【摘要】：目的探討新的促癌分子腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白3(TIPE3)是否影響乳腺癌細(xì)胞MCF-7對(duì)阿霉素的敏感性及其機(jī)制。方法以0、0.5、1.0、1.5μg/m L阿霉素作用于TIPE3表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的MCF-7細(xì)胞,分別采用細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒(CCK-8)、流式細(xì)胞術(shù)分析TIPE3對(duì)阿霉素作用的MCF-7細(xì)胞相對(duì)活性及細(xì)胞周期分布的影響;采用Annexin V/PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析TIPE3對(duì)阿霉素作用的MCF-7細(xì)胞凋亡的影響;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)法和蛋白印記(Western blotting)法檢測(cè)核因子-kappa B(NF-κB)信號(hào)通路活化情況、多藥耐藥基因1(MDR 1)及多藥耐藥蛋白P-糖蛋白(P-gp)的表達(dá)。結(jié)果過(guò)表達(dá)TIPE3增加了阿霉素處理MCF-7細(xì)胞的相對(duì)存活率和G2/M期細(xì)胞數(shù),降低細(xì)胞凋亡率;NF-κB信號(hào)通路活化水平增加,多藥耐藥基因MDR1及其表達(dá)蛋白P-gp的表達(dá)水平升高。結(jié)論 TIPE3通過(guò)活化NF-κB信號(hào)通路上調(diào)P-gp的表達(dá)進(jìn)而降低MCF-7細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性。
【圖文】：

廉開(kāi)禮，等．TIPE3上調(diào)P-gp表達(dá)降低乳腺癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性39圖1TIPE3影響阿霉素處理MCF-7細(xì)胞的相對(duì)活性A:TIPE3過(guò)表達(dá)檢測(cè);B:CCK-8檢測(cè)阿霉素處理對(duì)照組和MCF-7-TIPE3組細(xì)胞相對(duì)活性;C:對(duì)照組和TIPE3組細(xì)胞相對(duì)活性差值與阿霉素濃度的相關(guān)性。*P＜0．05，#P＜0．01，△P＜0．001vs對(duì)照組。Fig．1TIPE3affectedrelativeviabilityofMCF-7cellstreatedwithadriamycinA:TIPE3proteininMCF-7cellstransfectedwithpＲK5-TIPE3wasdeterminedbyWesternblotting;B:ＲelativeviabilityofcontrolgroupandMCF-7-TIPE3cellssubjectedtoadriamycinweredetectedbyCCK-8method;C:TherelativeactivitydifferencebetweenthecontrolgroupandtheTIPE3groupwascorrelatedwiththeconcentrationofadriamycin．*P＜0．05，#P＜0．01，，△P＜0．001vscontrolgroup．圖2TIPE3影響阿霉素處理MCF-7細(xì)胞周期分布A:對(duì)照組MCF-7細(xì)胞周期分析;B:0．5μg/mL阿霉素處理對(duì)照組細(xì)胞周期的分析;C:TIPE3對(duì)阿霉素處理MCF-7細(xì)胞周期分布影響;D:0．5μg/mL阿霉素處理MCF-7-TIPE3細(xì)胞周期的分析。*P＜0．05vs對(duì)照組和對(duì)照組+阿霉素;#P＜0．01vs對(duì)照組+阿霉素;△P＜0．001vs對(duì)照組。Fig．2TIPE3affectedcycleproportionofMCF-7cellstreatedwithadriamycinA:CellcycleanalysisofMCF-7cellsincontrolgroup;B:Cellcycleanalysisofcontrolgroupcellstreatedwith0．50μgadriamycin;C:CellcycleanalysisofMCF-7-TIPE3cellstreatedwith0．5μg/mLadriamycin;D:TIPE3affectedcycleproportionofMCF-7cellstreatedwithadriamycin．*P＜0．05vscontrolgroup/controlgroup+adriamycin;#P＜0．01vscontrolgroup+Adriamycin;△P＜0．001vscontrolgroup．

廉開(kāi)禮，等．TIPE3上調(diào)P-gp表達(dá)降低乳腺癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性39圖1TIPE3影響阿霉素處理MCF-7細(xì)胞的相對(duì)活性A:TIPE3過(guò)表達(dá)檢測(cè);B:CCK-8檢測(cè)阿霉素處理對(duì)照組和MCF-7-TIPE3組細(xì)胞相對(duì)活性;C:對(duì)照組和TIPE3組細(xì)胞相對(duì)活性差值與阿霉素濃度的相關(guān)性。*P＜0．05，#P＜0．01，△P＜0．001vs對(duì)照組。Fig．1TIPE3affectedrelativeviabilityofMCF-7cellstreatedwithadriamycinA:TIPE3proteininMCF-7cellstransfectedwithpＲK5-TIPE3wasdeterminedbyWesternblotting;B:ＲelativeviabilityofcontrolgroupandMCF-7-TIPE3cellssubjectedtoadriamycinweredetectedbyCCK-8method;C:TherelativeactivitydifferencebetweenthecontrolgroupandtheTIPE3groupwascorrelatedwiththeconcentrationofadriamycin．*P＜0．05，#P＜0．01，△P＜0．001vscontrolgroup．圖2TIPE3影響阿霉素處理MCF-7細(xì)胞周期分布A:對(duì)照組MCF-7細(xì)胞周期分析;B:0．5μg/mL阿霉素處理對(duì)照組細(xì)胞周期的分析;C:TIPE3對(duì)阿霉素處理MCF-7細(xì)胞周期分布影響;D:0．5μg/mL阿霉素處理MCF-7-TIPE3細(xì)胞周期的分析。*P＜0．05vs對(duì)照組和對(duì)照組+阿霉素;#P＜0．01vs對(duì)照組+阿霉素;△P＜0．001vs對(duì)照組。Fig．2TIPE3affectedcycleproportionofMCF-7cellstreatedwithadriamycinA:CellcycleanalysisofMCF-7cellsincontrolgroup;B:Cellcycleanalysisofcontrolgroupcellstreatedwith0．50μgadriamycin;C:CellcycleanalysisofMCF-7-TIPE3cellstreatedwith0．5μg/mLadriamycin;D:TIPE3affectedcycleproportionofMCF-7cellstreatedwithadriamycin．*P＜0．05vscontrolgroup/controlgroup+adriamycin;#P＜0．01vscontrolgroup+Adriamycin;△P＜0．001vscontrolgroup．

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本文編號(hào)：2582574