【摘要】：目的食管癌是人類(lèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,占所有惡性腫瘤的2%,每年全球約有40萬(wàn)人死于食管癌。我國(guó)是食管癌高發(fā)地區(qū)之一。癌基因和抑癌基因表達(dá)的失調(diào)造成細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的改變,繼而帶來(lái)癌細(xì)胞的發(fā)生和發(fā)展。p53是人體內(nèi)重要的抑癌基因,akt是人體內(nèi)重要的癌基因。在正常人體細(xì)胞內(nèi)兩者處于動(dòng)態(tài)平衡中,共同調(diào)節(jié)了細(xì)胞的增殖和凋亡。癌細(xì)胞凋亡和增殖的失衡提示其細(xì)胞內(nèi)P53和Akt的表達(dá)較正常人體細(xì)胞發(fā)生了變化。本文旨在探究食管癌細(xì)胞中兩個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路上游節(jié)點(diǎn):P53和Akt蛋白之間的關(guān)系正常細(xì)胞發(fā)生了何種變化,初步明確其在癌細(xì)胞內(nèi)的生物學(xué)特性,從而更好地了解腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展。方法取手術(shù)切除的食管癌及癌旁組織制成病理切片并行免疫組化檢查,檢測(cè)有無(wú)p-Akt1,p-Akt2,Akt和P53蛋白表達(dá);取TE-1食管高分化鱗癌細(xì)胞培養(yǎng),提取細(xì)胞蛋白western blot法檢測(cè)其p-Akt1,p-Akt2,Akt和P53濃度;再分別使用P53抑制劑Pifithrin-α,Akt1抑制劑A-674563,Akt2抑制劑CCT128930作用于TE-1細(xì)胞,分別提取細(xì)胞蛋白,western blot法檢測(cè)p-Akt1,p-Akt2和P53濃度,觀察蛋白之間相互關(guān)系;取人體食管癌組織對(duì)p53基因外顯子進(jìn)行基因測(cè)序,并比對(duì)GENEBANK發(fā)現(xiàn)其突變,對(duì)比相關(guān)文獻(xiàn)明確突變類(lèi)型;結(jié)果50 例食管癌組織中,分別 52%(26/50)、42%(21/50)、30%(15/50)、66%(33/50)的食管癌組織表達(dá)P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,癌旁組織分別22%(11/50)、18%(9/50)、8%(4/50)、28%(14/50)的癌旁組織表達(dá)P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,食管癌顯著表達(dá)更多的P53(p=0.002)、Akt(p=0.009)、p-Akt1(p=0.005)和p-Akt2(p=0.000)蛋白。跟中高分化食管癌、Ⅲ+Ⅳ期食管癌、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌相比,P53蛋白在低分化食管癌、Ⅰ+Ⅱ期食管癌、沒(méi)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌中表達(dá)沒(méi)有顯著增加(p0.05)。跟中高分化食管癌、Ⅲ+Ⅳ期食管癌相比,Akt,p-Akt1,p-Akt2蛋白在低分化食管癌、Ⅰ+Ⅱ期食管癌中表達(dá)沒(méi)有顯著增加(p0.05);在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌中Akt,p-Akt1,p-Akt2蛋白表達(dá)顯著增加(p0.05,提示Akt蛋白的兩個(gè)亞型參與了食管癌細(xì)胞再淋巴結(jié)內(nèi)的轉(zhuǎn)移。和對(duì)照組相比,使用P53抑制劑Pifithrin-α的食管癌TE-1細(xì)胞P53、Akt、p-Akt1表達(dá)量明顯下降(p=0.002,p=0.032,p=0.016);p-Akt2表達(dá)量沒(méi)有明顯下降(p=0.133);使用p-akt1抑制劑A-674563后P53、Akt、p-Akt1表達(dá)量明顯下降(p=0.004,p=0.004,p=0.011);p-Akt2表達(dá)量沒(méi)有明顯下降(p=0.519)。使用 p-akt2 抑制劑 CCT128930 后 P53、Akt、p-Akt1、p-Akt2 表達(dá)量明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.014,p=0.013,p=0.010,p=0.005)。在50例食管癌組織標(biāo)本中均未測(cè)出有R175H、H179R、R248Q和R273H位置的突變。結(jié)論食管癌較正常組織表達(dá)更多的P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,Akt1和Akt2蛋白可能參與了食管癌細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。異于正常組織里P53和Akt之間的相互抑制關(guān)系,在食管癌細(xì)胞內(nèi)P53蛋白和Akt1、Akt2蛋白互為促進(jìn),共同介導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展。但是蛋白之間這一相互關(guān)系的變化并不是p53基因發(fā)生突變出現(xiàn)p53R175H、H179R、R248Q和R273H突變體的原因,仍需進(jìn)一步的研究闡明其機(jī)理。
【圖文】：

圖３邋ｐ－Ａｋｔｌ蛋白在食管癌組織中表達(dá)邐圖４邐ｐ－Ａｋｔ２蛋白在食管癌組織中表達(dá)逡逑為陽(yáng)性（ｘ邋２００）邐為陽(yáng)性（ｘ邋２００）逡逑表１邋Ｐ５３蛋白在食管癌及癌旁組織中的表達(dá)逡逑ｍ＼邐Ｍｌ邐Ｐ５３邐Ｐ逡逑ｍ±邐ｉｌ逡逑癌組織邐５０邐＾邐２４邐Ｍ0２逡逑癌旁粘膜邐５０邐１１邐３９逡逑表２邋Ａｋｔ蛋白在食管癌及癌旁組織中的表達(dá)逡逑ｍ＼邐Ｍｌ邐Ａｋｔ邐ｐ逡逑ｉｌ邐ｉｌ逡逑

