【摘要】：目的:1)探討TMPRSS4及CLDN1在肝癌中的表達,與肝癌臨床特征及預(yù)后相關(guān)性;2)探討TMPRSS4及CLDN1對肝癌增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,并完善可能存在的機制。方法:1)收集肝癌標本89例,并通過qPCR方法檢測TMPRSS4及CLDN1在肝癌組織標本及肝臟組織標本中的表達,并分析TMPRSS4、CLDN1表達水平與肝癌患者臨床特征和預(yù)后之間的相關(guān)性。2)應(yīng)用以慢病毒為載體的過表達技術(shù)或sh-RNA改變TMPRSS4表達,利用MTT、Transwell技術(shù)、流式細胞儀、Westernblot技術(shù)明確其與肝癌增殖、轉(zhuǎn)移相關(guān)性,在肝癌中進一步討論TMPRSS4與腫瘤干性的相關(guān)性。3)應(yīng)用以慢病毒為載體的過表達技術(shù)或sh-RNA改變CLDN1表達,利用MTT、Transwell技術(shù)、流式細胞儀、Westernblot技術(shù)明確其與肝癌增殖、轉(zhuǎn)移相關(guān)性,探討CLDN1與肝癌干性相關(guān)性,并完善TMPRSS4與CLDN1之間調(diào)控關(guān)系;結(jié)果:1)TMPRSS4及CLDN1的表達水平在肝癌組織中明顯上調(diào),同時在正常的肝組織中低表達。并且TMPRSS4及CLDN1表達均與肝癌預(yù)后相關(guān)。過表達TMPRSS4、CLDN1的肝癌患者生存期短,而低表達TMPRSS4、CLDN1者生存期長,相關(guān)性分析提示二者在肝癌中表達具有正相關(guān)性;2)RT-PCR和Western bolt結(jié)果顯示:TMPRSS4可介導(dǎo)肝癌增殖,并增強侵襲轉(zhuǎn)移能力,并且可促進肝癌細胞獲得干性;3)進一步研究CLDN1是否可以影響腫瘤增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力,發(fā)現(xiàn)低表達CLDN1可降低肝癌細胞株hepG2與Huh7體外增殖能力,而過表達CLDN1肝癌細胞增殖能力增強,體內(nèi)試驗證實CLDN1下調(diào)的細胞株生長能力減弱,而過表達CLDN1細胞成瘤能力增強;Transwell試驗結(jié)果顯示,CLDN1低表達細胞轉(zhuǎn)移、侵襲能力減弱,而過表達者細胞其侵襲、轉(zhuǎn)移能力增強。這與CLDN1的表達實現(xiàn),進一步發(fā)現(xiàn)TMPRSS4/ERK/CLDN1信號通路發(fā)揮促癌作用,促使腫瘤細胞獲得干性。結(jié)論:本課題研究發(fā)現(xiàn),TMPRSS4與CLDN1在肝癌細胞及組織中表達上調(diào),可被認為是原癌基因,并且TMPRSS4與CLDN1過表達的患者其生存期短,相關(guān)性分析提示二者之間存在正相關(guān)。體內(nèi)及體外研究發(fā)現(xiàn),CLDN1在肝癌中發(fā)揮著原癌基因的作用,可增強肝癌細胞生長、侵襲、轉(zhuǎn)移潛能,并且CLDN1表達水平受TMPRSS4正相調(diào)控。本研究的結(jié)果使我們更加清晰的認識了TMPRSS4及CLDN1在肝細胞癌中的生物學功能,為其今后可能成為一個新的治療靶點奠定了一定的基礎(chǔ)。
【圖文】：

并以GAPDH為對照，檢測TMPRSS4與CLDN1表達含量。研究結(jié)果顯示，CLDN1在正常的肝組織中表達陽性率低25.5%（14/55），而在肝細胞肝癌中為65.2%（58/89），差異具有統(tǒng)計學意義（圖1-1A，表1-2，P<0.001）。為了研究TMPRSS4在肝癌中的表達，我們首先分析了TMPRSS4在肝癌組織和非肝癌組織中的表達情況，發(fā)現(xiàn)TMPRSS4在肝癌組織高表達（65/89），，而在非肝癌組織中低表達（17/55），差異具有統(tǒng)計學意義（圖1-1B，表1-3

