【摘要】：[目的]本研究以膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)細胞為研究對象,通過構(gòu)建BCMab1-MnPs復(fù)合體,檢測其在膀胱尿路上皮癌患者尿液脫落細胞中的特異識別能力,并初步評估它在膀胱尿路上皮癌尿脫落細胞早期無創(chuàng)檢查方面的臨床應(yīng)用價值。[方法]1.利用間接偶聯(lián)法,在免疫磁珠上包被單克隆抗體BCMab1,制備膀胱癌免疫磁珠(BCMab1-MnPs)后,將微量膀胱尿路上皮癌EJ細胞與正常膀胱上皮細胞HCV29懸液混勻,再通過免疫磁性細胞分離,進行細胞免疫學(xué)鑒定,檢測BCMab1-MnPs的特異性及敏感性。2.選取了 2016年6月至2018年3月期間因懷疑膀胱腫瘤收治于昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院的患者,經(jīng)膀胱鏡活檢或術(shù)后病理診斷為膀胱尿路上皮癌的71名患者納入本研究,設(shè)為腫瘤組;并選取20名非泌尿系腫瘤的患者作為對照組。分別采用NMP22法、BTA法、BCMab1-MnPs法、傳統(tǒng)尿脫落細胞學(xué)檢測兩組患者尿液樣本,采用SPSS19.0軟件計算4種檢測方法的敏感度和特異度,從而比較這四種尿液檢測方法以及不同組合聯(lián)合診斷膀胱尿路上皮癌的準確性。應(yīng)用秩和檢驗分析四種檢測方法與患者臨床病理特征之間的關(guān)系。并初步評估BCMab1-MnPs復(fù)合體在臨床應(yīng)用上的價值。[結(jié)果]1.包被BCMab1的免疫磁珠能與膀胱尿路上皮癌EJ細胞敏感而特異地結(jié)合,當(dāng)正常膀胱上皮細胞與EJ細胞比為5×105:1時可檢測到癌細胞。2.四種不同的尿液檢測方法(NMP22、BTA、BCMab1、尿脫落細胞)檢測同一例患者尿液標本,發(fā)現(xiàn)BCMab1-MnPs擁有通過尿液檢測膀胱癌最高的敏感性:92.96%,同時具有最高的特異性:100%。3.BCMab1-MnPs法對于低分級膀胱尿路上皮癌的檢測敏感度最高,為76.47%,,而在高級別膀胱尿路上皮癌中的敏感度為98.18%,兩者差別有統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.009),同時在其他標記物中也發(fā)現(xiàn)這種趨勢。4.NMP22、尿脫落細胞法對于不同病理分期膀胱尿路上皮腫瘤的檢測存在差別,二者對于高分期膀胱尿路上皮癌的診斷敏感度明顯優(yōu)于低分期組(p0.05),而BTA、BCMab1-MnPs對于不同分期膀胱尿路上皮癌診斷的敏感度則無明顯差異。5.尿液中BTA濃度與膀胱尿路上皮癌病理分級、分期成正相關(guān),并且結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。6.NMP22、BTA、BCMab1-MnPs三種聯(lián)合檢測敏感度、特異度分別為:95.77%、85%。[結(jié)論]實驗發(fā)現(xiàn)BCMab1-MnPs作為一種新型的、高敏感度、高特異度的免疫磁珠,具有對膀胱尿路上皮癌細胞識別度高,特異性強,靈敏度好,操作便捷、無創(chuàng)等優(yōu)點,有望在將來成為一種尿脫落細胞學(xué)早期診斷膀胱尿路上皮癌的新方法。
【圖文】：

山羊抗小鼠ｌｇＧ免疫磁珠與單克隆抗體ＢＣＭａｂｌ偶聯(lián)后，結(jié)合上ＢＣＭａｂｌ單抗的逡逑磁珠與ＦＩＴＣ標記的兔抗鼠抗體結(jié)合良好，，熒光顯微鏡下可見制備的ＢＣＭａｂｌ－ＭｎＰｓ逡逑復(fù)合體表面有明顯的均勻的綠色熒光，而對照組空白磁珠鏡下無熒光，說明逡逑ＢＣＭａｂｌ單抗已與磁珠表面的活性基團結(jié)合，并具有良好的生物學(xué)活性。逡逑３．邋２邋ＩＭＢ特異性檢測逡逑

？邋！逡逑？逡逑圖１１．ＨＣＶ２９細胞不與免疫磁珠結(jié)合，磁力架洗脫前磁珠呈散在分布（Ｘ２０）逡逑ｒ＂邐ｉ邐ｉ－ｕ．、逡逑ｋ逡逑４逡逑ｊ逡逑：逡逑廣邋Ｖ＊＇．．邋．邋．．．．邋＇邋－．邐－邋ｆｅ邋？＞＇■邐，ｖ．逡逑圖邋１２邐（Ｘ２０）邐圖邋１３邐（ｘ邋１００）逡逑圖１２、１３．經(jīng)磁力架洗脫后光鏡下很少見磁珠逡逑１５逡逑
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.14

【參考文獻】

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1 張煒琦;李丹;;老年膀胱癌患者術(shù)后生活質(zhì)量及其影響因素的研究[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(B);2014年08期

2 曲知專;卓育敏;;尿液中膀胱癌腫瘤標記物的研究進展[J];中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2014年05期

3 張永振;王幕文;孫鵬;尉春曉;鐘浩;金訊波;;直光束綠激光膀胱腫瘤剜除術(shù)治療表淺性膀胱癌的療效分析[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(B);2013年02期

4 丁才學(xué);;膀胱癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測中尿腫瘤標志物聯(lián)合檢測組合方式的研究[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2012年32期

5 李揚;鄭衍平;許旭昀;張敬成;盧小卓;;尿NMP22、UBC及BTA聯(lián)合檢測在膀胱癌早期診斷中的意義研究[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年11期

6 孫羿,何輝,馬強,王新陽,楊林,賀大林;膀胱腫瘤抗原和透明質(zhì)酸等七項腫瘤標志物在膀胱腫瘤診斷中的應(yīng)用價值[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年35期

7 劉先橋,官月平,邢建民,馬志亞,劉會洲;磁性微球的制備及在細胞分離中的應(yīng)用[J];化學(xué)通報;2004年10期

8 王曉光,胡紅,劉又寧;應(yīng)用納米免疫磁珠檢測早期肺癌循環(huán)血中腫瘤細胞[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年16期

9 周任遠,何家揚;尿脫落細胞吖啶橙染色診斷膀胱移行細胞癌的意義[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2003年03期

10 胡振紅,李清泉,楊炯;小細胞肺癌免疫磁性微珠的構(gòu)建及鑒定[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2003年02期

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1 邢金良;抗人肝癌基因工程抗體嵌合IgG和嵌合Fab的構(gòu)建和表達[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

本文編號：2626391