【摘要】：[目的]抗菌肽LL-37是人類唯一的宿主防御肽,廣泛存在于體內(nèi)組織中。研究發(fā)現(xiàn)抗菌肽LL-37在乳腺癌和肺癌等癌組織中呈高表達,而在胃癌和淋巴瘤等腫瘤中癌組織低表達,可見LL-37在各類腫瘤組織中的表達不一致。體外給予LL-37處理相應的細胞系,在乳腺癌和肺癌中促進該細胞系的增殖,而在胃癌中抑制其細胞系的增殖,各研究結(jié)果間存在差異。本研究的目的包括:1.明確結(jié)腸癌患者血液和組織標本中LL-37的表達水平。2.通過分析研究外源性LL-37對體外培養(yǎng)的正常結(jié)腸上皮細胞FHC和結(jié)腸癌細胞HCT116和SW480增殖是否具有抑制作用。了解LL-37的表達差異與結(jié)腸癌的發(fā)生和發(fā)展的關系,可能為結(jié)腸癌的診斷和治療提供新的思路。[方法]1.收集30例結(jié)腸癌患者結(jié)腸組織,每例結(jié)腸癌患者術中標本分別取癌組織(腫瘤中心取材,避免取壞死組織)、癌旁組織(距病灶大于2cm小于5cm的組織)和正常組織(在離腫瘤組織邊緣最遠端取材),分別提取各組織總蛋白,采取Western-blot方法檢測分析三組組織中LL-37的表達水平。2.收集30例結(jié)腸癌患者血清和健康人血清,采用ELISA法檢測分別檢測血清中和三組組織中LL-37的表達水平。3.通過采用不同濃度LL-37(1-300μg/mL)處理FHC、HCT116和SW480三種細胞系,采用MTT比色法,觀察不同濃度LL-37對正常細胞和腫瘤細胞增殖的影響,進而分析LL-37對腸癌細胞增殖是否有抑制作用。4.統(tǒng)計分析:所有資料使用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行分析,論文結(jié)果中符合正態(tài)分布的實驗數(shù)據(jù)以x±s 表示,多組間比較分析采用方差分析用方差分析或者t檢驗,P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。[結(jié)果]1.30例結(jié)腸癌患者術后病理組織中,Western-blot和ELISA實驗結(jié)果均提示LL-37的表達以癌旁組織最高,其次為正常組織,癌組織中LL-37的表達最低。2.ELISA實驗檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)與30例健康成人組相比,結(jié)腸癌患者血清中的LL-37的表達較高,且具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.LL-37在劑量范圍為1-200μg/mL時對人正常結(jié)腸上皮細胞FHC活力抑制沒有統(tǒng)計學差異(P0.05),只有當劑量大于3000μg/mL對FHC增值活性有抑制作用,但抑制作用甚微。在HCT116和SW480腸癌細胞系中,LL-37濃度小于50μg/mL時,對細胞增殖活性幾乎無影響;當LL-37濃度在100μg/mL-300μg/mL之間時,其細胞毒作用呈濃度依賴性;當LL-37濃度為300μg/mL時,HCT116幾乎全部死亡,SW480僅剩少部分存活。[結(jié)論]本研究發(fā)現(xiàn)抗菌肽LL-37在結(jié)腸癌患者癌組織標本中的表達較正常和癌旁組織低,但結(jié)腸癌患者血清中的LL-37表達卻較健康對照組高提示LL-37可能與結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展有關�？咕腖L-37抑制腸癌細胞系HCT116和SW480的增殖較明顯,而對人正常結(jié)腸上皮細胞FHC的細胞毒作用較弱,或可為結(jié)腸癌的治療提供幫助。深入了解抗菌肽LL-37與結(jié)腸癌的關系,可能為結(jié)腸癌診斷提供新的分子靶點。
【圖文】：

ｈＣＡＰ－１８／ＬＬ－３７的表達水平。與正常對照組相比，結(jié)腸癌患者組織中ＬＬ－３７逡逑低表達有２３例，，檢出率為７６．７％邋（２３／３０），結(jié)腸癌組織中高表達有７例，逡逑檢出率為２３．３％邋（７／３０）。如圖１和圖２所示，可以看出，ＬＬ－３７在結(jié)腸癌患逡逑者組織中癌旁組織表達水平最高，其次為正常組織，在癌組織中ＬＬ－３７的表逡逑達最低。這些數(shù)據(jù)表明抗菌肽ＬＬ－３７在人結(jié)腸癌中呈低度表達。逡逑癌邐癌旁邐正常逡逑ｌｌ－３７邋｜？Ｍｉ？邐ｍｍｍ逡逑（３－ａｃｔｉｎ邐＾逡逑圖１結(jié)腸癌患者組織中ＬＬ－３７表達水平逡逑Ｆｉｇ邋１．邋Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｌｅｖｅｌ邋ｏｆ邋ＬＬ－３７邋ｉｎ邋Ｃｏｌｏｎ邋Ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ逡逑？ｈ逡逑｜｜邐邐ｆｃ邐逡逑％邋２．０－ｊ邐Ｉ逡逑栜邐

ｈＣＡＰ－１８／ＬＬ－３７的表達水平。與正常對照組相比，結(jié)腸癌患者組織中ＬＬ－３７逡逑低表達有２３例，檢出率為７６．７％邋（２３／３０），結(jié)腸癌組織中高表達有７例，逡逑檢出率為２３．３％邋（７／３０）。如圖１和圖２所示，可以看出，ＬＬ－３７在結(jié)腸癌患逡逑者組織中癌旁組織表達水平最高，其次為正常組織，在癌組織中ＬＬ－３７的表逡逑達最低。這些數(shù)據(jù)表明抗菌肽ＬＬ－３７在人結(jié)腸癌中呈低度表達。逡逑癌邐癌旁邐正常逡逑ｌｌ－３７邋｜？Ｍｉ？邐ｍｍｍ逡逑（３－ａｃｔｉｎ邐＾逡逑圖１結(jié)腸癌患者組織中ＬＬ－３７表達水平逡逑Ｆｉｇ邋１．邋Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｌｅｖｅｌ邋ｏｆ邋ＬＬ－３７邋ｉｎ邋Ｃｏｌｏｎ邋Ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ逡逑？ｈ逡逑｜｜邐邐ｆｃ邐逡逑％邋２．０－ｊ邐Ｉ逡逑栜邐￣逡逑
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.35

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 Marco Candela;Silvia Turroni;Elena Biagi;Franck Carbonero;Simone Rampelli;Carla Fiorentini;Patrizia Brigidi;;Inflammation and colorectal cancer, when microbiota-host mutualism breaks[J];World Journal of Gastroenterology;2014年04期

相關博士學位論文 前1條

1 王婷婷;腸道菌群結(jié)構(gòu)變化與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展關系的研究[D];上海交通大學;2012年

本文編號：2687536