結(jié)果表明二者均在肝癌中高表達，在肝組織中低表達，并且TMPRSS4陽性主要表現(xiàn)在細胞質(zhì)及細胞膜表面呈棕黃色深染，CLDN1陽性表現(xiàn)為細胞膜表面呈彌漫性淺黃色染色（圖1-2A）。因TMPRSS4與CLDN1均在肝癌中高表達，且在文獻中提示TMPRSS4增高則的CLDN1表達水平可增高，可能二者之間存在某種相關(guān)性，故我們進一步通過spearman 相關(guān)性檢驗分析二者之間相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TMPRSS4及CLDN1之間存在正相關(guān)（圖1-2B，r=0.375，P<0.01）。圖1-2 免疫組化結(jié)果顯示TMPRSS4與CLDN1在肝癌組織及非肝癌組織中的表達水平；BTMPRSS4與CLDN1之間存在相關(guān)性Fig. 1-2（A）IHC staining demonstrated the expression level of TMPRSS4 and CLDN1 in HCCand normal liver tissues（NT）（.B）Spearman assays analyzed the correlation between TMPRSS4and CLDN1 in HCC.
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.7

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 代智;楊怡;;肝癌診斷標志物的新進展及應(yīng)用[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2018年04期

2 吳洋洋;王愛平;董嵐;孫亞臣;王瑤;王海莉;郝銳;;單獨與聯(lián)合介入治療肝癌的臨床對比分析[J];醫(yī)學研究雜志;2017年09期

3 關(guān)文龍;;直接抗丙型肝炎病毒治療可能惡化肝癌[J];抗癌之窗;2016年06期

4 王興生;錢麗瓊;;手術(shù)切除在肝癌多學科綜合治療中的地位[J];健康之路;2017年08期

5 李曉文;;盧國棟:“八桂大地”的肝癌科學工作者[J];科學中國人;2017年25期

6 薛開先;肝癌發(fā)生的分子遺傳學和表遺傳學研究[J];癌癥;2005年06期

7 程黎明,王思元,林菊生;PTEN和p53蛋白在肝癌組織中的表達及意義[J];癌癥;2003年01期

8 上田啟次;凋亡抑制與肝癌發(fā)生[J];日本醫(yī)學介紹;1997年07期

9 王富根;沈德美;劉亦法;朱偉萍;許良中;;肝癌高發(fā)家族中1例患者染色體的研究[J];中國腫瘤臨床;1987年04期

10 楊發(fā)端;林禮務(wù);吳德豐;楊長培;梁建鋼;陳維珠;王平;章遲;薛恩生;杜惠玲;高上達;葉真;孫昌盛;Daniel W.Nebert,M.D;;香煙對黃曲霉素B_1致肝癌作用的短期鴨體內(nèi)實驗?zāi)Ｐ偷挠绊慬J];中國腫瘤臨床;1987年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁文丹;王東;;VEGF與細胞周期啟動在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用[A];中國病理生理學會第九屆全國代表大會及學術(shù)會議論文摘要[C];2010年

2 曹驥;盧曉旭;胡艷玲;李瑗;朱伶群;楊春;唐艷萍;歐超;張春燕;;利用基因富集及元分析初步篩選影響肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵基因[A];全國腫瘤流行病學和腫瘤病因?qū)W學術(shù)會議論文集[C];2011年

3 劉耕陶;孫華北;方亞南;;肝癌發(fā)生的化學預(yù)防[A];第十次中國生物物理學術(shù)大會論文摘要集[C];2006年

4 易宏淦;臧夢雅;吳志遠;徐靈芝;曲春楓;;慢性腸道炎癥狀態(tài)可促進肝癌發(fā)生[A];第九屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2014年

5 謝靜媛;戴煒;涂愛民;趙文高;符花;胡應(yīng)龍;;深圳地區(qū)53例肝癌發(fā)生的相關(guān)因素探討[A];全國第2屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學術(shù)會議暨國家中醫(yī)藥管理局第1屆傳染病協(xié)作組會議論文匯編[C];2008年

6 韓志鵬;井瑩瑩;蔡雄;吳孟超;衛(wèi)立辛;;干細胞與肝癌發(fā)生發(fā)展的研究與思考[A];發(fā)揮中西醫(yī)優(yōu)勢治療原發(fā)性肝癌——香山科學會議第461次學術(shù)討論會畫冊[C];2013年

7 董志珍;姚登福;宗蕾;邱歷偉;吳瑋;吳信華;;肝癌發(fā)生早期胰島素樣生長因子-Ⅱ異常表達與改變特征[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文集[C];2006年

