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LncRNA-SNHG17通過抑制P15、P16促進胃癌細胞增殖、遷移

發(fā)布時間:2020-04-20 04:21
【摘要】:背景胃癌(Gastric Cancer,GC)是全球最常見的惡性腫瘤之一,居消化系統(tǒng)腫瘤之首。胃癌在中國、日本、拉丁美洲、東歐等國發(fā)病率較高,全球每年約有72萬人死于胃癌。近年來,隨著早期胃癌診斷率提高及治療方式進步,胃癌總體生存率有所改善,但進展期胃癌患者遠期生存率仍有待提高。胃癌發(fā)生、發(fā)展是由多基因參與、多步驟的復(fù)雜過程,原癌基因激活、抑癌基因失活均與腫瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。胃癌相關(guān)基因研究有望尋找早期胃癌的生物標(biāo)志物,有助于制定更有針對性的治療策略,從而提高患者生存率。人類基因組組學(xué)研究表明,僅有不到2%的RNA可被翻譯成蛋白質(zhì)。不具有蛋白編碼能力的RNA被稱為非編碼RNA(nocoding RNA,ncRNA),其中長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一類長度大于200個核苷酸的非編碼RNA。LncRNA在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用,如LncRNA可通過沉默細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(cyclin dependent kinase inhibitor,CKI),使周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CKI)對細胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)的負性調(diào)控作用降低或完全喪失從而促進腫瘤細胞的增殖、遷移。文獻提示LncRNA-SNHG17在結(jié)直腸癌中表達增加,并通過抑制P57表達,促進結(jié)直腸癌增殖、遷移。但LncRNA-SNHG17在胃癌中的作用及機制尚不清楚。本研究擬通過細胞學(xué)試驗、裸鼠成瘤實驗等研究LncRNA-SNHG17在胃癌組織中的表達、作用及其機制。方法1.實時熒光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)檢測正常胃黏膜上皮細胞株GES-1及胃癌細胞株AGS、SGC-7901、BGC-823與BGC-803中LncRNA-SNHG17、P15、P16、P18與P19的表達水平。檢索TCGA數(shù)據(jù)庫驗證LncRNA-SNHG17在胃癌組織和癌旁組織中是否具有差異性。2.設(shè)計干擾序列下調(diào)胃癌細胞LncRNA-SNHG17表達,研究LncRNA-SNHG17對胃癌細胞P15、P16、P18及P19表達的影響。3.平板克隆實驗、細胞周期實驗、細胞凋亡實驗、Western blot、裸鼠成瘤實驗研究LncRNA-SNHG17對胃癌細胞增殖的影響;Transwell實驗研究LncRNA-SNHG17對胃癌細胞遷移的影響。結(jié)果1.與正常胃黏膜上皮細胞和正常胃組織相比,胃癌細胞及胃癌組織LncRNA-SNHG17表達顯著增加。2.LncRNA-SNHG17促進胃癌細胞增殖、遷移。3.下調(diào)LncRNA-SNHG17后胃癌細胞P15、P16的表達顯著升高,而P18、P19表達無明顯變化。4.下調(diào)LncRNA-SNHG17可促進胃癌細胞凋亡、細胞周期阻滯在G1/G0期、細胞周期蛋白依賴性激酶-4(CDK4)含量減少。結(jié)論Lnc RNA-SNHG17在胃癌組織及胃癌細胞中表達增加,且通過下調(diào)P15、P16的表達促進胃癌細胞增殖遷移。LncRNA-SNHG17參與胃癌發(fā)生發(fā)展過程,有望成為胃癌防治新靶點。
【圖文】:

胃癌細胞,和胃,癌組織,胃癌組織


圖 1.胃癌細胞和胃癌組織中 LncRNA-SNHG17 表達顯著升高。(A)qRT-PCR 研究顯示 LncRNA-SNHG17 在胃黏膜上皮細胞 GES-1 中含量最低,,與 GES-1 相比,胃癌細胞 AGS、SGC7901、BGC803、BGC823 中表達均顯著升高(**:P<0.01)。(B)TCGA 數(shù)據(jù)分析顯示胃癌組織中 LncRNA-SNHG17 表達顯著升高(P<0.01)。

胃癌細胞,序列,遷移能力,醫(yī)科


南京醫(yī)科G17 表達(圖 2)。平板克隆實驗表明,LncRNA-SN7901 細胞克隆形成數(shù)顯著低于對照組(P<0.01)(圖示 LncRNA-SNHG17 沉默后,AGS 和 SGC7901 胃組(圖 3B)。Transwell 遷移實驗結(jié)果顯示沉默 Lnc SGC7901 胃癌細胞遷移能力顯著下降(圖 3C)。綜G17 可抑制胃癌細胞增殖、遷移能力。
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R735.2

【參考文獻】

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1 Wen-Ming Chen;Wei-Dong Chen;Xue-Mei Jiang;Xue-Feng Jia;Hong-Mei Wang;Qiu-Jie Zhang;Yong-Qian Shu;Hai-Bo Zhao;;HOX transcript antisense intergenic RNA represses E-cadherin expression by binding to EZH2 in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2017年33期

2 Hassaan Mehboob Awan;Abdullah Shah;Farooq Rashid;Ge Shan;;Primate-specific Long Non-coding RNAs and MicroRNAs[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2017年03期



本文編號:2634146

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