F-box蛋白FBXO39在胃癌中的表達(dá)情況及生物學(xué)作用
發(fā)布時(shí)間:2020-04-08 02:54
【摘要】:目的:FBXO39在胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況及其生物學(xué)作用。方法:1、Western blot和細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測FBXO39在正常胃上皮細(xì)胞GES-1、胃癌細(xì)胞SGC-7901及MGC803細(xì)胞系中的表達(dá)情況。2、MTT、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測FBXO39過表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖和遷移的影響。3、流式細(xì)胞術(shù)檢測FBXO39過表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞周期的影響。結(jié)果:1、FBXO39在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平高于正常胃細(xì)胞系。體外培養(yǎng)胃正常上皮細(xì)胞GES-1、胃癌細(xì)胞株SGC7901和MGC803,用Western blot檢測及細(xì)胞免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)FBXO39在胃癌細(xì)胞SGC7901和MGC803中的表達(dá)水平要高于正常胃上皮細(xì)胞GES-1,并且SGC7901更明顯高于正常GES-1。提示FBXO39在胃癌中扮演一定角色。2、FBXO39過表達(dá)可促進(jìn)胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖。MTT結(jié)果顯示:FBXO39組相對(duì)于control組的相對(duì)增值率在147%-182%之間,并明顯高于其他兩組(P0.05),提示SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染p EGFPFBXO39后,可促進(jìn)細(xì)胞的增殖。同時(shí)我們?cè)诩?xì)胞轉(zhuǎn)染后通過平板克隆實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測SGC7901細(xì)胞克隆形成能力,實(shí)驗(yàn)提示:過表達(dá)FBXO39細(xì)胞集落形成率為:23.7±0.9,明顯高于空白組9.6±0.6、PEGFP-C2空載體組8.7±0.5、PEGFPFBXO39?F7.7±0.5(P0.05)。兩組實(shí)驗(yàn)都提示過表達(dá)FBXO39可胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖。3、FBXO39過表達(dá)可促進(jìn)胃癌細(xì)胞SGC-7901的遷移。我們采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步分析FBXO39在SGC7901細(xì)胞遷移能力的影響,結(jié)果提示:FBXO39組24小時(shí)的遷移率約69.7%,48小時(shí)的遷移率約90.2%,而其他三組24小時(shí)遷移率約45-47%左右,48小時(shí)的遷移率在58-61%左右,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)ANOVO及LSD分析提示FBXO39組遷移率明顯高于其他組(P0.05)。這些結(jié)果進(jìn)一步提示過表達(dá)FBX039可促進(jìn)SGC7901細(xì)胞遷移。4、FBXO39過表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901周期無明顯的影響。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:FBXO39質(zhì)粒組細(xì)胞G0/G1期、S期、G2/M期值分別約:47.42±2.29、35.91±1.87、35.91±1.87,與其他組相比,細(xì)胞周期各期沒有發(fā)生顯著的變化(P0.05)。結(jié)論:1、FBXO39在胃癌細(xì)胞株中的表達(dá)水平高于胃正常細(xì)胞株。2、FBXO39過表達(dá)可促進(jìn)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖、遷移。3、FBXO39過表達(dá)對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞周期無明顯影響。
【圖文】:
第 3 章 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果3.1 FBXO39 在胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況體外培養(yǎng)胃正常上皮細(xì)胞 GES-1、胃癌細(xì)胞株 SGC7901 和 MGC8Western blot 檢測及細(xì)胞免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn) FBXO39 在胃癌細(xì)胞 SGC7MGC803 中的表達(dá)水平要高于正常胃上皮細(xì)胞 GES-1。
XO39 在胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況培養(yǎng)胃正常上皮細(xì)胞 GES-1、胃癌細(xì)胞株 SGC7901 和 MGblot 檢測及細(xì)胞免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn) FBXO39 在胃癌細(xì)胞 SG 中的表達(dá)水平要高于正常胃上皮細(xì)胞 GES-1。圖 3.1 FBXO39 細(xì)胞系中蛋白表達(dá)強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖,,*P < 0.01
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R735.2
本文編號(hào):2618785
【圖文】:
第 3 章 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果3.1 FBXO39 在胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況體外培養(yǎng)胃正常上皮細(xì)胞 GES-1、胃癌細(xì)胞株 SGC7901 和 MGC8Western blot 檢測及細(xì)胞免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn) FBXO39 在胃癌細(xì)胞 SGC7MGC803 中的表達(dá)水平要高于正常胃上皮細(xì)胞 GES-1。
XO39 在胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況培養(yǎng)胃正常上皮細(xì)胞 GES-1、胃癌細(xì)胞株 SGC7901 和 MGblot 檢測及細(xì)胞免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn) FBXO39 在胃癌細(xì)胞 SG 中的表達(dá)水平要高于正常胃上皮細(xì)胞 GES-1。圖 3.1 FBXO39 細(xì)胞系中蛋白表達(dá)強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖,,*P < 0.01
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R735.2
【參考文獻(xiàn)】
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1 Chia-Hsin Chan;;Novel roles of Skp2 E3 ligase in cellular senescence,cancer progression,and metastasis[J];癌癥;2012年04期
2 楊春華;劉英;伍會(huì)健;;β-Trcp與腫瘤關(guān)系的研究[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2011年07期
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1 劉智勇;CTA抗原FBXO39在腫瘤細(xì)胞中的生物學(xué)功能探討[D];湖南大學(xué);2016年
本文編號(hào):2618785
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