【摘要】：目的研究幽門螺桿菌相關(guān)miRNA-148b在胃癌中過表達(dá)與幽門螺桿菌(H.pylori)感染的相關(guān)性及其在胃癌細(xì)胞增殖及侵襲中的分子機(jī)制。方法本研究首先建立穩(wěn)定的H.pylori感染人胃上皮細(xì)胞模型;檢測H.pylori感染前后胃上皮細(xì)胞的miRNAs表達(dá)譜變化,篩選出感染后miRNA-148b表達(dá)顯著上調(diào)的為研究對象。選擇胃癌細(xì)胞系A(chǔ)GS、HGC-27、SGC-7901及人正常胃上皮細(xì)胞GES-1為研究對象。設(shè)計合成miRNA-148b特異性siRNA及miRNA-148b的過表達(dá)質(zhì)粒,抑制或過表達(dá)miRNA-148b的表達(dá)水平,通過細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn),Transwell小室細(xì)胞侵襲等實(shí)驗(yàn),研究miRNA-148b在胃癌細(xì)胞增殖及侵襲中的作用。探討miRNA-148b在胃癌細(xì)胞增殖侵襲中的分子作用機(jī)制。結(jié)果 realtime PCR檢測,H.pylori在感染胃上皮細(xì)胞GES-1、胃癌細(xì)胞株AGS、HGC-27、SGC-7901后miR-148b表達(dá)升高,不同胃癌細(xì)胞株較正常胃黏膜miR-148b表達(dá)下降,在體外,發(fā)現(xiàn)miR-148b可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞株AGS、HGC-27、SGC-7901細(xì)胞的增殖,抑制胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞的凋亡;證實(shí)抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1為miR-148b的靶基因,在胃癌細(xì)胞株和胃癌組織中miR-148b和PAI-1的表達(dá)水平呈顯著負(fù)相關(guān)。結(jié)論通過H.pylori感染胃上皮細(xì)胞株前后miR-148b的表達(dá)檢測,驗(yàn)證了先前的miRNAs芯片檢測結(jié)果,在體外,過表達(dá)miR-148b促進(jìn)胃癌細(xì)胞株增殖,抑制其凋亡,提示機(jī)體可能以這種方式減緩在H.pylori感染早期所誘導(dǎo)的胃上皮細(xì)胞的過度凋亡進(jìn)程,從而發(fā)揮了相應(yīng)的保護(hù)作用;相對于正常胃黏膜組織,在不同胃癌細(xì)胞株中miR-148b都表達(dá)下調(diào)暗示,在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中,miR-148b可能作為一個抑癌基因而被抑制,證實(shí)抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1為miR-148b的靶基因,提示miR-148b在H.pylori感染和胃癌發(fā)生的不同時期功能不同。

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2555217