【摘要】：[目的]本研究以膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)細(xì)胞為研究對(duì)象,通過(guò)構(gòu)建BCMab1-MnPs復(fù)合體,檢測(cè)其在膀胱尿路上皮癌患者尿液脫落細(xì)胞中的特異識(shí)別能力,并初步評(píng)估它在膀胱尿路上皮癌尿脫落細(xì)胞早期無(wú)創(chuàng)檢查方面的臨床應(yīng)用價(jià)值。[方法]1.利用間接偶聯(lián)法,在免疫磁珠上包被單克隆抗體BCMab1,制備膀胱癌免疫磁珠(BCMab1-MnPs)后,將微量膀胱尿路上皮癌EJ細(xì)胞與正常膀胱上皮細(xì)胞HCV29懸液混勻,再通過(guò)免疫磁性細(xì)胞分離,進(jìn)行細(xì)胞免疫學(xué)鑒定,檢測(cè)BCMab1-MnPs的特異性及敏感性。2.選取了 2016年6月至2018年3月期間因懷疑膀胱腫瘤收治于昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院的患者,經(jīng)膀胱鏡活檢或術(shù)后病理診斷為膀胱尿路上皮癌的71名患者納入本研究,設(shè)為腫瘤組;并選取20名非泌尿系腫瘤的患者作為對(duì)照組。分別采用NMP22法、BTA法、BCMab1-MnPs法、傳統(tǒng)尿脫落細(xì)胞學(xué)檢測(cè)兩組患者尿液樣本,采用SPSS19.0軟件計(jì)算4種檢測(cè)方法的敏感度和特異度,從而比較這四種尿液檢測(cè)方法以及不同組合聯(lián)合診斷膀胱尿路上皮癌的準(zhǔn)確性。應(yīng)用秩和檢驗(yàn)分析四種檢測(cè)方法與患者臨床病理特征之間的關(guān)系。并初步評(píng)估BCMab1-MnPs復(fù)合體在臨床應(yīng)用上的價(jià)值。[結(jié)果]1.包被BCMab1的免疫磁珠能與膀胱尿路上皮癌EJ細(xì)胞敏感而特異地結(jié)合,當(dāng)正常膀胱上皮細(xì)胞與EJ細(xì)胞比為5×105:1時(shí)可檢測(cè)到癌細(xì)胞。2.四種不同的尿液檢測(cè)方法(NMP22、BTA、BCMab1、尿脫落細(xì)胞)檢測(cè)同一例患者尿液標(biāo)本,發(fā)現(xiàn)BCMab1-MnPs擁有通過(guò)尿液檢測(cè)膀胱癌最高的敏感性:92.96%,同時(shí)具有最高的特異性:100%。3.BCMab1-MnPs法對(duì)于低分級(jí)膀胱尿路上皮癌的檢測(cè)敏感度最高,為76.47%,,而在高級(jí)別膀胱尿路上皮癌中的敏感度為98.18%,兩者差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.009),同時(shí)在其他標(biāo)記物中也發(fā)現(xiàn)這種趨勢(shì)。4.NMP22、尿脫落細(xì)胞法對(duì)于不同病理分期膀胱尿路上皮腫瘤的檢測(cè)存在差別,二者對(duì)于高分期膀胱尿路上皮癌的診斷敏感度明顯優(yōu)于低分期組(p0.05),而B(niǎo)TA、BCMab1-MnPs對(duì)于不同分期膀胱尿路上皮癌診斷的敏感度則無(wú)明顯差異。5.尿液中BTA濃度與膀胱尿路上皮癌病理分級(jí)、分期成正相關(guān),并且結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。6.NMP22、BTA、BCMab1-MnPs三種聯(lián)合檢測(cè)敏感度、特異度分別為:95.77%、85%。[結(jié)論]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)BCMab1-MnPs作為一種新型的、高敏感度、高特異度的免疫磁珠,具有對(duì)膀胱尿路上皮癌細(xì)胞識(shí)別度高,特異性強(qiáng),靈敏度好,操作便捷、無(wú)創(chuàng)等優(yōu)點(diǎn),有望在將來(lái)成為一種尿脫落細(xì)胞學(xué)早期診斷膀胱尿路上皮癌的新方法。
【圖文】：

山羊抗小鼠ｌｇＧ免疫磁珠與單克隆抗體ＢＣＭａｂｌ偶聯(lián)后，結(jié)合上ＢＣＭａｂｌ單抗的逡逑磁珠與ＦＩＴＣ標(biāo)記的兔抗鼠抗體結(jié)合良好，，熒光顯微鏡下可見(jiàn)制備的ＢＣＭａｂｌ－ＭｎＰｓ逡逑復(fù)合體表面有明顯的均勻的綠色熒光，而對(duì)照組空白磁珠鏡下無(wú)熒光，說(shuō)明逡逑ＢＣＭａｂｌ單抗已與磁珠表面的活性基團(tuán)結(jié)合，并具有良好的生物學(xué)活性。逡逑３．邋２邋ＩＭＢ特異性檢測(cè)逡逑

？邋！逡逑？逡逑圖１１．ＨＣＶ２９細(xì)胞不與免疫磁珠結(jié)合，磁力架洗脫前磁珠呈散在分布（Ｘ２０）逡逑ｒ＂邐ｉ邐ｉ－ｕ．、逡逑ｋ逡逑４逡逑ｊ逡逑：逡逑廣邋Ｖ＊＇．．邋．邋．．．．邋＇邋－．邐－邋ｆｅ邋？＞＇■邐，ｖ．逡逑圖邋１２邐（Ｘ２０）邐圖邋１３邐（ｘ邋１００）逡逑圖１２、１３．經(jīng)磁力架洗脫后光鏡下很少見(jiàn)磁珠逡逑１５逡逑
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.14

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2626391