【摘要】：目的端粒是真核生物線性染色體的末端,由與特殊蛋白質(zhì)結(jié)合的重復(fù)DNA序列(TTAGGG)組成。其保護(hù)染色體末端不被識(shí)別為斷裂的DNA雙鏈,同時(shí)防止由于DNA半保留復(fù)制所引起的進(jìn)行性染色體縮短過(guò)程中基因組信息的丟失。既往認(rèn)為細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度為細(xì)胞自身的遺傳特性,近期研究顯示細(xì)胞因子作為細(xì)胞間相互交流的“信使”,可以通過(guò)激活某些蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄因子,在轉(zhuǎn)錄水平上參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性。干擾素是臨床最為常用的細(xì)胞因子,可用于治療骨髓增殖性腫瘤。本研究擬通過(guò)檢測(cè)干擾素-α(interferon-α,IFN-α)治療前后真性紅細(xì)胞增多癥(polycythemia vera,PV)和原發(fā)性血小板增多癥(essential thrombocytosis,ET)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)端粒長(zhǎng)度的變化情況,及端粒長(zhǎng)度與IFN-α累積治療劑量的相關(guān)性,闡述IFN-α對(duì)PBMCs端粒長(zhǎng)度的影響。并通過(guò)檢測(cè)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(telomerase reverse transciptase,TERT)、端粒保護(hù)蛋白1(protection of telomeres 1,POT1)及毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變與Rad3相關(guān)(ATM and Rad3related,ATR)基因的表達(dá)情況,探究IFN-α影響PBMCs端粒長(zhǎng)度可能的機(jī)制。方法研究對(duì)象均來(lái)自天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院2017年4月-12月明確診斷的真性紅細(xì)胞增多癥和原發(fā)性血小板增多癥患者,診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《真性紅細(xì)胞增多癥診斷與治療中國(guó)專家共識(shí)(2016年版)》、《原發(fā)性血小板增多癥診斷與治療中國(guó)專家共識(shí)(2016年版)》。其中已接受干擾素治療的患者24例、初治者24例,兩組在性別、年齡構(gòu)成上均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。所有研究對(duì)象均提取外周血單個(gè)核細(xì)胞中的DNA和RNA,采用實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(realtime quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)方法檢測(cè)PV和ET患者PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度及hTERT、POT1及ATR基因的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)PV和ET患者IFN-α累積治療劑量,并進(jìn)行PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度與IFN-α累積治療劑量的相關(guān)性研究。對(duì)所有所得結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS24.0分析,本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料符合偏態(tài)分布,采用Mann-Whitney U test進(jìn)行兩組間的均值比較,并用中位數(shù)和下、上四分位數(shù)表示,記作M(P_(25)~P_(75)),采用Spearman法進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果第一部分IFN-α治療組PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度0.277(0.105~0.714),明顯短于初治組PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度0.625(0.297~1.824)(P=0.016*)。IFN-α治療組PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度與IFN-α累積治療劑量呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.533,P=0.015*)。第二部分IFN-α治療組PBMCs h TERT m RNA的表達(dá)水平0.024(0.005~0.120),明顯低于初治組PBMCs h TERT m RNA的表達(dá)水平0.122(0.068~0.441)(P=0.005**)。IFN-α治療組PBMCs POT1 m RNA的表達(dá)水平0.078(0.014~3.905)低于初治組PBMCs POT1 m RNA的表達(dá)水平2.690(0.139~13.313)(P=0.027*)。IFN-α治療組PBMCs ATR m RNA的表達(dá)水平0.043(0.023~0.739)高于初治組PBMCs ATR m RNA的表達(dá)水平0.021(0.011~0.055)(P=0.038*)。結(jié)論1.PV和ET患者IFN-α治療后PBMCs相對(duì)端粒長(zhǎng)度明顯短于未接受IFN-α治療的PV和ET患者,且相對(duì)端粒長(zhǎng)度與干擾素累積治療劑量呈顯著負(fù)相關(guān)。2.PV和ET患者IFN-α治療后PBMCs的h TERT及POT1基因表達(dá)降低,ATR基因表達(dá)升高,這可能是IFN-α導(dǎo)致端粒縮短及細(xì)胞凋亡的重要途徑。
【圖文】：

端粒長(zhǎng)度的擴(kuò)增曲線

端粒長(zhǎng)度的溶解曲線
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R733.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 陳元仲;吳勇;陳萍;黃慧芳;;白血病細(xì)胞TGF-β_1含量減少及外源性TGF-β_1基因?qū)L-60細(xì)胞的作用[J];中國(guó)病理生理雜志;2006年01期

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本文編號(hào)：2629842