【摘要】：【研究目的】探討膠質(zhì)瘤相關(guān)癌基因同源蛋白1(Gli1)及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相關(guān)蛋白Snail、E-cadherin及N-cadherin在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表達(dá)及臨床意義,研究Hedgehoog信號(hào)通路調(diào)控非小細(xì)胞肺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,為非小細(xì)胞肺癌的診斷和治療提供新的靶點(diǎn)。【研究方法】1.采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)67例非小細(xì)胞肺癌組織及配對(duì)正常肺組織中Gli1、Snail、E-cadherin及N-cadherin蛋白的表達(dá)情況,分析其與患者臨床分期、病理類型、淋巴轉(zhuǎn)移和分化程度等臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。2.采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測(cè)定Gli1、Snail、E-cadherin及N-cadherin基因在20例非小細(xì)胞肺癌及其對(duì)應(yīng)癌旁正常肺組織中mRNA的表達(dá)情況。3.根據(jù)Gli1在NSCLC細(xì)胞系A(chǔ)549和H1299中的表達(dá)水平,將Gli1表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至NSCLC細(xì)胞系A(chǔ)549和H1299中,使Gli1低表達(dá)的A549外源性過表達(dá),Gli1高表達(dá)的H1299外源性降表達(dá),利用Western blot檢測(cè)Gli1的轉(zhuǎn)染效果。4.利用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Gli1轉(zhuǎn)染后A549和H1299細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力的變化情況,通過Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Gli1轉(zhuǎn)染后A549和H1299細(xì)胞侵襲能力的變化情況。5.利用Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Gli1轉(zhuǎn)染后A549和H1299細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白Snail、E-cadherin和N-cadherin的表達(dá)變化情況。【研究結(jié)果】1.Gli1、Snail、E-cadherin及N-cadherin在NSCLC組織中的陽性表達(dá)率分別為61.2%(41/67)、50.8%(34/67)、56.7%(38/67)、53.7%(36/67),在正常肺組織中的陽性表達(dá)率為14.9%(10/67)、8.9%(6/67)、98.5%(66/67)、5.9%(4/67),Gli1、Snail及N-cadherin在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)高于正常肺組織,E-cadherin在正常肺組織中的表達(dá)高于NSCLC,表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.患者癌組織中Gli1高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度和臨床分期密切相關(guān)(P0.05),與性別、年齡、腫物大小和病理分型無相關(guān)性;Gli1的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.325,P0.05),與Snail、N-cadherin的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.379、r=0.490,P0.05)。3.RT-PCR結(jié)果顯示,Gli1、Snail和N-cadherin在NSCLC中mRNA的表達(dá)量為(0.933±0.115vs0.656±0.014vs0.255±0.078),高于正常余肺組織(0.510±0.208 vs 0.086±0.362 vs 0.033±0.043,P0.05),E-cadherin在正常肺組織中mRNA的表達(dá)量為(0.811±0.180)高于癌組織(0.461±0.087)的表達(dá)量,(P0.05)。4.Gli1、Snail和N-cadherin高表達(dá)的患者表現(xiàn)出更差的預(yù)后和更低的生存率(P0.05),E-cadherin陰性組的患者較陽性組患者顯示出更差的預(yù)后和更低的生存率,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)),Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析結(jié)果顯示,E-cadherin陰性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、分化程度是影響NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。5.Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示經(jīng)慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染并藥篩得到穩(wěn)定的Gli1外源性降表達(dá)的H1299和Gli1外源性過表達(dá)的A549細(xì)胞。6.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Gli1降表達(dá)的H1299細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力顯著降低,而Gli1過表達(dá)的A549細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力明顯提高。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示Gli1降表達(dá)的H1299細(xì)胞侵襲能力顯著降低,而Gli1過表達(dá)的A549細(xì)胞侵襲能力明顯提高。7.Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Gli1降表達(dá)的H1299細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白Snail和N-cadherin表達(dá)降低,E-cadherin表達(dá)升高,而Gli1過表達(dá)的A549細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白Snail和N-cadherin表達(dá)升高,E-cadherin表達(dá)降低�！狙芯拷Y(jié)論】1.E-cadherin在正常肺組織中的表達(dá)高于非小細(xì)胞肺癌組織,Gli1、Snail和N-cadherin在NSCLC中的表達(dá)高于正常肺組織,且Gli1的表達(dá)與Snail、N-cadherin的表達(dá)呈正相關(guān),與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),表明非小細(xì)胞肺癌中EMT的發(fā)生與Hedgehog通路的異常激活有關(guān)。2.不同分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否和臨床分期間Gli1及E-cadherin表達(dá)強(qiáng)度有差異,分化程度和臨床分期越高,Gli1的表達(dá)則越高,E-cadherin的表達(dá)越低,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者Gli1的表達(dá)高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,E-cadherin的表達(dá)偏低。Snail、N-cadherin的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否和臨床分期有關(guān)。3.Gli1可促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的遷移和侵襲,Gli1可能是通過調(diào)節(jié)Snail的表達(dá)調(diào)節(jié)E-cadherin和N-cadherin的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)NSCLC細(xì)胞EMT的進(jìn)程。4.在非小細(xì)胞肺癌中,Hh信號(hào)通路的異�；罨cEMT的存在密切相關(guān),Gli1與EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)對(duì)判斷非小細(xì)胞肺癌患者的臨床特征及預(yù)后有一定提示作用。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R734.2
【圖文】：

