發(fā)布時(shí)間：2020-01-28 17:59

【摘要】：目的:觀察人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)對植入低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞動物模型生長的影響情況以及對轉(zhuǎn)移潛能和凋亡趨勢的影響。方法:制作人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞MHCC97-L動物模型,將動物隨機(jī)分為模型實(shí)驗(yàn)組、對照組。實(shí)驗(yàn)組在接種腫瘤后第7 d開始尾靜脈注射BMSCs 5×105/只,模型對照組相同時(shí)間尾靜脈注射BMSCs培養(yǎng)液0.2 m L/只。于實(shí)驗(yàn)開始后每周用卡尺測一次皮下腫瘤體積,分別于腫瘤接種后第14d(2周)、21 d(3周)、28 d(4周)、35 d(5周)、42 d(6周)處死動物,完整剖取瘤塊并稱瘤重和體積,計(jì)算腫瘤抑制率。Real-time PCR法檢測低轉(zhuǎn)移肝癌動物模型標(biāo)本中轉(zhuǎn)移相關(guān)因子骨橋蛋白(osteopontin,OPN)、骨唾液蛋白(bone salivary protein,BSP)、整合素(integrinαⅤ)基因以及凋亡相關(guān)因子Bcl-2、Bax、caspase3基因的表達(dá)。結(jié)果:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對腫瘤重量和體積的抑制作用在第3周具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)組腫瘤重量顯著低于對照組。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對腫瘤的抑制作用在第2、3、5、6周均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)組腫瘤體積顯著低于對照組。實(shí)驗(yàn)組腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)因子表達(dá)均低于對照組,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞干預(yù)后腫瘤促凋亡因子Bax、caspase3的表達(dá)呈升高趨勢,抗凋亡因子Bcl-2的表達(dá)逐漸下降。結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞MHCC97-L的生長具有抑制作用,且第3周時(shí)抑制效果最好,隨著時(shí)間的延長,腫瘤抑制率逐漸下降。
【圖文】：

嗵４婷鞒⊥枷瘢囝鄓饌枷癲?用軟件進(jìn)行熒光強(qiáng)度分析。觀察BMSCs與肝癌組織細(xì)胞融合圖像發(fā)現(xiàn)BMSCs進(jìn)入腫瘤組織。圖中腫瘤組織細(xì)胞呈綠色，BMSCs細(xì)胞呈藍(lán)色（圖5）。圖1腫瘤重量抑制率與轉(zhuǎn)移因子相關(guān)性分析Figure1Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandtransferfactor圖2腫瘤重量抑制率與凋亡因子相關(guān)性分析Figure2Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandapop-tosisfactor圖3腫瘤體積抑制率與轉(zhuǎn)移因子相關(guān)性分析Figure3Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandtransferfactor圖4腫瘤體積抑制率與凋亡因子相關(guān)性分析Figure4Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandapoptosisfactor圖5BMSCs對肝癌（MHCC97-H）干預(yù)情況的病理切片熒光成像（fluorescencestaining×200）Figure5Effectofbonemarrowmesenchymalstemcellsonlivercan-cer(MHCC97-L)detectedbyfluorescenceimaging(GFPlabelthetumorcellsingreencolor,Ex,488nm;Em,543nm;DAPImarktheBMSCsinblue,Ex,358nm;Em,461nm)(×200)3討論手術(shù)切除仍為HCC治療的首選方法，但經(jīng)手術(shù)切除治療后的患者仍具有較高的術(shù)后復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率［7］。開辟新療法成為了肝癌研究領(lǐng)域的重要任務(wù)。1974年首次從骨髓中分離獲得BMSCs［8］，其具有對炎癥和腫瘤發(fā)生位點(diǎn)的趨向性［9］，容易在體外培養(yǎng)進(jìn)行繁殖并維持自我更新能力，集中向炎癥組織和重塑組織遷移，具有較低的免疫原性和抗感染特性［10］，有助于器官和組織的快速修復(fù)，抑制免疫反應(yīng)和抗肝纖維化。BMSCs抑制MHCC97-L動物模型腫瘤增長的作用機(jī)制可能通過以下途徑進(jìn)行。OPN通過結(jié)合其受體整合素αvβ3促進(jìn)肝癌細(xì)胞株HepG膜型CD44v6表達(dá)，而CD44v6與透明質(zhì)酸結(jié)合促

鱟櫓?細(xì)胞呈綠色，，BMSCs細(xì)胞呈藍(lán)色（圖5）。圖1腫瘤重量抑制率與轉(zhuǎn)移因子相關(guān)性分析Figure1Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandtransferfactor圖2腫瘤重量抑制率與凋亡因子相關(guān)性分析Figure2Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandapop-tosisfactor圖3腫瘤體積抑制率與轉(zhuǎn)移因子相關(guān)性分析Figure3Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandtransferfactor圖4腫瘤體積抑制率與凋亡因子相關(guān)性分析Figure4Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandapoptosisfactor圖5BMSCs對肝癌（MHCC97-H）干預(yù)情況的病理切片熒光成像（fluorescencestaining×200）Figure5Effectofbonemarrowmesenchymalstemcellsonlivercan-cer(MHCC97-L)detectedbyfluorescenceimaging(GFPlabelthetumorcellsingreencolor,Ex,488nm;Em,543nm;DAPImarktheBMSCsinblue,Ex,358nm;Em,461nm)(×200)3討論手術(shù)切除仍為HCC治療的首選方法，但經(jīng)手術(shù)切除治療后的患者仍具有較高的術(shù)后復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率［7］。開辟新療法成為了肝癌研究領(lǐng)域的重要任務(wù)。1974年首次從骨髓中分離獲得BMSCs［8］，其具有對炎癥和腫瘤發(fā)生位點(diǎn)的趨向性［9］，容易在體外培養(yǎng)進(jìn)行繁殖并維持自我更新能力，集中向炎癥組織和重塑組織遷移，具有較低的免疫原性和抗感染特性［10］，有助于器官和組織的快速修復(fù)，抑制免疫反應(yīng)和抗肝纖維化。BMSCs抑制MHCC97-L動物模型腫瘤增長的作用機(jī)制可能通過以下途徑進(jìn)行。OPN通過結(jié)合其受體整合素αvβ3促進(jìn)肝癌細(xì)胞株HepG膜型CD44v6表達(dá)，而CD44v6與透明質(zhì)酸結(jié)合促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移，BMSCs通過抑制OPN與IntegrinαⅤ的表達(dá)來阻止肝癌的增長與轉(zhuǎn)移。Bax與Bcl-2基因是目前在凋亡調(diào)控中研究

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本文編號：2574099