8 舒宏;康曉楠;秦雪;劉銀坤;;肝癌發(fā)生不同病理階段血清蛋白篩選及結(jié)合珠蛋白的診斷價值[A];第十二屆全國肝癌學術(shù)會議論文匯編[C];2009年

9 白陽秋;楊玉秀;;肝癌發(fā)生過程中的差異基因表達譜研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

10 李詩楠;田志剛;;肝臟天然免疫應(yīng)答在小鼠慢性肝炎肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用[A];第八屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 長沙市傳染病醫(yī)院感染科副主任醫(yī)師 李金強;感染乙肝、丙肝 不可聽之任之[N];大眾衛(wèi)生報;2017年

2 記者 佘崢 通訊員 薛志平 歐陽桂蓮;為什么會得肝癌？原因搞清楚了[N];廈門日報;2017年

3 北京協(xié)和醫(yī)院 王晶;肝癌療效評價或有新標志物[N];健康報;2017年

4 記者 顏維琦 曹繼軍;我科學家揭示肝癌發(fā)生早期分子機制[N];光明日報;2012年

5 通訊員 韋夏 本報記者 鄧宏鷹 鐘少鴻;不良飲食習慣易誘發(fā)肝癌[N];中國食品報;2009年

6 ;癌癥早知道[N];人民政協(xié)報;2002年

7 張中橋;C2基因表達下調(diào)與肝癌相關(guān)[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 劉江峰 劉 涓;捕捉肝癌的“蛛絲馬跡”[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

9 指導(dǎo)專家 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院感染病科教授 張大志 記者 蘇云麗;AFP升高肝癌發(fā)生“第一信號”[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2009年

10 周金蓮;MIB-1和bcl-2表達預(yù)測肝癌發(fā)生[N];中國醫(yī)藥報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 沙婭·瑪哈提;TMPRSS4協(xié)同CLDN1調(diào)控肝癌增殖和侵襲轉(zhuǎn)移機制研究[D];新疆醫(yī)科大學;2018年

2 張正東;DNM3抑制肝癌發(fā)生發(fā)展作用及其機制的研究[D];安徽醫(yī)科大學;2016年

3 蔣莉;非經(jīng)典MHC I類分子HLA-G在廣西肝癌家族聚集性中的作用[D];廣西醫(yī)科大學;2017年

4 保潔;miR-126在肝細胞肝癌疾病進展中的作用及其分子機制研究[D];鄭州大學;2017年

5 井瑩瑩;腫瘤壞死因子-α在肝癌發(fā)生過程中的作用及機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

6 張娜;槐定酸類新化合物抗肝癌作用的分子機理及GSK-3β調(diào)控肝癌的機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2017年

7 汪浩;p53凋亡刺激蛋白2調(diào)控肝癌脂質(zhì)代謝的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

8 方田;肝癌細胞與成纖維細胞的相互作用對肝癌肺轉(zhuǎn)移的影響[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

9 章諾貝;多聚腺苷酸結(jié)合蛋白互作蛋白1在肝癌發(fā)生中的作用機制研究[D];南昌大學;2017年

10 鄧貴龍;肝癌亞細胞組份中微量元素分布及含硒蛋白的研究[D];浙江大學;2004年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周鴻鯤;干擾YAP抑制肝癌細胞增殖、侵襲過程并增加其對順鉑的敏感性[D];浙江大學;2018年

2 楊帆;CD36在肝癌中的臨床意義及其對肝癌早期轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)影響的研究[D];浙江大學;2018年

3 張澤亮;AFP對肝癌細胞遷移的影響及其與KLF6的關(guān)系[D];蘭州大學;2018年

4 李楊;TRB3抑制肝癌細胞MHCC-97H增殖的機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2017年

5 吳旭敏;ANXA10基因在肝癌中的功能與機制研究[D];南昌大學;2018年

6 郭飛飛;慢性肝病腸道微生態(tài)改變及其對肝癌的診斷作用研究[D];浙江大學;2017年

7 焦璐;苦參堿對肝癌HepG-2細胞增殖和遷移的影響及分子機制研究[D];延邊大學;2017年

8 陳朋;Talin-1調(diào)控網(wǎng)絡(luò)促進肝癌生長和轉(zhuǎn)移的研究[D];安徽醫(yī)科大學;2017年

9 張俊有;miR-3065-5p和miR-1307-5p在肝癌細胞中的功能研究[D];內(nèi)蒙古大學;2017年

10 王彥志;UC-MSCs共培養(yǎng)對肝癌細胞的影響及趨化因子在其中的作用[D];內(nèi)蒙古大學;2017年

本文編號：2639028