【摘要】：胃癌是威脅人類健康的主要惡性腫瘤之一,盡管治療手段及水平不斷提高,但治療效果尚不理想,因此尋找新的胃癌早期診斷和預(yù)后判斷指標(biāo),研究影響胃癌發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后的免疫機(jī)制,探索胃癌治療的新靶點(diǎn)十分迫切。負(fù)性協(xié)同刺激分子B7-H4是B7家族新成員,主要表達(dá)在巨噬細(xì)胞、成熟的樹突狀細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞以及活化的T細(xì)胞上,可通過抑制T細(xì)胞的增殖、細(xì)胞因子的產(chǎn)生和細(xì)胞周期負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞的免疫應(yīng)答,并在介導(dǎo)腫瘤免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用。近年來,對(duì)腫瘤微環(huán)境和腫瘤免疫逃逸機(jī)制的深入研究發(fā)現(xiàn),B7-H4可異常表達(dá)于諸多人類腫瘤組織及腫瘤浸潤(rùn)的免疫細(xì)胞,參與腫瘤免疫逃逸,是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分,一方面通過負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤應(yīng)答,另一方面通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞自身的生物學(xué)行為,共同參與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。本研究通過采用免疫組織化學(xué)、免疫熒光染色、激光共聚焦技術(shù)以及流式細(xì)胞術(shù),分別檢測(cè)B7-H4在胃癌組織、胃癌浸潤(rùn)免疫細(xì)胞及外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表達(dá)及定位,為進(jìn)一步研究B7-H4在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。目的:探討負(fù)性協(xié)同刺激分子B7-H4在胃癌組織及浸潤(rùn)免疫細(xì)胞亞群中的表達(dá)及定位。方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)、免疫熒光染色及激光共聚焦技術(shù)檢測(cè)B7-H4蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及定位;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析胃癌患者PBMCs亞群(CD3+T細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞、CD14+單核細(xì)胞及粒細(xì)胞)中B7-H4的表達(dá)。結(jié)果:免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明,B7-H4在胃癌組織中呈陽(yáng)性表達(dá)。免疫熒光染色及激光共聚焦檢測(cè)結(jié)果顯示,B7-H4在胃癌組織中呈陽(yáng)性表達(dá),并主要定位于胃癌細(xì)胞的細(xì)胞膜,特別是在Ki67+高度增殖的胃癌細(xì)胞中B7-H4呈高表達(dá),且B7-H4在CD34+血管內(nèi)皮細(xì)胞中呈高表達(dá);B7-H4在浸潤(rùn)C(jī)D19+B細(xì)胞和CD68+巨噬細(xì)胞中呈高表達(dá);而在胃癌浸潤(rùn)C(jī)D4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及CD57+NK細(xì)胞中呈弱表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明,B7-H4在胃癌患者外周血浸潤(rùn)C(jī)D19+B細(xì)胞及粒細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá),而在浸潤(rùn)C(jī)D3+T細(xì)胞及CD14+單核細(xì)胞中呈弱表達(dá)。結(jié)論:B7-H4在胃癌組織中可表達(dá)于腫瘤細(xì)胞和部分浸潤(rùn)免疫細(xì)胞。檢測(cè)B7-H4的表達(dá)可作為潛在的胃癌診斷、治療及預(yù)后判斷的新靶點(diǎn)。
【圖文】：

胞的免疫逃逸[57]。調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞(Treg)也能通過誘導(dǎo)抗原遞呈細(xì)胞 APC 分泌 IL-10來促使 APC 上調(diào)表達(dá) B7-H4，形成有助于腫瘤免疫逃逸的“調(diào)節(jié)性 APC”細(xì)胞[53]。B7-H4 分子不僅在幫助癌細(xì)胞逃逸活化 T 細(xì)胞的殺傷作用時(shí)有重要作用，而且對(duì)維持腫瘤細(xì)胞自身的生存也有一定的促進(jìn)作用。Salseda 等人運(yùn)用 siRNA 技術(shù)降低腫瘤細(xì)胞中 B7-H4 分子的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，與 siRNA 法降低抗凋亡蛋白 DAXX 表達(dá)的陽(yáng)性對(duì)照組一樣[55]，不僅腫瘤細(xì)胞發(fā)生了明顯的凋亡現(xiàn)象，而且參與細(xì)胞調(diào)亡的半胱天冬氨酸蛋白酶 caspase 3 和 caspase 7 活性明顯增強(qiáng)[63]。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，相比癌旁組織，81.5%的腎癌病人腫瘤血管內(nèi)皮上中度表達(dá) B7-H4，這預(yù)示著 B7-H4 還可能參與了腫瘤新生血管的形成，，從而為維持腫瘤的生長(zhǎng)提供了必要的條件。已有多項(xiàng)研究表明，B7-H4 分子通過抑制適應(yīng)性免疫應(yīng)答抑制腫瘤免疫，也是重要的固有免疫應(yīng)答的負(fù)性調(diào)節(jié)者[64]。這些研究表明，B7-H4 在腫瘤細(xì)胞和浸潤(rùn)免疫細(xì)胞中可能作用不同，表達(dá)調(diào)控因素也不同，不同的調(diào)節(jié)機(jī)制可能與腫瘤微環(huán)境不同調(diào)節(jié)因子相關(guān)，深入研究B7-H4 在腫瘤組織表達(dá)的相關(guān)機(jī)制將有助于揭示其確切的作用。

圖 1 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)胃癌組織及胃炎組織中 B7-H4 的表達(dá)A．胃癌 H&E 染色；B．胃癌 B7-H4 陽(yáng)性表達(dá)(×200)；C．胃癌 B7-H4 陽(yáng)性表達(dá)(×400)D．胃炎 H&E 染色；E．胃炎 B7-H4 陰性表達(dá)(×200)；F．胃炎 B7-H4 陰性表達(dá)(×400)圖 2 免疫熒光染色陰性對(duì)照
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Anya N Milne;G Johan A Offerhaus;;Early-onset gastric cancer:Learning lessons from the young[J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2010年02期

本文編號(hào)：2560583