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circEPSTI1在胃癌中的表達(dá)及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2020-08-25 17:06
【摘要】:目的:探討circEPSTI1在胃癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及功能,并分析其在胃癌中的臨床意義。方法:采用qRT-PCR法檢測(cè)circEPSTI1在胃癌組織與非癌胃粘膜組織以及不同胃癌細(xì)胞與正常胃上皮細(xì)胞中的表達(dá),并分析circEPSTI1在胃癌組織的表達(dá)與胃癌患者不同病理參數(shù)之間的相關(guān)性;轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1敲低胃癌SGC-7901與MGC-803細(xì)胞中circEPSTI1的表達(dá);分別采用MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)以及AnnexinV-FITC和PI染色法檢測(cè)si-circEPSTI1對(duì)胃癌SGC-7901與MGC-803細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。結(jié)果:qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,circEPSTI1在胃癌組織中的表達(dá)明顯高于非癌胃粘膜組織(P0.01);相關(guān)性分析顯示,circEPSTI1與胃癌患者的組織學(xué)分級(jí)、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān);circEPSTI1在胃癌MGC-803、SGC-7901及AGS細(xì)胞中的表達(dá)均高于GES-1細(xì)胞(P0.01);MTT檢測(cè)顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細(xì)胞增殖(P0.05);劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細(xì)胞遷移(P0.05);Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901與MGC-803細(xì)胞侵襲(P0.01);AnnexinV-FITC和PI染色法結(jié)果顯示,si-circEPSTI1可誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞與MGC-803發(fā)生凋亡(P0.01)。結(jié)論:1.circEPSTI1在胃癌組織中表達(dá)上調(diào),其表達(dá)與胃癌分級(jí)、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。2.si-circEPSTI1導(dǎo)入SGC-7901及MGC-803細(xì)胞引起細(xì)胞凋亡增加、增殖減少及遷移侵襲能力降低。
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R735.2
【圖文】:

照片,胃癌,劃痕實(shí)驗(yàn),遷移能力


圖 4 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞遷移能力的影響。A:轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞 0h、48 h 傷口寬度的顯微設(shè)攝像照片(×200);B:轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 與 MGC-803細(xì)胞傷口愈合寬度的統(tǒng)計(jì)分析,與對(duì)照組比較,* P<0.05。3.6 Si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞侵襲的影響將 si-circEPSTI1 轉(zhuǎn)入胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞中作為觀察組,轉(zhuǎn)染si-scramble 用于陰性對(duì)照。Transwell 結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 組 36 h 后胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)量明顯低于各自對(duì)照組,(P<0.01,表 4,圖 5)。表明 si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞侵襲能力有明顯抑制作用。表 4 si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞侵襲的影響si-scramble si-circEPSTI1

顯微照片,實(shí)驗(yàn)檢測(cè),胃癌,凋亡


圖5 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)si-circEPSTI1對(duì)SGC-7901與MGC-803細(xì)胞侵襲能力的影響。A:穿過(guò)基底膜的SGC-7901與MGC-803細(xì)胞顯微照片(×200);B:轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細(xì)胞穿出數(shù)量統(tǒng)計(jì)分析,與對(duì)照組比,**P<0.01。3.7 Si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞凋亡的影響將 si-circEPSTI1 轉(zhuǎn)入胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞中作為觀察組,轉(zhuǎn)染si-scramble 用于陰性對(duì)照。凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染 si-circEPSTI1 后引起SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞發(fā)生凋亡的細(xì)胞率明顯高于各自對(duì)照組,(P<0.01,表 5,圖 6)。表明 si-circEPSTI1 能誘導(dǎo)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞發(fā)生凋亡。表 5 si-circEPSTI1 對(duì)胃癌 SGC-7901 與 MGC-803 細(xì)胞凋亡的影響si-scramble si-circEPSTI1

分析圖,凋亡,實(shí)驗(yàn)檢測(cè),轉(zhuǎn)染


15圖6 凋亡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)si-circEPSTI1對(duì)SGC-7901與MGC-803細(xì)胞凋亡的影響。A:轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細(xì)胞的凋亡分析圖;B:轉(zhuǎn)染si-circEPSTI1后SGC-7901與MGC-803細(xì)胞的凋亡率統(tǒng)計(jì)分析,與對(duì)照組比較,** P<0.01。

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本文編號(hào):2803960

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