose-John;Holger Kalthoff;;Interleukin-6: a villain in the drama of pancreatic cancer development and progression[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年04期

本文編號(hào)：2885739