【摘要】：研究目的1.篩選肝癌中低表達(dá),與代謝相關(guān)的miRNA:miR-142-3p;2.探討miR-142-3p在肝癌有氧糖酵解和增殖中的作用;3.探討miR-142-3p調(diào)控肝癌有氧糖酵解和增殖的分子機(jī)制。研究?jī)?nèi)容和方法1.篩選肝癌中低表達(dá),與代謝相關(guān)的miRNA。1)利用TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)以及GEO數(shù)據(jù)集GSE 22058,GSE 54751,GSE 21362和GSE 12717篩選在肝癌中低表達(dá)的miRNA。2)通過(guò)對(duì)交集的miRNA進(jìn)行通路以及功能分析,篩選與能量代謝相關(guān)的 miRNA2.miR-142-3p對(duì)肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖的影響。1)利用miR-142-3p的mimic轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞株SK-Hep-1和Huh-7來(lái)過(guò)表達(dá)miR-142-3p;2)過(guò)表達(dá)miR-142-3p后,檢測(cè)培養(yǎng)基中葡萄糖消耗和乳酸產(chǎn)生以觀察有氧糖酵解活性;3)過(guò)表達(dá)miR-142-3p后,EDU實(shí)驗(yàn)和CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力。3.miR-142-3p調(diào)控有氧糖酵解和增殖的分子機(jī)制。1)利用 RNA22(http://cbcsrv.watson.ibm.com/rna22.html)預(yù)測(cè) miR-142-3p的靶基因LDHA;2.)利用Western blot檢測(cè)miR-142-3p靶基因的蛋白水平。3)利用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)鑒定miR-142-3p直接作用于靶基因LDHA;4)通過(guò)Rescue實(shí)驗(yàn)證明miR-142-3p通過(guò)LDHA調(diào)控有氧糖酵解和增殖。結(jié)果1.miR-142-3p在肝癌中低表達(dá),與能量代謝有顯著相關(guān)性。1)通過(guò)生物信息學(xué)分析,在TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)以及GEO數(shù)據(jù)集GSE22058,GSE 54751,GSE 21362 和 GSE 12717 均下調(diào)的 miRNA 有:hsa-miR-424;hsa-miR-195;hsa-let-7c;hsa-miR-130a;hsa-miR-142-3p;hsa-miR-29c;hsa-miR-10a;hsa-miR-99a;hsa-miR-3 78。2)通過(guò)對(duì)每個(gè)miRNA靶基因的生物功能通路分析,只有miR-142-3p和miR-195與能量代謝顯著相關(guān)。2.miR-142-3p抑制肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖。1)與scramble相比,過(guò)表達(dá)miR-142-3p后肝癌細(xì)胞株SK-Hep-1和Huh-7糖酵解活性減弱。2)與scramble相比,過(guò)表達(dá)miR-142-3p后肝癌細(xì)胞增殖受到抑制。3.miR-142-3p直接靶向LDHA下調(diào)其表達(dá),進(jìn)而抑制了肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖。1)miR-142-3p可以下調(diào)LDHA的蛋白水平,雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)表明miR-142-3p可以直接靶向LDHA;2)過(guò)表達(dá)miR-142-3p的同時(shí)過(guò)表達(dá)LDHA,檢測(cè)肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖,可以起到rescue作用。結(jié)論miR-142-3p在肝癌組織中低表達(dá),并且與能量代謝有明顯相關(guān)性。過(guò)表達(dá)miR-142-3p可抑制肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖;機(jī)制上,miR-142-3p直接靶向LDHA下調(diào)其表達(dá),進(jìn)而抑制了肝癌細(xì)胞有氧糖酵解和增殖。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 羅雨虹;;T細(xì)胞的效應(yīng)功能受有氧糖酵解的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2013年03期

2 柴家科,刁力,盛志勇,郭振榮,賈曉明;膿毒癥大鼠骨骼肌有氧糖酵解過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)鈉離子濃度改變的關(guān)系[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1999年07期

3 ;我國(guó)學(xué)者提出骨骼肌“有氧糖酵解”新概念[J];生物學(xué)通報(bào);2003年04期

4 黃榮;汪泓;陳保華;樊明湖;;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子促進(jìn)有氧糖酵解與直腸癌細(xì)胞耐藥性的關(guān)系[J];中國(guó)普通外科雜志;2017年10期

5 欽可為;韓超峰;Cheng J;Quintin RA;Cramer KM;;有氧糖酵解是受訓(xùn)免疫的代謝基礎(chǔ)[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2015年02期

6 李影;劉紅寧;鄧曉霞;吳曉慧;林色奇;;惡性腫瘤有氧糖酵解關(guān)鍵酶研究進(jìn)展[J];江西中醫(yī)藥;2019年01期

7 紀(jì)錦和;影響中長(zhǎng)跑耐力的兩個(gè)因素—ILAT與有氧糖酵解[J];體育科技;1994年03期

8 何建清;佟秀琴;;丙酮酸脫氫酶激酶在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J];實(shí)用婦科內(nèi)分泌雜志(電子版);2018年01期

9 陳平;夏良平;張蓓;;癌細(xì)胞中葡萄糖代謝與轉(zhuǎn)運(yùn)特點(diǎn)[J];腫瘤學(xué)雜志;2014年03期

10 苗宇桐;;有氧糖酵解通過(guò)表觀遺傳機(jī)制促進(jìn)Th1細(xì)胞分化[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2017年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前8條

