【摘要】：目的:異亮氨酰-tRNA合成酶2(isoleucyl-tRNA synthetase 2,IARS2)是1類氨�；�-tRNA合成酶,研究表明在白內(nèi)障、部分感音神經(jīng)性耳聾、生長(zhǎng)激素缺乏的矮小癥、周圍神經(jīng)病變和Leigh綜合征患者中均有發(fā)現(xiàn)IARS2突變。近期研究表明,IARS2在包括非小細(xì)胞肺癌和結(jié)腸癌在內(nèi)的惡性腫瘤中扮演著原癌基因的作用,但其在胃癌組織中的表達(dá)及其表達(dá)與胃癌患者的臨床病理特征及預(yù)后關(guān)系尚不清楚。研究報(bào)道肌球蛋白VB(myosin VB,MYO5B)在胃癌中低表達(dá),且分析數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)MYO5B可能是IARS2的下游作用蛋白,但兩者的關(guān)系尚無文獻(xiàn)報(bào)道。本研究通過檢測(cè)人胃癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中IARS2及MYO5B的表達(dá)水平,明確IARS2及MYO5B在胃癌中的表達(dá)情況,探討IARS2與胃癌臨床特征的相關(guān)性及IARS2在胃癌中發(fā)揮作用的可能機(jī)制,為研究IARS2與胃癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的研究提供理論基礎(chǔ)。方法:收集30對(duì)新鮮人胃癌組織及對(duì)應(yīng)的癌旁組織,采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative assay,qRT-PCR)及western blot技術(shù)檢測(cè)組織中IARS2及MYO5B的表達(dá)情況,進(jìn)一步使用線性回歸模型(linear regression model)分析兩者mRNA表達(dá)的相關(guān)性。同時(shí)使用免疫組化方法檢測(cè)86對(duì)胃癌組織及癌旁組織中IARS2蛋白的表達(dá)情況,根據(jù)免疫組化IARS2表達(dá)情況將胃癌患者分為IARS2陽(yáng)性組和陰性組,比較兩組患者臨床病理特征及預(yù)后情況。使用SPSS 17.0和GraphPad Prism 5處理數(shù)據(jù),采用χ~2檢驗(yàn)分析組間數(shù)據(jù);Kaplan-Meier繪制生存曲線,Log-Rank檢驗(yàn)進(jìn)行生存分析。p0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:胃癌組織及癌旁組織中IARS2及MYO5B均有表達(dá)。qRT-PCR的結(jié)果提示IARS2 mRNA在胃癌組織中的表達(dá)顯著高于其在癌旁組織的表達(dá)(P0.05),而MYO5B mRNA在胃癌組織中的表達(dá)顯著低于其在癌旁組織的表達(dá)(P0.05),進(jìn)一步使用線性回歸模型分析發(fā)現(xiàn)兩者mRNA表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=0.5768,P=0.0008)。western blot的結(jié)果提示IARS2蛋白在胃癌組織中的表達(dá)顯著高于其在癌旁組織的表達(dá)(P0.05),MYO5B蛋白在胃癌組織中的表達(dá)顯著低于其在癌旁組織的表達(dá)(P0.05)。免疫組化結(jié)果提示IARS2蛋白在胃癌中表達(dá)顯著高于其在癌旁組織中的表達(dá),且IARS2的表達(dá)水平與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.041)、TNM分期(P=0.005)及患者術(shù)后5年總生存率(P=0.0006)顯著相關(guān),與患者的年齡(P=0.330)、性別(P=0.265)、腫瘤大小(P=0.288)、浸潤(rùn)深度(P=0.064)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.534)無顯著相關(guān)性。結(jié)論:1、IARS2及MYO5B在胃癌組織及癌旁組織中差異表達(dá)。2、IARS2可能通過靶向作用于MYO5B而發(fā)揮原癌基因的作用。3、IARS2陽(yáng)性表達(dá)的胃癌患者腫瘤惡性程度高。4、IARS2陽(yáng)性表達(dá)的胃癌患者預(yù)后差。5、IARS2可成為胃癌患者的預(yù)后指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.2
【圖文】：

2 結(jié)果2.1 IARS2 在胃癌組織中高表達(dá)使用 qRT-PCR 技術(shù)，使用 GAPDH 做內(nèi)參，檢測(cè) 30 例胃癌組織和中 IASR2 mRNA 的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)較之癌旁組織，胃癌組織中 IASR表達(dá)（P＜0.05）（圖 1A）。使用 western-blot 技術(shù)，使用 β-actin 做內(nèi)30 例胃癌組織和癌旁組織中 IASR2 蛋白的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)較之癌旁組組織中 IASR2 蛋白高表達(dá)（P＜0.05）（圖 1B）。同時(shí)，通過免疫組測(cè) 86 對(duì)胃癌組織和癌旁組織中 IARS2 蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn) IARS2 陽(yáng)性癌組織中的陽(yáng)性例數(shù)為 61 例，陽(yáng)性率為 70.9%，在癌旁組織的陽(yáng)性例數(shù)陽(yáng)性率為 29.1%；較之癌旁組織，胃癌組織中 IARS2 表達(dá)陽(yáng)性率顯著1C）。以上結(jié)果提示，IARS2 在胃癌中高表達(dá)。

Figure 1 IARS2 is high expressed in gastric cancerNotes: A: The expression level of IARS2 mRNA in gastric and paracancer tissues were detectedby qRT-PCR （n=30); B: The expression level of IARS2 protein in gastric and paracancer tissueswere detected by western blot （n=30); C: The expression level of IARS2 protein in gastric andparacancer tissues were detected by immunohistochemical staining SP method （n=86); Results ofqRT-PCR is shown as the mean±SD; *** means P<0.0012.2 MYO5B 在胃癌組織中低表達(dá)使用 qRT-PCR 技術(shù)，使用 GAPDH 做內(nèi)參，檢測(cè) 30 對(duì)胃癌組織和癌旁組織中 MYO5B mRNA 的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)較之癌旁組織，胃癌組織中 MYO5B mRNA低表達(dá)（P＜0.05）（圖 2A）。使用 western-blot 技術(shù)，使用 β-actin 做內(nèi)參，檢測(cè) 30 例胃癌組織和癌旁組織中 MYO5B 蛋白的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)較之癌旁組織，胃癌組織中 MYO5B 蛋白低表達(dá)（P＜0.05）（圖 2B）。

學(xué)差異表示為**P<0.015B is low expressed in gastric cancerpression level of MYO5B mRNA and protein in gastric and paracanT-PCR （n=30); Results of qRT-PCR is shown as the mean±SD; **織中 IARS2 與 MYO5B 表達(dá)負(fù)相關(guān)光定量 RT-PCR 技術(shù)，檢測(cè)胃癌組織中 IARS2 與 MYO使用線性回歸模型分析 IARS2 和 MYO5B 間的關(guān)系。結(jié) IARS2 與 MYO5B mRNA 的表達(dá)水平負(fù)相關(guān)（r=-0.576

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本文編號(hào)：2776953