圖３邋ｐ－Ａｋｔｌ蛋白在食管癌組織中表達(dá)邐圖４邐ｐ－Ａｋｔ２蛋白在食管癌組織中表達(dá)逡逑為陽(yáng)性（ｘ邋２００）邐為陽(yáng)性（ｘ邋２００）逡逑表１邋Ｐ５３蛋白在食管癌及癌旁組織中的表達(dá)逡逑ｍ＼邐Ｍｌ邐Ｐ５３邐Ｐ逡逑ｍ±邐ｉｌ逡逑癌組織邐５０邐＾邐２４邐Ｍ0２逡逑癌旁粘膜邐５０邐１１邐３９逡逑表２邋Ａｋｔ蛋白在食管癌及癌旁組織中的表達(dá)逡逑ｍ＼邐Ｍｌ邐Ａｋｔ邐ｐ逡逑ｉｌ邐ｉｌ逡逑
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R735.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉立中,唐軍民,唐巖;中線非霍奇金惡性淋巴瘤組織中p53蛋白的表達(dá)[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;1998年08期

2 朱景明,桑娟;子宮頸鱗狀細(xì)胞癌中P53蛋白的表達(dá)[J];航空航天醫(yī)藥;2003年02期

3 宋林紅 ,李科 ,奚玲;p53蛋白在復(fù)發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤病中的表達(dá)與臨床意義探討[J];中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù);2003年01期

4 李衛(wèi)東;p53蛋白在中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中的表達(dá)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1993年03期

5 王德輝,李懷勝,趙惠卿,王麗妍,袁慧鈞;鼻內(nèi)翻性乳頭狀瘤及其癌變與p53蛋白異常表達(dá)[J];中國(guó)耳鼻咽喉顱底外科雜志;1998年04期

6 劉素玲,田中太;子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞周期分布與突變P53蛋白的表達(dá)[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2005年07期

7 肖志波;郝立君;任立宏;滕雯;;人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中P53蛋白對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J];中國(guó)臨床康復(fù);2006年13期

8 肖志波;郝立君;龐建華;任麗虹;滕雯;;P53蛋白對(duì)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶1、3表達(dá)的影響[J];中華醫(yī)學(xué)美學(xué)美容雜志;2006年03期

9 江沛,麥惠成,王純直;食管鱗狀細(xì)胞癌組織中P53蛋白的積聚及其臨床意義[J];河南腫瘤學(xué)雜志;1997年01期

10 何國(guó)斌,姜育紅,趙紅宇,石愛(ài)梅;P53蛋白在人口腔粘膜鱗狀細(xì)胞癌及白斑的表達(dá)[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;1999年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 吳逸明;董海燕;吳擁軍;陳琛;;肺癌組織P33ING1的表達(dá)及其與P53蛋白的關(guān)系[A];2003年全國(guó)免疫毒理學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2003年

2 秦建領(lǐng);張霞;王國(guó)斌;郭勇;;端粒酶活性及p53蛋白在肺癌中的表達(dá)及其與預(yù)后關(guān)系[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腫瘤專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第六次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2005年

3 李一偉;Fazlul Sarkar;;p53蛋白三維結(jié)構(gòu)的改變與胰腺癌病人生存率的關(guān)系[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

4 黃方;;p53蛋白的單分子熒光研究[A];第一屆全國(guó)生物物理化學(xué)會(huì)議暨生物物理化學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略研討會(huì)論文摘要集[C];2010年

5 王影;楊素瓊;李吉滿(mǎn);楊薇;覃勝;孫維綱;;甲基轉(zhuǎn)移酶和P53蛋白在膀胱尿路上皮乳頭狀癌中的表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國(guó)病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

6 馬春梅;張世棋;王德仲;蔣麗娜;薄愛(ài)華;張曉麗;;P53蛋白在食道正常,增生和癌變上皮中的表達(dá)[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

7 房佰俊;王耀美;劉玉章;向譜;李玉富;宋永平;;姜黃素對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系表達(dá)P53蛋白影響的研究[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

8 白冬梅;鄭曉峰;;核糖體蛋白R(shí)PL6在核仁壓力下對(duì)p53蛋白的調(diào)控機(jī)制[A];細(xì)胞—生命的基礎(chǔ)——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2013年全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)·武漢論文摘要集[C];2013年

9 祝小林;劉少英;劉紅兵;;鼻咽癌中bc1-2及P53蛋白的檢測(cè)[A];中西醫(yī)結(jié)合“四種耳病”學(xué)術(shù)會(huì)匯編[C];2001年

10 余傳定;許沈華;倪型灝;凌雨田;張谷;朱赤紅;劉祥麟;;胃癌P-gp和P53蛋白的表達(dá)及其相關(guān)性研究[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 劉永波;瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞Fas及P53蛋白凋亡缺陷的相關(guān)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

2 楊建良;高表達(dá)p53蛋白的樹(shù)突狀細(xì)胞腫瘤疫苗[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

3 金富軍;Bre通過(guò)增強(qiáng)p53蛋白的泛素化降解促進(jìn)成骨分化[D];暨南大學(xué);2017年

4 朱劍武;基于APE1和p53蛋白序列的多肽陣列設(shè)計(jì)及其線粒體定位序列的篩選[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

5 韓增{，

本文編號(hào)：2572017