【摘要】：目的:探討卵巢癌結(jié)構(gòu)域蛋白酶-1(ovarian tumor domain-containing protease-1,OTUD1)基因?qū)θ私Y(jié)腸癌細(xì)胞HCT116增殖和侵襲的作用及機(jī)制。方法:選取低表達(dá)OTUD1的人結(jié)腸癌細(xì)胞株,利用慢病毒包裝技術(shù)過(guò)表達(dá)OTUD1基因,空載質(zhì)粒作對(duì)照,嘌呤霉素篩選后構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的結(jié)腸癌細(xì)胞株。RT-PCR(reverse transcription PCR)和Western blot技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)2組細(xì)胞遷移和侵襲能力的改變。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)2組細(xì)胞增殖能力的變化。克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)2組細(xì)胞的克隆形成能力。Western blot技術(shù)分析相關(guān)蛋白分子水平的變化,探討其可能的機(jī)制。結(jié)果:6株結(jié)腸癌細(xì)胞株中HCT116細(xì)胞的OTUD1蛋白表達(dá)水平最低,并成功構(gòu)建過(guò)表達(dá)OTUD1基因的結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT116-OTUD1。與對(duì)照組HCT116-Control細(xì)胞相比,HCT116-OTUD1細(xì)胞株遷移(P=0.000)和侵襲能力減弱(P=0.000),CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖水平下降(P=0.004),EDU流式檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞增殖水平下降(P=0.000),克隆形成能力下降(P=0.017)。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相關(guān)分子E-cadherin表達(dá)水平上調(diào),Vimentin表達(dá)水平下調(diào),增殖相關(guān)信號(hào)通路分子p-AKT、p-ERK1/2表達(dá)水平下調(diào)。結(jié)論:過(guò)表達(dá)OTUD1可以通過(guò)減弱細(xì)胞的EMT作用來(lái)影響其遷移和侵襲能力,并抑制細(xì)胞的增殖能力,這種變化可能與MAPK/Erk和PI3K/Akt信號(hào)通路的激活受到抑制有關(guān)。

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7 ;維生素D衍生物EB1089抑制結(jié)腸癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的裸鼠在體研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊(cè);1997年05期

8 燕敏,陳爾真,曹偉新,費(fèi)旭峰,陳雪華;丁酸對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株凋亡的影響[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2004年05期

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3 唐楠;CIAPIN1基因在結(jié)腸癌細(xì)胞株中的表達(dá)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年

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5 王麗麗;奧拉帕尼對(duì)ATM低表達(dá)結(jié)腸癌細(xì)胞株的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2017年

6 趙輝;上皮細(xì)胞特異性基因在結(jié)腸癌中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的研究[D];南昌大學(xué);2013年

7 李明洋;缺氧對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480生長(zhǎng)及HIF-1α表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

8 龍慧;TGF-β1對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株凋亡的影響及其機(jī)制初探[D];中南大學(xué);2009年

9 劉覃;HSP90抑制劑17-DMAG對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT116的作用研究[D];蘇州大學(xué);2010年

10 李林海;結(jié)腸癌淋巴管生成及轉(zhuǎn)移的臨床基礎(chǔ)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2747921