【摘要】：目的:探討circEPSTI1在胃癌組織和細胞中的表達及功能,并分析其在胃癌中的臨床意義。方法:采用qRT-PCR法檢測circEPSTI1在胃癌組織與非癌胃粘膜組織以及不同胃癌細胞與正常胃上皮細胞中的表達,并分析circEPSTI1在胃癌組織的表達與胃癌患者不同病理參數(shù)之間的相關性;轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1敲低胃癌SGC-7901與MGC-803細胞中circEPSTI1的表達;分別采用MTT實驗、細胞劃痕實驗、Transwell實驗以及AnnexinV-FITC和PI染色法檢測si-circEPSTI1對胃癌SGC-7901與MGC-803細胞生物學行為的影響。結(jié)果:qRT-PCR檢測結(jié)果顯示,circEPSTI1在胃癌組織中的表達明顯高于非癌胃粘膜組織(P0.01);相關性分析顯示,circEPSTI1與胃癌患者的組織學分級、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關;circEPSTI1在胃癌MGC-803、SGC-7901及AGS細胞中的表達均高于GES-1細胞(P0.01);MTT檢測顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細胞增殖(P0.05);劃痕實驗結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細胞遷移(P0.05);Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細胞侵襲(P0.01);AnnexinV-FITC和PI染色法結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可誘導胃癌SGC-7901細胞與MGC-803發(fā)生凋亡(P0.01)。結(jié)論:1.circEPSTI1在胃癌組織中表達上調(diào),其表達與胃癌分級、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關。2.si-circEPSTI1導入SGC-7901及MGC-803細胞引起細胞凋亡增加、增殖減少及遷移侵襲能力降低。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.2
【圖文】：

圖 4 劃痕實驗檢測 si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞遷移能力的影響。A：轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 與 MGC-803 細胞 0h、48 h 傷口寬度的顯微設攝像照片（×200）；B：轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 與 MGC-803細胞傷口愈合寬度的統(tǒng)計分析，與對照組比較，* P<0.05。3.6 Si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞侵襲的影響將 si-circEPSTI1 轉(zhuǎn)入胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞中作為觀察組，轉(zhuǎn)染si-scramble 用于陰性對照。Transwell 結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 組 36 h 后胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞穿過基質(zhì)膠的細胞數(shù)量明顯低于各自對照組，（P<0.01，表 4，圖 5）。表明 si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞侵襲能力有明顯抑制作用。表 4 si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞侵襲的影響si-scramble si-circEPSTI1

圖5 Transwell侵襲實驗檢測si-circEPSTI1對SGC-7901與MGC-803細胞侵襲能力的影響。A：穿過基底膜的SGC-7901與MGC-803細胞顯微照片（×200）；B：轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細胞穿出數(shù)量統(tǒng)計分析，與對照組比，**P<0.01。3.7 Si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞凋亡的影響將 si-circEPSTI1 轉(zhuǎn)入胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞中作為觀察組，轉(zhuǎn)染si-scramble 用于陰性對照。凋亡實驗結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后引起SGC-7901 與 MGC-803 細胞發(fā)生凋亡的細胞率明顯高于各自對照組，（P<0.01，表 5，圖 6）。表明 si-circEPSTI1 能誘導胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞發(fā)生凋亡。表 5 si-circEPSTI1 對胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細胞凋亡的影響si-scramble si-circEPSTI1

15圖6 凋亡實驗檢測si-circEPSTI1對SGC-7901與MGC-803細胞凋亡的影響。A：轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細胞的凋亡分析圖；B：轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細胞的凋亡率統(tǒng)計分析，與對照組比較，** P<0.01。

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本文編號：2803960