1 王勝男;;腫瘤微環(huán)境有氧糖酵解對(duì)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制研究[A];第十三屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)摘要匯編[C];2018年

2 劉佳;王立東;孫艷波;李恩民;許麗艷;張亞平;姚永剛;孔慶鵬;;腫瘤線粒體基因組突變模式及其發(fā)生機(jī)制研究[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編（2009-2013）[C];2013年

3 孫倩;陳欣欣;馬健會(huì);彭海勇;張宏冰;;mTOR通過(guò)上調(diào)PKM2促進(jìn)腫瘤細(xì)胞有氧糖酵解[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第十一屆張錫鈞基金全國(guó)青年優(yōu)秀生理學(xué)學(xué)術(shù)論文交流及評(píng)獎(jiǎng)會(huì)議綜合摘要[C];2011年

4 陳立蘭;狄文;;檸檬酸合成酶在卵巢癌中的作用初探[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議婦科腫瘤會(huì)場(chǎng)（婦科腫瘤學(xué)組、婦科病理學(xué)組）論文匯編[C];2012年

5 劉大興;柳時(shí);李曉媛;黃宇彬;;用于引發(fā)宮頸癌細(xì)胞死亡的二氯乙酸鈉纖維氈[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第5分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

6 楊靜垎;劉江濤;尹肖肖;朱小飛;;肥胖誘導(dǎo)T細(xì)胞活化抑制的分子機(jī)制探討[A];第十二屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)摘要匯編[C];2017年

7 王曉燕;李衛(wèi)東;花寶金;;肺癌相關(guān)基因與中心碳代謝[A];第十五屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2017年

8 郭文鵬;戎志斌;李映紅;蔡志明;;應(yīng)用微流控芯片技術(shù)探討腫瘤細(xì)胞Warburg效應(yīng)及其分子機(jī)制[A];2014年編輯出版分會(huì)年會(huì)暨全國(guó)中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合防治肝病、肝癌高峰論壇論文集[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 張獻(xiàn)懷;我國(guó)燒傷研究和治療水平領(lǐng)先世界[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

2 張獻(xiàn)懷;我國(guó)燒傷臨床研究和治療領(lǐng)先世界[N];大眾科技報(bào);2003年

3 張獻(xiàn)懷;我國(guó)燒傷研究和治療獲重大成果[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 何曉瑜;mTOR通路調(diào)節(jié)PKM2影響食管鱗癌細(xì)胞有氧糖酵解機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2017年

2 張道祥;miR-424在CAF代謝及腫瘤化療抵抗中的作用及機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 潘曉林;miR-181b通過(guò)激活STAT3調(diào)控結(jié)腸癌細(xì)胞有氧糖酵解的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

4 李舒展;PGAM1在mTOR誘導(dǎo)腫瘤有氧糖酵解中的作用及機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

5 錢(qián)曉玲;胃癌細(xì)胞通過(guò)提高有氧糖酵解增強(qiáng)耐藥性的機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2017年

6 孫倩;mTOR通過(guò)上調(diào)PKM2促進(jìn)腫瘤細(xì)胞有氧糖酵解[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

7 劉玉林;白介素-22在結(jié)腸癌細(xì)胞有氧糖酵解調(diào)節(jié)過(guò)程中的生物學(xué)作用研究[D];華中科技大學(xué);2017年

8 劉佳;兩種天然產(chǎn)物抗腫瘤作用的分子機(jī)制[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

9 石煒業(yè);第一部分 NOK癌基因的糖代謝調(diào)控機(jī)制 第二部分 干擾素α誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2017年

10 李天文;2-三氟甲基-2-羥基丙酰胺衍生物：合成及抗癌活性研究[D];清華大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 劉承棟;miR-142-3p通過(guò)靶向LDHA抑制肝癌細(xì)胞的有氧糖酵解和增殖[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

2 艾子鶯;K562/ADM細(xì)胞耐藥性與有氧糖酵解的關(guān)系及雙氫青蒿素誘導(dǎo)其鐵死亡的研究[D];蘭州大學(xué);2018年

3 潘燕紅;基于有氧糖酵解探討β-欖香烯抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移作用[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 吳昊;3-溴丙酮酸抑制肝癌細(xì)胞HepG2有氧糖酵解途徑的研究[D];蘇州大學(xué);2017年

5 楊瀟;microRNA-21低表達(dá)慢病毒載休的構(gòu)建及其調(diào)控膀胱癌細(xì)胞有氧糖酵解的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

6 郭琳琳;五氯聯(lián)苯PCB126對(duì)肝癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和有氧糖酵解的影響及機(jī)制研究[D];山西大學(xué);2017年

7 馬春燕;麻疹感染與糖代謝相互關(guān)系的研究[D];南京大學(xué);2012年

8 程培培;有氧糖酵解酶在孤獨(dú)癥發(fā)病中的表達(dá)改變及意義的研究[D];上海交通大學(xué);2015年

9 胥連杰;人參對(duì)人體細(xì)胞間無(wú)線通訊網(wǎng)絡(luò)及中心代謝途徑的影響[D];天津商業(yè)大學(xué);2017年

10 吳挺挺;LDHA介導(dǎo)的miR-449a對(duì)肺癌細(xì)胞有氧糖酵解影響的研究[D];寧波大學(xué);2017年

，

本文編號(hào)：2699718