外泌體hsa-miR-766-3p、hsa-miR-4787-3p與食管鱗癌患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)性研究
發(fā)布時間:2020-06-04 22:15
【摘要】:目的:分析外泌體miR-766-3p、miR-4787-3p與食管鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性;通過細(xì)胞功能實驗探索miR-766-3p、miR-4787-3p對食管鱗癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的影響;分析miR-766-3p、miR-4787-3p與食管鱗癌患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)性,評價上述候選microRNAs在預(yù)測食管鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、判斷患者預(yù)后的臨床應(yīng)用價值。方法:1.收集福建省腫瘤醫(yī)院的食管鱗癌患者血漿標(biāo)本,采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測食管鱗癌患者血漿外泌體及其細(xì)胞中候選microRNAs的表達(dá)水平;運(yùn)用Mann-Whitney U檢驗分析組織、外泌體候選microRNAs表達(dá)水平與食管鱗癌患者臨床特征(淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)、TNM分期、浸潤程度等)關(guān)聯(lián)性;利用Logistic回歸,構(gòu)建預(yù)測術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的模型,使用Delong et al法比較模型間的ROC曲線下面積差異性。2.通過構(gòu)建并轉(zhuǎn)染上述候選microRNAs的進(jìn)入人食管鱗癌細(xì)胞系,應(yīng)用熒光標(biāo)記法觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率,CCK-8實驗檢測細(xì)胞的增殖能力,細(xì)胞劃痕、Transwell小室遷移侵襲實驗檢測細(xì)胞遷移、侵襲能力。3.使用Kaplan-Meier法繪制食管鱗癌患者的生存曲線,Log-rank法比較生存率的差異;COX回歸模型分析組織和血漿外泌體miR-766-3p、miR-4787-3p對食管鱗癌患者預(yù)后的影響。結(jié)果:1.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者與未轉(zhuǎn)移比較,miR-766-3p(P=0.007)與miR-4787-3p(P=0.003)的差異表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)意義。預(yù)測模型1的曲線下面積為0.813(95%CI:0.695-0.931);模型2的曲線下面積為0.889(95%CI:0.776-1.00);候選microRNAs增加預(yù)測術(shù)后轉(zhuǎn)移的曲線下面積(P=0.037)。2.CCK-8發(fā)現(xiàn)miR-766-3p/miR-4787-3p過表達(dá)均能增強(qiáng)細(xì)胞增殖能力,隨著表達(dá)水平升高,細(xì)胞增殖能力越強(qiáng)(P0.05);細(xì)胞劃痕、transwell小室遷移侵襲實驗表明,過表達(dá)miR-766-3p、miR-4787-3p相比于對照組,細(xì)胞遷移侵襲能力較強(qiáng),且不同表達(dá)水平組遷移侵襲能力差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.調(diào)整人口學(xué)、臨床病理特征因素后,外泌體(HR=3.197,95%CI:1.033-9.893,P=0.044)、組織(HR=3.126,95%CI:1.182-8.266,P=0.022)miR-766-3p高表達(dá)是食管鱗癌患者不良預(yù)后的高危因素。結(jié)論:過表達(dá)miR-766-3p、miR-4787-3p增強(qiáng)食管鱗癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力;血漿外泌體高表達(dá)miR-766-3p、miR-4787-3p可誘導(dǎo)食管鱗癌患者發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,包含miR-766-3p、miR-4787-3p的模型可提高食管鱗癌術(shù)后轉(zhuǎn)移的預(yù)測效果;外泌體、組織高表達(dá)miR-766-3p是患者不良預(yù)后的高危因素。
【圖文】:
較利用 Mann-Whitney U 檢驗分析 miR-766-3p、miR-4787-3p 表達(dá)水平與食癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。分析結(jié)果表明,,食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組相比于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,血漿外泌體 miR-766-3p(P=0.007)、miR-4787-3p(P=0.003)表達(dá)存在差異性,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。(表 1.6 與圖 1.2)表 1.6 外泌體 miRNAs 在食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與未轉(zhuǎn)移患者中的比較miRNAs食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(n=43)食管鱗癌淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組(n=36) Z M(P25,P75) M(P25,P75)miR-766-3p 2.702(0.813,6.071) 0.921(0.404,3.169) 2.717 miR-4787-3p 2.655(0.449,9.251) 0.742(0.203,2.709) 2.924
95% CI:0.576-0.808;截斷點確認(rèn)為 0.478,靈敏度 0.651,特異度 0.722,約登指數(shù) 0.373(圖 1.3)。將 ROC 曲線得出的臨床診斷截斷點,分別對 79 例樣本中進(jìn)行聯(lián)合篩檢試驗,(結(jié)果如表 1.7)。采用串聯(lián)的篩查方法,特異度度有所提高;采用并聯(lián)的方法,靈敏度得到提高。通過 ROC 曲線確定食管鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的 miR-766-3p、miR-4787-3p 臨床診斷截斷點有一定的參考價值。
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R735.1
【圖文】:
較利用 Mann-Whitney U 檢驗分析 miR-766-3p、miR-4787-3p 表達(dá)水平與食癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。分析結(jié)果表明,,食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組相比于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,血漿外泌體 miR-766-3p(P=0.007)、miR-4787-3p(P=0.003)表達(dá)存在差異性,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。(表 1.6 與圖 1.2)表 1.6 外泌體 miRNAs 在食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與未轉(zhuǎn)移患者中的比較miRNAs食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(n=43)食管鱗癌淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組(n=36) Z M(P25,P75) M(P25,P75)miR-766-3p 2.702(0.813,6.071) 0.921(0.404,3.169) 2.717 miR-4787-3p 2.655(0.449,9.251) 0.742(0.203,2.709) 2.924
95% CI:0.576-0.808;截斷點確認(rèn)為 0.478,靈敏度 0.651,特異度 0.722,約登指數(shù) 0.373(圖 1.3)。將 ROC 曲線得出的臨床診斷截斷點,分別對 79 例樣本中進(jìn)行聯(lián)合篩檢試驗,(結(jié)果如表 1.7)。采用串聯(lián)的篩查方法,特異度度有所提高;采用并聯(lián)的方法,靈敏度得到提高。通過 ROC 曲線確定食管鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的 miR-766-3p、miR-4787-3p 臨床診斷截斷點有一定的參考價值。
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R735.1
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本文編號:2697050
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