目的:探討巖黃連提取物(巖黃連總堿)對人肺癌A549細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤及骨轉(zhuǎn)移抑制的影響。方法:(一)建立裸鼠右前肢的肺癌移植瘤動物模型及實(shí)驗(yàn)分組,每組6只:陰性對照組(NS 0.2ml/d,灌胃)、巖黃連提取物低劑量組(CSBTA 100mg/kg/d,灌胃)、巖黃連提取物高劑量組(CSBTA300mg/kg/d,灌胃)、順鉑組(2mg/kg,隔1d,腹腔注射)。測量小鼠右前肢瘤體體積,繪制相應(yīng)生長曲線,21天后處死小鼠稱量瘤重,計(jì)算抑制率;TUNEL檢測凋亡情況;Western-blot檢測瘤組織中增殖、凋亡相關(guān)蛋白Survivin的表達(dá)。(二)左心室注射法建立裸鼠肺腺癌溶骨性骨轉(zhuǎn)移癌模型及分組,每組10只:巖黃連治療組(CSBTA 300mg/kg/d,灌胃)、順鉑組(2mg/kg,隔1d,腹腔注射)、NS組(0.2ml/d,灌胃)。40d時行X射線檢查。52d處死小鼠,ELISA檢測血清骨特異性堿性磷酸酶。結(jié)果:(一)陰性對照組、巖黃連提取物低劑量組、巖黃連提取物高劑量組、順鉑組移植瘤體積分別為:(1896±130)mm3、(1467±111)mm3、(1145±113)mm3、(708±62)mm3,與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);巖黃連組和順鉑組瘤重低于陰性對照組(P0.05),抑瘤率分別為18.35%、29.43%、49.16%;TUNEL檢測巖黃連組和順鉑組的凋亡細(xì)胞多于陰性對照組,Western-blot結(jié)果顯示巖黃連提取物組與順鉑組較陰性對照組Survivin蛋白表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(二)巖黃連提取物和順鉑可以減少骨轉(zhuǎn)移,減緩骨質(zhì)破壞,降低血清骨特異性堿性磷酸酶(BALP)。血清BALP含量結(jié)果:未造模正常裸鼠(1.092±0.214)mg/mL;NS組(3.255±1.050)mg/mL;巖黃連提取物組(1.963±0.639)mg/mL;順鉑組(1.385±0.504)mg/mL,用藥組與NS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:巖黃連提取物(巖黃連總堿)抑制裸鼠A549細(xì)胞移植瘤的生長,可能是通過下調(diào)Survivin而抑制瘤體生長;巖黃連提取物(巖黃連總堿)可減輕骨轉(zhuǎn)移骨質(zhì)破壞的程度。
【學(xué)位單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R734.2
【部分圖文】：

2 結(jié)果2.1 巖黃連提取物 HPLC 含量測定巖黃連堿（脫氫卡維�。⿲φ掌啡芤褐苽洌悍Q取適量巖黃連堿對照品，加流動相，稱取對照品 5mg，置于 50ml 量瓶中溶解并稀釋至刻度，配制成 100μg/ml。供試品溶液制備：取巖黃連提取物 2g，精密稱定，置于 50ml 容量瓶，加甲醇至刻度，超聲 30min，用甲醇補(bǔ)足損失，搖勻，取上清液，用 0.45μm 濾膜過濾，取續(xù)濾液即得供試品溶液。

物平均峰面積為 60024.5。根據(jù) C對/C供=A對/A供可得巖黃連提取物中巖黃連堿（脫氫卡維丁）的含量為 3.93%。2.2 皮下移植瘤模型2.2.1 成瘤情況及裸鼠一般狀況皮下注射 A549 細(xì)胞懸液，裸鼠全部成活，1-2 天皮下懸液完全吸收，7-10 天可見瘤體出現(xiàn)，巖黃連高劑量組和順鉑組出現(xiàn)瘤結(jié)節(jié)稍晚，成瘤率 100%。裸鼠在接種后及用藥過程中精神、活動、飲食等行為未出現(xiàn)明顯不適。藥物干預(yù)結(jié)束，處死前各組裸鼠體重為：陰性對照組（22.28±1.38）g；巖黃連提取物低劑量組（22.82±1.02）g；巖黃連提取物高劑量組（22.17±1.84）g；順鉑組（21.78±1.13）g；各組間統(tǒng)計(jì)學(xué)比較 P>0.05，體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.2.2 瘤體體積

22圖 6 在藥物干預(yù)期間，各組裸鼠體重曲線圖各組裸鼠體重在早期均有一個升高的趨勢，后期因腫瘤轉(zhuǎn)移，裸鼠平均體重均降低，主要是兩個方面的原因：1.腫瘤骨轉(zhuǎn)移引起裸鼠行動障礙，進(jìn)食飲水困難；2.同時又有腫瘤多發(fā)轉(zhuǎn)移惡病質(zhì)表現(xiàn)，故出現(xiàn)體重下降。動物體重作為生存質(zhì)量的一個重要指標(biāo)，可以反映生物體的生存狀態(tài)。第 52d，各組裸小鼠死亡情況，均以距造模當(dāng)日的天數(shù)統(tǒng)計(jì)：NS 組（第 26d 死亡一只，第 32d 死亡兩只，第 42d 死亡
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2853450