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 一、Gli1 與 EMT 相關(guān)蛋白在 NSCLC 組織中的表達(dá)及臨床意義1.2 結(jié)果1.2.1 NSCLC 中肺腺癌及肺鱗癌分化程度的判讀腺癌和鱗癌是 NSCLC 中最常見的兩種組織類型,參照 2015 版 WHO 肺癌組織學(xué)分類的標(biāo)準(zhǔn)，本研究中對(duì)肺腺癌的分化程度的判讀標(biāo)準(zhǔn)為：組織類型以附壁樣腺癌為主的為高分化腺癌；組織類型腺泡狀和乳頭狀腺癌為主的為中分化腺癌；組織類型以實(shí)性腺癌和微乳頭腺癌為主的為低分化腺癌；對(duì)肺鱗癌的判讀標(biāo)準(zhǔn)為：高分化肺鱗癌癌巢中多有角化珠形；中分化肺鱗癌中有角化現(xiàn)象但是不形成角化珠；低分化肺鱗癌細(xì)胞異型性明顯，且無角化珠（圖 1.2.1）。

13A. Gli-1; B. Snail; C. E-cadherin; D. N-cadherin圖 1.2.2 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌中 Gli-1,Snail,E-cadherin 和N-cadherin 的表達(dá)（SP×400）1.2.3 Gli1 及 EMT 相關(guān)蛋白的表達(dá)與 NSCLC 患者臨床病理特征的關(guān)系67 例 NSCLC 組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中 Gli1 及E-cadherin 的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度和臨床分期密切相關(guān)（P<0.05），與性別、年齡、腫物大小和病理分型無相關(guān)性；Snail 及 N-cadherin 的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期相關(guān)（P<0.05），與性別、年齡、腫物大小、分化程度和病理分型無相關(guān)性（表 1.2.3）；Spearman 等級(jí)相關(guān)分析顯示 Gli1 的表達(dá)與 E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.325,P<0.05）,與 Snail、N-cadherin 的表達(dá)呈正相關(guān)（ r=0.379,r=0.490,P<0.05 ） ； Snail 與 E-cadherin 的 表 達(dá) 呈 負(fù) 相 關(guān)（r=-0.318,P<0.05）。

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7 Simon King 編譯 廖聯(lián)明;今年這些藥物聚焦全球目光[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2017年

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